Summary

Kvantificering af tungmetaller og andre uorganiske forureninger på produktivitet mikroalger

Published: July 10, 2015
doi:

Summary

Integration of microalgal cultivation with industrial flue gas will ultimately introduce heavy metals and other inorganic compounds into the growth media. This study presents a procedure used to determine the end fate and impact of heavy metals and inorganic contaminants on the growth of Nannochloropsis salina grown in photobioreactors.

Abstract

Stigende efterspørgsel efter vedvarende brændstoffer har forskere undersøger mulighederne for alternative råmaterialer, såsom mikroalger. Iboende fordele omfatter høj potentielle udbytte, brug af ikke-agerjord og integration med affaldsstrømme. De næringsstoffer krav til en storstilet mikroalger produktionssystem vil kræve koblingen af ​​dyrkningssystemer med industriaffald ressourcer, såsom kuldioxid fra røggassen og næringsstoffer fra spildevand. Uorganiske forurenende stoffer i dette affald kan potentielt føre til bioakkumulering i mikroalger biomasse negativ indflydelse produktiviteten og begrænse slutanvendelse. Denne undersøgelse fokuserer på den eksperimentelle evaluering af virkningen og skæbne 14 uorganiske forureninger (As, Cd, Co, Cr, Cu, Hg, Mn, Ni, Pb, Sb, Se, Sn, V og Zn) på Nannochloropsis salina vækst . Mikroalger blev dyrket i fotobioreaktorer belyst ved 984 pmol m -2 sek -1 og holdt ved pH 7 i en vækst media forurenet med uorganiske forureninger på niveauer forventet baseret på sammensætningen findes i kommercielle kul røggassystemer. Forurenende stoffer i biomassen og mediet ved slutningen af ​​en 7 dages vækstperiode blev analytisk kvantificeret gennem kold damp atomabsorptionsspektrometri for Hg og gennem induktivt koblet plasma massespektrometri for As, Cd, Co, Cr, Cu, Mn, Ni, Pb, Sb, Se, Sn, V og Zn. Resultater viser N. Salina er en følsom stamme til multi-metal miljø med en statistisk fald i biomasse yieldwith indførelsen af disse forurenende stoffer. De teknikker der præsenteres her, er tilstrækkelige til at kvantificere algevækst og bestemme skæbnen for uorganiske forureninger.

Introduction

Sammenlignet med traditionelle terrestriske afgrøder har vist mikroalger for at opnå højere biomasse og lipid udbytter på grund af iboende højere sol virkningsgrader 1,2. Dyrkning af mikroalger ved høje produktivitet kræver levering af forskellige næringsstoffer, herunder en ekstern kulstofkilde. Det forventes, at store vækst faciliteter vil blive integreret med industrielle affaldsstrømme såsom industrielle røggas for at minimere produktionsomkostningerne og samtidig give udbedring af miljøskader. Industriaffald carbon er typisk i form af gasformig carbondioxid og kan indeholde forurenende stoffer, der har potentiale til at have negativ indflydelse mikroalger produktion. Specifikt vil røggas fra kul har en række forurenende stoffer, herunder men ikke begrænset til forbrændingsprodukter vand og kuldioxid, samt oxider af svovl og nitrogen, fint støv, organiske kontaminanter, såsom dioxiner og furaner, og uorganisk conforureninger såsom tungmetaller. Virkningen af ​​de fleste af disse forurenende stoffer, herunder uorganiske med nogle af dem er kendt som tungmetaller på mikroalger produktivitet er ikke blevet undersøgt. Nogle af disse elementer kan være næringsstoffer i relevante koncentrationer, dog ved højere koncentrationer de kan producere celle dysfunktion og endda død 3.

Integrationen af ​​mikroalger med industriel røggas har potentiale til direkte at indføre uorganiske forureninger i vækstmedier. Kulbaseret røggas har en række uorganiske elementer (f.eks, As, Cd, Co, Cr, Cu, Hg, Mn, Ni, Pb, Sb, Se, Sn, V og Zn) i forskellige koncentrationer hvoraf nogle, i lav koncentration, repræsenterer næringsstoffer for mikroalger vækst. Uorganiske forureninger har en høj affinitet til at binde til mikroalger og yderligere sorberes internt gennem næringsstoffer transportører. Nogle uorganiske forureninger (dvs., Co, Cu, Zn og Mn) er næringsstoffer, der indgår i enzymer involvererd i fotosyntese, respiration og andre funktioner 3,4. Men i overskydende metaller og metalloider kan være giftige. Andre elementer, såsom Pb, Cd, Sn, Sb, Se, som og Hg, er ikke kendt for at støtte celle funktion i enhver koncentration og repræsenterer ikke-næringsstoffer metaller, der negativt kan påvirke væksten kultur 3,5,6. Tilstedeværelsen af ​​nogen af ​​disse forurenende stoffer har potentialet til at producere negative effekter på mikroalger celle funktion. Endvidere samspillet af flere metaller med mikroalger komplicerer vækstdynamikken og har potentiale til at påvirke væksten.

