Summary

Quantificação de Metais Pesados ​​e outros contaminantes inorgânicos sobre a produtividade de Microalgas

Published: July 10, 2015
doi:

Summary

Integration of microalgal cultivation with industrial flue gas will ultimately introduce heavy metals and other inorganic compounds into the growth media. This study presents a procedure used to determine the end fate and impact of heavy metals and inorganic contaminants on the growth of Nannochloropsis salina grown in photobioreactors.

Abstract

O aumento da demanda por combustíveis renováveis ​​tem pesquisadores que investigam a viabilidade de matérias-primas alternativas, como microalgas. Vantagens inerentes incluem alto potencial de rendimento, a utilização de terras não aráveis ​​e integração com fluxos de resíduos. Os requisitos nutricionais de um sistema de produção em grande escala de microalgas requer o acoplamento de sistemas de cultura com os recursos de resíduos industriais, tais como o dióxido de carbono do gás de combustão e nutrientes de águas residuais. Contaminantes inorgânicos presentes nesses resíduos podem potencialmente levar a bioacumulação na biomassa de microalgas impactar negativamente a produtividade e limitar o uso final. Este estudo centra-se na avaliação experimental do impacto eo destino de 14 contaminantes inorgânicos (As, Cd, Co, Cr, Cu, Hg, Mn, Ni, Pb, Sb, Se, Sn, V e Zn) em Nannochloropsis crescimento salina . As microalgas foram cultivadas em fotobiorreactores iluminados à 984 umol m-2 s-1 e mantido a pH 7 num crescimento mEDIA poluídos com contaminantes inorgânicos em níveis esperados com base na composição encontrada em sistemas de gases de combustão de carvão comerciais. Os contaminantes presentes na biomassa e o meio no final de um período de crescimento de 7 dias foram quantificados analiticamente através de vapor frio a espectrometria de absorção atómica de Hg e através de espectrometria de massa com plasma de As, Cd, Co, Cr, Cu, Mn, Ni, Pb, Sb, Se, Sn, V e Zn. Os resultados mostram N. salina é uma estirpe sensível ao ambiente multi-metal com uma diminuição estatisticamente na biomassa yieldwith a introdução destes contaminantes. As técnicas aqui apresentados são adequados para quantificar o crescimento de algas e a determinação do percurso dos contaminantes inorgânicos.

Introduction

Em comparação com as culturas tradicionais terrestres microalgas têm sido mostrados para alcançar maior rendimento de biomassa e lipídios, devido à eficiência de conversão de energia solar inerentes mais elevados 1,2. O cultivo de microalgas em altas taxas de produtividade requer o fornecimento de vários nutrientes, incluindo uma fonte externa de carbono. Espera-se que as instalações de crescimento em grande escala será integrada com correntes de resíduos industriais, tais como gás de combustão industrial, a fim de minimizar os custos de produção e, ao mesmo tempo, proporcionar a recuperação ambiental. De carbono de resíduos industriais é tipicamente na forma de dióxido de carbono gasoso e pode conter contaminantes que têm o potencial para impactar negativamente a produção de microalgas. Especificamente, o gás de combustão proveniente do carvão vai ter uma variedade de contaminantes, incluindo mas não se limitando a produtos de combustão de dióxido de carbono e água, bem como óxidos de enxofre e azoto, pó fino, contaminantes orgânicos, tais como dioxinas e furanos, e con inorgânicotaminants tais como metais pesados. O impacto da maioria destes contaminantes, incluindo compostos inorgânicos com alguns deles conhecidos como metais pesados ​​sobre a produtividade microalgas não tem sido explorado. Alguns destes elementos pode ser nutrientes para as concentrações adequadas, no entanto, em concentrações mais elevadas podem produzir disfunção celular e até mesmo a morte 3.

A integração de microalgas com gás de combustão industrial tem o potencial para introduzir directamente os contaminantes inorgânicos em meio de crescimento. Gás de combustão com base de carvão tem uma variedade de elementos inorgânicos (por exemplo, As, Cd, Co, Cr, Cu, Hg, Mn, Ni, Pb, Sb, Se, Sn, V e Zn) em várias concentrações alguns dos quais, em baixo concentração, representam nutrientes para o crescimento de microalgas. Contaminantes inorgânicos têm uma elevada afinidade para se ligar a microalgas e ainda ser sorvido internamente através de transportadores de nutrientes. Alguns contaminantes inorgânicos (ie, Co, Cu, Zn e Mn) são nutrientes que fazem parte de enzimas envolvemd na fotossíntese, respiração e outras funções de 3,4. No entanto, em excesso de metais e metalóides podem ser tóxicos. Outros elementos, como Pb, Cd, Sn, Sb, Se, como e Hg, não são conhecidos por suportar a função celular em qualquer concentração e representam metais não-nutrientes que podem afetar negativamente o crescimento 3,5,6 cultura. A presença de qualquer destes contaminantes tem o potencial de produzir efeitos negativos sobre a função das células de microalgas. Além disso, a interacção de vários metais com microalgas complica dinâmica de crescimento e tem o potencial de influenciar o crescimento.

