Summary

Quantifizierung von Schwermetallen und anderen anorganischen Kontaminanten auf die Produktivität von Mikroalgen

Published: July 10, 2015
doi:

Summary

Integration of microalgal cultivation with industrial flue gas will ultimately introduce heavy metals and other inorganic compounds into the growth media. This study presents a procedure used to determine the end fate and impact of heavy metals and inorganic contaminants on the growth of Nannochloropsis salina grown in photobioreactors.

Abstract

Die zunehmende Nachfrage nach erneuerbaren Kraftstoffen hat Forscher die Machbarkeit alternativer Einsatzmaterialien, wie beispielsweise Mikroalgen. Inhärenten Vorteile sind die hohe Ertragspotenzial, Verwendung von Nicht-Ackerland und die Integration mit Abfallströmen. Die Nährstoffbedarf eines großen Mikroalgen-Produktionssystem wird die Kopplung von Anbausystemen mit Industrieabfällen Ressourcen wie Kohlendioxid aus Rauchgas und Nährstoffe aus dem Abwasser erforderlich. In diesen Abfällen vorhanden anorganischen Verunreinigungen kann potenziell zu Bioakkumulation in Mikroalgen-Biomasse führen, sich negativ auf die Produktivität und die Begrenzung der Endanwendung. Diese Studie konzentriert sich auf die experimentelle Evaluierung der Auswirkungen und das Schicksal von 14 anorganischen Verunreinigungen (As, Cd, Co, Cr, Cu, Hg, Mn, Ni, Pb, Sb, Se, Sn, V und Zn) auf Nannochloropsis salina Wachstum . Mikroalgen in Photobioreaktoren bei 984 & mgr; mol m -2 s belichtet bei pH 7 in einem Wachstums m -1 kultiviert und gepflegtEdia verschmutzt mit anorganischer Verunreinigungen in Konzentrationen erwartet, basierend auf der Zusammensetzung in kommerziellen Kohlenabgasanlagen gefunden. In der Biomasse und dem Medium am Ende einer 7-tägigen Wachstumsperiode vorhandenen Verunreinigungen wurden analytisch durch Kaltdampf-Atomabsorptionsspektrometrie für Hg und durch induktiv gekoppelte Plasma-Massenspektrometrie für As, Cd, Co, Cr, Cu, Mn, Ni quantifiziert, Pb, Sb, Se, Sn, V und Zn. Die Ergebnisse zeigen, N. salina ist ein empfindlicher Stamm, der zur Mehrmetall-Umgebung mit einer statistischen Abnahme der Biomasse yieldwith der Einführung dieser Verunreinigungen. Die hier vorgestellten Techniken sind ausreichend für die Quantifizierung von Algenwachstum und Bestimmung des Schicksals von anorganischen Verunreinigungen.

Introduction

Im Vergleich zu herkömmlichen terrestrischen Kulturpflanzen Mikroalgen sind gezeigt worden, um höhere Biomasse und Lipid Ausbeuten aufgrund inhärenter höherer Solarumwandlungseffizienzen 1,2 erzielen. Kultivierung von Mikroalgen bei hohen Produktivitätsraten erfordert die Versorgung mit verschiedenen Nährstoffen, einschließlich einer externen Kohlenstoffquelle. Es wird erwartet, dass großflächige Wachstum Einrichtungen werden mit industriellen Abfallströme wie industriellen Abgas um die Produktionskosten zu minimieren integrieren und gleichzeitig bieten Umweltsanierung. Industrieabfälle Kohlenstoff ist in der Regel in Form von gasförmigem Kohlendioxid und Schadstoffe, die das Potenzial, sich negativ auf die Produktion von Mikroalgen haben, enthalten. Konkret wird Rauchgas aus Kohle eine Vielzahl von Verunreinigungen aufweisen, einschließlich aber nicht beschränkt auf Verbrennungsprodukte Wasser und Kohlendioxid, sowie Oxide von Schwefel und Stickstoff, Feinstaub, organische Verunreinigungen, wie Dioxine und Furane sowie anorganische con begrenztSchadstoffe wie Schwermetalle. Die Auswirkungen der meisten dieser Verunreinigungen, einschließlich anorganische Stoffe mit einigen von ihnen, wie Schwermetalle auf Mikroalgen Produktivität bekannt wurden nicht untersucht worden. Einige dieser Elemente können Nährstoffe in geeigneten Konzentrationen sein, aber bei höheren Konzentrationen sie Zelldysfunktion und sogar Tod 3 produzieren kann.