Storstilede økonomi har været direkte forbundet med produktivitet dyrkning systemet 7-19. Endvidere medium recirkulation i mikroalger vækstsystem for enten åbne raceway damme (ORP) eller fotobioreaktorer (PBR) er kritisk, da det repræsenterer 99,9 og 99,4% af massen, henholdsvis 20. Tilstedeværelsen af ​​uorganiske forureninger i medierne kunne i sidste ende begrænse microalgae produktivitet og genanvendelse af medier på grund af forurenende opbygge. Denne undersøgelse eksperimentelt bestemte virkningen af ​​14 uorganiske forureninger (As, Cd, Co, Cr, Cu, Hg, Mn, Ni, Pb, Sb, Se, Sn, V og Zn), ved koncentrationer, der forventes af integrationen af ​​mikroalger dyrkningssystemer med kul afledt røggas, om produktivitet N. salina dyrkes i airlift PBRs. Kontaminanterne anvendt i denne undersøgelse har vist sig at ikke kun være til stede i kulbaseret røggas men kommunalt affald baseret røggas, biosolids-baserede røggas, kommunalt spildevand, produceret vand, nedsat grundvand og havvand 21-23. De anvendte koncentrationer i denne undersøgelse er baseret på, hvad der kunne forventes, hvis mikroalger vækst systemer blev integreret med et kulbaseret CO2 kilde med en optagelse effektivitet demonstreret i kommercielle PBR systemer 20. Detaljerede beregninger understøtter koncentrationerne af tungmetaller og uorganiske forureninger er præsenteret i Napanet al. 24 Analytiske teknikker blev anvendt til at forstå fordelingen af størstedelen af metallerne i biomassen, medier og miljø. De metoder, der præsenteres aktiveret vurderingen af ​​produktiviteten potentiale mikroalger under uorganisk forurenende stress og kvantificering af deres ende skæbne.

Protocol

1. Vækst-system Figur 1. mikroalger vækst system. (A) luft rotometer, (B) CO2 rotometer, (C) pH controller med magnetventil, (D) datalogger, (E) in-line luftfiltre, (F) luftfordeling header, (G) fluorescerende lys bank, (H) pH-målere, <st…

Representative Results

Biomasse udbytter Produktion af N. salina i PBR system, der anvendes i denne undersøgelse voksede fra 1 g / l -1 til 8,5 ± 0,19 g / l -1 (N = 12) til kontrol reaktorer og 4,0 ± 0,3 g / l -1 (N = 12) for den multi-metal forurenet i 7 dage. Forsøgene produceret gentagelige data på tværs tredobbelte reaktorer og flere partier. Figur 2A viser den gennemsnitlige kultur tæthed med meget lille standardafvigelse baseret på stikprøve…

Discussion

Saline mikroalger N. salina kan dyrkes med succes i designet vækst-system med reproducerbare resultater og høje biomasse udbytter. Airlift blanding tilladt for en velblandet suspenderet kultur med minimal bundfældning eller biologisk forurening i perioderne 7 dage vækst. Den minimale lys variation på tværs af fluorescerende lys bank er også vist at ikke producere mærkbare forskelle i vækst.

Undersøgelsen viser heavy metal forurenede medier ved koncentrationer er repræsent…

Divulgaciones

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

The authors would like to acknowledge funding from the National Science Foundation (award # 1335550), Utah Water Research Laboratory, Professor Joan McLean and Tessa Guy for their help during the metal/metalloids analysis. The authors also thank Laura Birkhold for her support with the data collection and Danna Olbright.