Economia em larga escala têm sido directamente ligada à produtividade do sistema de cultivo 7-19. Além disso, reciclar médio no sistema de crescimento de microalgas tanto para tanques abertos de rolamento (ORP) ou fotobiorreatores (PBR) é fundamental uma vez que representa 99,9 e 99,4% da massa, respectivamente 20. A presença de contaminantes inorgânicos na mídia poderia finalmente limitar microalgae produtividade ea reciclagem de mídia devido à acumulação de contaminantes. Este estudo determinou experimentalmente o impacto de contaminantes inorgânicos 14 (As, Cd, Co, Cr, Cu, Hg, Mn, Ni, Pb, Sb, Se, Sn, V e Zn), em concentrações esperadas a partir da integração de sistemas de cultivo de microalgas com carvão proveniente do gás de combustão, sobre a produtividade de N. salina crescido em PBRs de transporte aéreo. Os contaminantes usados ​​neste estudo foram mostradas para não só estar presente no gás de combustão à base de carvão, mas à base de resíduos de gases de combustão municipais, do resíduo baseada em gás de combustão, de águas residuais municipais, a água produzida, a água do mar e água subterrânea prejudicada 21-23. As concentrações usadas neste estudo são baseadas no que seria esperado se a sistemas de crescimento de microalgas foram integrados com uma base de CO 2 fonte de carvão com uma eficiência de absorção demonstrada em sistemas comerciais de PBR 20. Cálculos detalhados de apoio as concentrações dos metais pesados ​​e contaminantes inorgânicos estão apresentados na Napanet ai. foram utilizados 24 técnicas analíticas para compreender a distribuição da maioria dos metais nos meios de biomassa, e ambiente. Os métodos apresentados permitiu a avaliação do potencial de produtividade das microalgas sob estresse contaminante inorgânico e quantificação do seu destino final.

Protocol

Sistema 1. Crescimento Figura 1. As microalgas sistema de crescimento. (A) rotometer ar, (B) CO 2 rotometer, (C) controlador de pH com solenóide, (D) registrador de dados, (E) em linha de filtros de ar, (F) cabeçalho de distribuição de ar, (G) banco luz…

Representative Results

Produção de biomassa Produção de N. Salina no sistema PBR utilizado neste estudo cresceram a partir de 1 g / L-1 a 8,5 ± 0,19 g / L-1 (N = 12) aos reactores de controlo e de 4,0 ± 0,3 g / L-1 (N = 12) para o multi-metálica contaminada em 7 dias. Os experimentos produziram dados reproduzíveis através de reatores em triplicado e vários lotes. A Figura 2A mostra a densidade média cultura, com muito pequeno erro padrão com ba…

Discussion

Saline microalgas N. salina pode ser cultivada com sucesso no sistema de crescimento projetado com resultados reprodutíveis e rendimentos elevados de biomassa. Airlift mistura permitiu uma cultura bem misturado suspenso com assentamento mínima ou incrustação biológica ao longo dos períodos de crescimento de 7 dias. A variabilidade luz mínima em todo o banco de luz fluorescente também é mostrado para não produzir diferenças notáveis ​​no crescimento.

O estudo mostra h…

Divulgaciones

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

The authors would like to acknowledge funding from the National Science Foundation (award # 1335550), Utah Water Research Laboratory, Professor Joan McLean and Tessa Guy for their help during the metal/metalloids analysis. The authors also thank Laura Birkhold for her support with the data collection and Danna Olbright.