Die Integration von Mikroalgen mit industriellen Abgas hat das Potential, anorganischen Verunreinigungen in das Wachstumsmedium direkt einzuführen. Kohlebasis Abgas hat eine Vielzahl von anorganischen Elementen (beispielsweise As, Cd, Co, Cr, Cu, Hg, Mn, Ni, Pb, Sb, Se, Sn, V und Zn) in verschiedenen Konzentrationen von denen einige, in niedrigen Konzentration, stellen Nährstoffe für Mikroalgenwachstum. Anorganischen Verunreinigungen haben eine hohe Affinität zu den Mikroalgen zu binden und weiter intern durch Nährstofftransport sorbiert werden. Einige anorganische Verunreinigungen (dh, Co, Cu, Zn und Mn) sind Nährstoffe, die Bestandteil von Enzymen bilden beinhaltend in der Photosynthese, Atmung und andere Funktionen 3,4. Jedoch im Überschuß von Metallen und Metalloiden können toxisch sein. Andere Elemente, wie Pb, Cd, Sn, Sb, Se, As und Hg, sind nicht bekannt, die Zellfunktion in jeder Konzentration unterstützt und stellen nicht-Nährstoff Metalle, die sich negativ auswirken könnte Kulturwachstum 3,5,6. Das Vorhandensein von jeder dieser Verunreinigungen hat das Potenzial, negative Auswirkungen auf die Mikroalgenzellfunktion zu erzeugen. Weiterhin ist die Wechselwirkung von mehreren Metallen mit Mikroalgen verkompliziert Wachstumsdynamik und das Potential hat, das Wachstum auswirken.

Großökonomie wurden direkt auf die Produktivität des Kultivierungssystem 7-19 verbunden. Außerdem ist Medium Rückführung in der Mikroalge Wachstumssystem für entweder offen Laufbahn Teichen (ORP) oder Photobioreaktoren (PBR) kritisch, da sie repräsentiert 99,9 und 99,4% der Masse, bzw. 20. Die Anwesenheit von anorganischen Verunreinigungen in den Medien könnte letztlich begrenzen microalgae Produktivität und das Recycling von Medien durch Verunreinigung Aufbau. Diese Studie experimentell bestimmt die Auswirkungen 14 anorganischen Verunreinigungen (As, Cd, Co, Cr, Cu, Hg, Mn, Ni, Pb, Sb, Se, Sn, V und Zn) in Konzentrationen von der Integration von Mikroalgen Kultivierungssysteme erwartet Kohle abgeleiteten Rauchgas, auf die Produktivität der N. salina in Luftbrücke PBRs gewachsen. Die in dieser Studie verwendeten Verunreinigungen haben gezeigt, dass nicht nur in Steinkohle gewonnene Rauchgas aber Siedlungsabfall-basierte Abgas, biosolids-basierte Abgas, kommunales Abwasser, erzeugt Wasser, beeinträchtigt das Grundwasser und Meerwasser 21-23 vorliegen. Die in dieser Studie verwendeten Konzentrationen sind auf erwarten wäre, wenn Mikroalgenwachstumssysteme wurden mit einem Kohlebasis CO 2 -Quelle mit einer Aufnahmeeffizienz in kommerziellen PBR Systeme 20 gezeigt, integriert werden kann. Detaillierte Berechnungen unterstützen die Konzentration der Schwermetalle und anorganische Verunreinigungen werden in Napan vorgestelltet al. 24 Analytische Techniken wurden verwendet, um die Verteilung der meisten Metalle in den Biomasse, Medien und Umwelt zu verstehen. Die vorgestellten Methoden ermöglichte die Beurteilung der Produktivitätspotenzial von Mikroalgen unter anorganische Kontaminanten Stress und Quantifizierung ihrer Ende Schicksal.

Protocol

1. Wachstum System Abbildung 1. Mikroalgen Wachstum-System. (A) Luft Rotometer, (B) CO 2 Rotometer, (C) pH-Regler mit Magnet, (D) Datenlogger (E) in-line Luftfilter (F) Luftverteilerkopf, (G) Fluoreszenzlicht Bank, (H) pH-Meter, …

Representative Results

Biomasseerträge Herstellung von N. salina in der in dieser Studie verwendeten PBR Systems stieg von 1 g / l -1 auf 8,5 ± 0,19 g / L -1 (N = 12) für die Steuerung Reaktoren und 4,0 ± 0,3 g / L -1 (N = 12) für den in 7 Tagen Multimetall kontaminiert. Die Experimente erzeugt wiederholbare Daten in dreifacher Ausfertigung Reaktoren und mehrere Stapel auf. 2A zeigt die durchschnittlichen Kulturdichte mit sehr geringen Standardfehler …

Discussion

Saline Mikroalgen N. salina erfolgreich im Wachstums gestaltet System reproduzierbare Ergebnisse und hohe Biomasseerträge angebaut werden. Airlift Mischen für einen gut gemischten suspendierten Kultur mit minimaler Absetzen oder Biofouling auf der 7-tägigen Wachstumsperioden erlaubt. Die minimale Licht Variabilität über die Fluoreszenzlicht Bank wird auch gezeigt, dass deutliche Unterschiede in Wachstum nicht zu produzieren.