Materials

Chemicals
Sodium chloride Fisher Scientific S271-3
Calcium chloride dihydrate Fisher Scientific C79-500
Potassium chloride Fisher Scientific P217-500
Sodium meta silicate nonahydrate  Fisher Scientific S408-500
Magnesium sulfate heptahydrate  Fisher Scientific M63-500
Potassium nitrate EMD Chemical PX1520-5
Potassium phosphate monobasic  Fisher Scientific P285-500
Ammonium ferric citrate Fisher Scientific I72-500
Boric acid Fisher Scientific A73-500
Sodium molybdate, dihydrate EMD Chemical SX0650-2
Manganese chloride tetrahydrate Fisher Scientific M87-500
Zinc sulfate heptahydrate Fisher Scientific Z68-500
Cupric sulfate pentahydrate Fisher Scientific C489-500
Biotin  Acros Organics 230090010
Thiamine  Acros Organics 148990100
Vitamin B12  Acros Organics 405920010
Copper (II) chloride dihydrate  Sigma-Aldrich 221783-100G Irritant, Dangerous to the Environment
Lead (II) chloride  Sigma-Aldrich 268690-250G Toxic, Dangerous to the Environment
Sodium dichromate dihydrate  Sigma-Aldrich 398063-100G Oxidizing, Highly Toxic, Dangerous to the Environment
Cobalt (II) chloride hexahydrate  Sigma-Aldrich 255599-100G Toxic, Dangerous to the Environment
Nickel (II) chloride hexahydrate  Sigma-Aldrich 223387-500G Toxic, Dangerous to the Environment
Sodium (meta) arsenite  Sigma-Aldrich 71287 Toxic, Dangerous to the Environment
Cadmium chloride  Sigma-Aldrich 202908-10G Highly Toxic, Dangerous to the Environment
Mercury (II) chloride  Sigma-Aldrich 215465-100G Toxic, Dangerous to the Environment
Tin (II) chloride dihydrate Fisher Scientific T142-500 Corrosive. Suitable for Hg analysis. Very hazardous.
Manganese chloride tetrahydrate Fisher Scientific M87-500
Vanadium (V) oxide Acros Organics 206422500 Dangerous to the Environment
Carbon dioxide  Air Liquide I2301S-1 Compressed
Hydrogen peroxide H325-500 Fisher Scientific 30% in water
ICP-MS standard ICP-MS-6020 High Purity Standards
Mercury standard CGHG1-1 Inorganic Ventures 1000±6 µg/mL in 5% nitric acid
Argon Air Liquide Compressed
Helium Air Liquide Compressed, ultra high purity
Hydrogen Air Liquide Compressed, ultra high purity
Nitric acid Fisher Scientific A509-P212 67-70% nitric acid, trace metal grade. Caution: manipulate under fume hood.
Hydrochloric acid Fisher Scientific A508-P212 35% hydrochloric acid, trace metal grade. Caution: manipulate under fume hood.
Equipment
Scientific prevacuum sterilizer Steris 31626A SV-120
Centrifuge Thermo Fisher 46910 RC-6 Plus
Spectrophotometer Shimadzu 1867 UV-1800
pH controller Hanna BL981411 X4
Rotometer, X5 Dwyer RMA-151-SSV T31Y
Rotometer, X5 Dwyer RMA-26-SSV T35Y
Water bath circulator Fisher Scientific 13-873-45A
Compact chiller VWR 13270-120
Freeze dryer Labconco 7752020
Stir plate Fisher Scientific 11-100-49S
pH lab electrode Phidgets Inc 3550
Inductively coupled plasma mass spectrometer Agilent Technologies 7700 Series ICP-MS Attached to autosampler CETAC ASX-520
FIAS 100 Perkin Elmer Instruments B0506520
Atomic absorption spectrometer Perkin Elmer Instruments AAnalyst 800
Cell heater (quartz) Perkin Elmer Instruments B3120397
Microwave Milestone Programmable, maximum power 1200 W
Microwave rotor Milestone Rotor with 24 75 mL Teflon vessels for closed-vessel microwave assisted digestion.
Materials
0.2 micron syringe filter Whatman 6713-0425
0.2 micron syringe filter Whatman 6713-1650
0.45 micron syringe filter Thermo Fisher F2500-3
Polystyrene tubes Evergreen 222-2094-050 17×100 mm w/cap, 16 mL, polysteryne
Octogonal magnetic stir bars Fisher scientific 14-513-60 Magnets encased in PTFE fluoropolymer