Materials

Chemicals
Sodium chloride Fisher Scientific S271-3
Calcium chloride dihydrate Fisher Scientific C79-500
Potassium chloride Fisher Scientific P217-500
Sodium meta silicate nonahydrate  Fisher Scientific S408-500
Magnesium sulfate heptahydrate  Fisher Scientific M63-500
Potassium nitrate EMD Chemical PX1520-5
Potassium phosphate monobasic  Fisher Scientific P285-500
Ammonium ferric citrate Fisher Scientific I72-500
Boric acid Fisher Scientific A73-500
Sodium molybdate, dihydrate EMD Chemical SX0650-2
Manganese chloride tetrahydrate Fisher Scientific M87-500
Zinc sulfate heptahydrate Fisher Scientific Z68-500
Cupric sulfate pentahydrate Fisher Scientific C489-500
Biotin  Acros Organics 230090010
Thiamine  Acros Organics 148990100
Vitamin B12  Acros Organics 405920010
Copper (II) chloride dihydrate  Sigma-Aldrich 221783-100G Irritant, Dangerous to the Environment
Lead (II) chloride  Sigma-Aldrich 268690-250G Toxic, Dangerous to the Environment
Sodium dichromate dihydrate  Sigma-Aldrich 398063-100G Oxidizing, Highly Toxic, Dangerous to the Environment
Cobalt (II) chloride hexahydrate  Sigma-Aldrich 255599-100G Toxic, Dangerous to the Environment
Nickel (II) chloride hexahydrate  Sigma-Aldrich 223387-500G Toxic, Dangerous to the Environment
Sodium (meta) arsenite  Sigma-Aldrich 71287 Toxic, Dangerous to the Environment
Cadmium chloride  Sigma-Aldrich 202908-10G Highly Toxic, Dangerous to the Environment
Mercury (II) chloride  Sigma-Aldrich 215465-100G Toxic, Dangerous to the Environment
Tin (II) chloride dihydrate Fisher Scientific T142-500 Corrosive. Suitable for Hg analysis. Very hazardous.
Manganese chloride tetrahydrate Fisher Scientific M87-500
Vanadium (V) oxide Acros Organics 206422500 Dangerous to the Environment
Carbon dioxide  Air Liquide I2301S-1 Compressed
Hydrogen peroxide H325-500 Fisher Scientific 30% in water
ICP-MS standard ICP-MS-6020 High Purity Standards
Mercury standard CGHG1-1 Inorganic Ventures 1000±6 µg/mL in 5% nitric acid
Argon Air Liquide Compressed
Helium Air Liquide Compressed, ultra high purity
Hydrogen Air Liquide Compressed, ultra high purity
Nitric acid Fisher Scientific A509-P212 67-70% nitric acid, trace metal grade. Caution: manipulate under fume hood.
Hydrochloric acid Fisher Scientific A508-P212 35% hydrochloric acid, trace metal grade. Caution: manipulate under fume hood.
Equipment
Scientific prevacuum sterilizer Steris 31626A SV-120
Centrifuge Thermo Fisher 46910 RC-6 Plus
Spectrophotometer Shimadzu 1867 UV-1800
pH controller Hanna BL981411 X4
Rotometer, X5 Dwyer RMA-151-SSV T31Y
Rotometer, X5 Dwyer RMA-26-SSV T35Y
Water bath circulator Fisher Scientific 13-873-45A
Compact chiller VWR 13270-120
Freeze dryer Labconco 7752020
Stir plate Fisher Scientific 11-100-49S
pH lab electrode Phidgets Inc 3550
Inductively coupled plasma mass spectrometer Agilent Technologies 7700 Series ICP-MS Attached to autosampler CETAC ASX-520
FIAS 100 Perkin Elmer Instruments B0506520
Atomic absorption spectrometer Perkin Elmer Instruments AAnalyst 800
Cell heater (quartz) Perkin Elmer Instruments B3120397
Microwave Milestone Programmable, maximum power 1200 W
Microwave rotor Milestone Rotor with 24 75 mL Teflon vessels for closed-vessel microwave assisted digestion.
Materials
0.2 micron syringe filter Whatman 6713-0425
0.2 micron syringe filter Whatman 6713-1650
0.45 micron syringe filter Thermo Fisher F2500-3
Polystyrene tubes Evergreen 222-2094-050 17×100 mm w/cap, 16 mL, polysteryne
Octogonal magnetic stir bars Fisher scientific 14-513-60 Magnets encased in PTFE fluoropolymer

Referencias

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Napan, K., Hess, D., McNeil, B., Quinn, J. C. Quantification of Heavy Metals and Other Inorganic Contaminants on the Productivity of Microalgae. J. Vis. Exp. (101), e52936, doi:10.3791/52936 (2015).

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