Die Studie zeigt, Schwermetall verschmutzten Medien i…

Divulgaciones

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

The authors would like to acknowledge funding from the National Science Foundation (award # 1335550), Utah Water Research Laboratory, Professor Joan McLean and Tessa Guy for their help during the metal/metalloids analysis. The authors also thank Laura Birkhold for her support with the data collection and Danna Olbright.

Materials

Chemicals
Sodium chloride Fisher Scientific S271-3
Calcium chloride dihydrate Fisher Scientific C79-500
Potassium chloride Fisher Scientific P217-500
Sodium meta silicate nonahydrate  Fisher Scientific S408-500
Magnesium sulfate heptahydrate  Fisher Scientific M63-500
Potassium nitrate EMD Chemical PX1520-5
Potassium phosphate monobasic  Fisher Scientific P285-500
Ammonium ferric citrate Fisher Scientific I72-500
Boric acid Fisher Scientific A73-500
Sodium molybdate, dihydrate EMD Chemical SX0650-2
Manganese chloride tetrahydrate Fisher Scientific M87-500
Zinc sulfate heptahydrate Fisher Scientific Z68-500
Cupric sulfate pentahydrate Fisher Scientific C489-500
Biotin  Acros Organics 230090010
Thiamine  Acros Organics 148990100
Vitamin B12  Acros Organics 405920010
Copper (II) chloride dihydrate  Sigma-Aldrich 221783-100G Irritant, Dangerous to the Environment
Lead (II) chloride  Sigma-Aldrich 268690-250G Toxic, Dangerous to the Environment
Sodium dichromate dihydrate  Sigma-Aldrich 398063-100G Oxidizing, Highly Toxic, Dangerous to the Environment
Cobalt (II) chloride hexahydrate  Sigma-Aldrich 255599-100G Toxic, Dangerous to the Environment
Nickel (II) chloride hexahydrate  Sigma-Aldrich 223387-500G Toxic, Dangerous to the Environment
Sodium (meta) arsenite  Sigma-Aldrich 71287 Toxic, Dangerous to the Environment
Cadmium chloride  Sigma-Aldrich 202908-10G Highly Toxic, Dangerous to the Environment
Mercury (II) chloride  Sigma-Aldrich 215465-100G Toxic, Dangerous to the Environment
Tin (II) chloride dihydrate Fisher Scientific T142-500 Corrosive. Suitable for Hg analysis. Very hazardous.
Manganese chloride tetrahydrate Fisher Scientific M87-500
Vanadium (V) oxide Acros Organics 206422500 Dangerous to the Environment
Carbon dioxide  Air Liquide I2301S-1 Compressed
Hydrogen peroxide H325-500 Fisher Scientific 30% in water
ICP-MS standard ICP-MS-6020 High Purity Standards
Mercury standard CGHG1-1 Inorganic Ventures 1000±6 µg/mL in 5% nitric acid
Argon Air Liquide Compressed
Helium Air Liquide Compressed, ultra high purity
Hydrogen Air Liquide Compressed, ultra high purity
Nitric acid Fisher Scientific A509-P212 67-70% nitric acid, trace metal grade. Caution: manipulate under fume hood.
Hydrochloric acid Fisher Scientific A508-P212 35% hydrochloric acid, trace metal grade. Caution: manipulate under fume hood.
Equipment
Scientific prevacuum sterilizer Steris 31626A SV-120
Centrifuge Thermo Fisher 46910 RC-6 Plus
Spectrophotometer Shimadzu 1867 UV-1800
pH controller Hanna BL981411 X4
Rotometer, X5 Dwyer RMA-151-SSV T31Y
Rotometer, X5 Dwyer RMA-26-SSV T35Y
Water bath circulator Fisher Scientific 13-873-45A
Compact chiller VWR 13270-120
Freeze dryer Labconco 7752020
Stir plate Fisher Scientific 11-100-49S
pH lab electrode Phidgets Inc 3550
Inductively coupled plasma mass spectrometer Agilent Technologies 7700 Series ICP-MS Attached to autosampler CETAC ASX-520
FIAS 100 Perkin Elmer Instruments B0506520
Atomic absorption spectrometer Perkin Elmer Instruments AAnalyst 800
Cell heater (quartz) Perkin Elmer Instruments B3120397
Microwave Milestone Programmable, maximum power 1200 W
Microwave rotor Milestone Rotor with 24 75 mL Teflon vessels for closed-vessel microwave assisted digestion.
Materials
0.2 micron syringe filter Whatman 6713-0425
0.2 micron syringe filter Whatman 6713-1650
0.45 micron syringe filter Thermo Fisher F2500-3
Polystyrene tubes Evergreen 222-2094-050 17×100 mm w/cap, 16 mL, polysteryne
Octogonal magnetic stir bars Fisher scientific 14-513-60 Magnets encased in PTFE fluoropolymer

Referencias

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Napan, K., Hess, D., McNeil, B., Quinn, J. C. Quantification of Heavy Metals and Other Inorganic Contaminants on the Productivity of Microalgae. J. Vis. Exp. (101), e52936, doi:10.3791/52936 (2015).

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