Referencias

  1. Dismukes, G. C., Carrieri, D., Bennette, N., Ananyev, G. M., Posewitz, M. C. Aquatic phototrophs: efficient alternatives to land-based crops for biofuels. Curr Opin Biotechnol. 19 (3), 235-240 (2008).
  2. Moody, J. W., McGinty, C. M., Quinn, J. C. Global evaluation of biofuel potential from microalgae. Proceedings of the National Academy of Sciences. 111 (23), 8691-8696 (2014).
  3. Pinto, E., et al. Heavy metal-induced oxidative stress in algae. J Phycol. 39 (6), 1008-1018 (2003).
  4. Gupta, A., Lutsenko, S. Evolution of copper transporting ATPases in eukaryotic organisms. Curr Genomics. 13 (2), 124-133 (2012).
  5. Perales-Vela, H. V., Peña-Castro, J. M., Cañizares-Villanueva, R. O. Heavy metal detoxification in eukaryotic microalgae. Chemosphere. 64 (1), 1-10 (2006).
  6. Sandau, E., Sandau, P., Pulz, O. Heavy metal sorption by microalgae. Acta Biotechnol. 16 (4), 227-235 (1996).
  7. Amer, L., Adhikari, B., Pellegrino, J. Technoeconomic analysis of five microalgae-to-biofuels processes of varying complexity. Bioresour Technol. 102 (20), 9350-9359 (2011).
  8. Benemann, J. R., Goebel, R. P., Weissman, J. C., Augenstein, D. C. Microalgae as a source of liquid fuels. Final Technical Report, US Department of Energy, Office of Research. , (1982).
  9. Benemann, J. R., Oswald, W. J. Report No. DOE/PC/93204–T5 Other: ON: DE97052880; TRN: TRN. Systems and economic analysis of microalgae ponds for conversion of CO2 to biomass. , (1996).
  10. Chisti, Y. Biodiesel from microalgae. Biotechnol Adv. 25 (3), 294-306 (2007).
  11. Davis, R., Aden, A., Pienkos, P. T. Techno-economic analysis of autotrophic microalgae for fuel production. Applied Energy. 88 (10), 3524-3531 (2011).
  12. Jones, S., et al. Process design and economics for the conversion of algal biomass to hydrocarbons: whole algae hydrothermal liquefaction and upgrading. U.S. Department of Energy Bioenergy Technologies Office. , (2014).
  13. Lundquist, T. J., Woertz, I. C., Quinn, N. W. T., Benemann, J. R. A realistic technology and engineering assessment of algae biofuel production. Energy Biosciences Institute. , (2010).
  14. Nagarajan, S., Chou, S. K., Cao, S., Wu, C., Zhou, Z. An updated comprehensive techno-economic analysis of algae biodiesel. Bioresour Technol. 145, 150-156 (2011).
  15. Pienkos, P. T., Darzins, A. The promise and challenges of microalgal-derived biofuels. Biofuels Bioproducts & Biorefining-Biofpr. 3, 431-440 (2009).
  16. Richardson, J. W., Johnson, M. D., Outlaw, J. L. Economic comparison of open pond raceways to photo bio-reactors for profitable production of algae for transportation fuels in the Southwest. Algal Research. 1 (1), 93-100 (2012).
  17. Rogers, J. N., et al. A critical analysis of paddlewheel-driven raceway ponds for algal biofuel production at commercial scales. Algal Research. 4, 76-88 (1016).
  18. Sun, A., et al. Comparative cost analysis of algal oil production for biofuels. Energy. 36 (8), 5169-5179 (2011).
  19. Thilakaratne, R., Wright, M. M., Brown, R. C. A techno-economic analysis of microalgae remnant catalytic pyrolysis and upgrading to fuels. Fuel. 128, 104-112 (2014).
  20. Quinn, J. C., et al. Nannochloropsis production metrics in a scalable outdoor photobioreactor for commercial applications. Bioresour Technol. 117, 164-171 (2012).
  21. Borkenstein, C., Knoblechner, J., Frühwirth, H., Schagerl, M. Cultivation of Chlorella emersonii with flue gas derived from a cement plant. J Appl Phycol. 23 (1), 131-135 (2010).
  22. Douskova, I., et al. Simultaneous flue gas bioremediation and reduction of microalgal biomass production costs. Appl Microbiol Biotechnol. 82 (1), 179-185 (2009).
  23. Israel, A., Gavrieli, J., Glazer, A., Friedlander, M. Utilization of flue gas from a power plant for tank cultivation of the red seaweed Gracilaria cornea. Aquaculture. 249 (1-4), 311-316 (2012).
  24. Napan, K., Teng, L., Quinn, J. C., Wood, B. . Impact of Heavy Metals from Flue Gas Integration with Microalgae Production. , (2015).
  25. Eaton, A. D., Clesceri, L. S., Rice, E. W., Greenberg, A. E. 3. 1. 2. 5. B. Inductively coupled plasma/mass spectrometry (ICP/MS) method. Standard methods for the examination of water and wastewater. , (2005).
  26. Smith, M., Compton, J. S. . Matrix effects in the ICP-MS analysis of selenium in saline water samples. , (2004).
  27. Mehta, S. K., Gaur, J. P. Use of algae for removing heavy metal ions from wastewater: progress and prospects. Crit Rev Biotechnol. 25 (3), 113-152 (2005).
  28. Eaton, A. D., Clesceri, L. S., Rice, E. W., Greenberg, A. E. 3. 1. 2. 0. B. Inductively coupled plasma (ICP) method. Standard methods for the examination of water and wastewater. , (2005).
check_url/es/52936?article_type=t

Play Video

Citar este artículo
Napan, K., Hess, D., McNeil, B., Quinn, J. C. Quantification of Heavy Metals and Other Inorganic Contaminants on the Productivity of Microalgae. J. Vis. Exp. (101), e52936, doi:10.3791/52936 (2015).

View Video