The present article describes the methodological considerations for several non-invasive assessments of vascular function and morphology that are commonly used in medical research to assess different stages of atherosclerosis.
The endothelium is the innermost lining of the vasculature and is involved in the maintenance of vascular homeostasis. Damage to the endothelium may predispose the vessel to atherosclerosis and increase the risk for cardiovascular disease. Assessments of peripheral endothelial function are good indicators of early abnormalities in the vascular wall and correlate well with assessments of coronary endothelial function. The present manuscript details the important methodological steps necessary for the assessment of microvascular endothelial function using laser Doppler imaging with iontophoresis, large vessel endothelial function using flow-mediated dilatation, and carotid atherosclerosis using carotid artery ultrasound. A discussion on the methodological considerations for each of the techniques is also presented, and recommendations are made for future research.
endotel damar iç astar ve vazoaktif birçok proseste düzenlenmesi yoluyla damar homeostazının muhafaza içinde yer almaktadır. Bu süreçlere bozulması ateroskleroz gemi yatkınlık ve kardiyovasküler hastalık (CVD) 1 riskini artırabilir. Periferik endotel fonksiyonu damar duvarında 2 erken anormalliklerin iyi bir göstergedir. Ayrıca, periferik endotel fonksiyonu ölçümleri koroner endotel fonksiyonunu 3-5 yansıtmak gösterilmiştir, ve gibi kardiyovasküler hastalık 6-9 iyi belirleyicileri olarak kabul edilmektedir. Bu ateroskleroz artık geniş bir sistemik bozukluk 10 olarak takdir olduğu göz önüne alındığında belki de şaşırtıcı değildir. Periferik endotel fonksiyonu değerlendirmeler genellikle endotel göstergesi bekletici yanıt bir zayıflama ile, belirli bir uyarana geminin vazodilatör yanıtı ölçmekişlev bozukluğu, 11 farklı vasküler yatak ölçülebilir. Kap içinde gelişmiş yapısal değişiklikleri değerlendirmeler intima-media kalınlığı ultrason muayenesi ile karakterize edilebilir.
Mikrosirkülasyondaki, lazer Doppler flowmetre (LDF) ve vazodilatör agonistlerinin iyontoforez Lazer Doppler görüntüleme (LDI) mikrovasküler perfüzyon 12 faydalı bilgiler sağlayabilir. Her iki teknikler, kırmızı kan hücreleri hareket dağınık ışık tarafından oluşturulan Doppler kayması ölçmek. Perfüzyon ortalama eritrosit hız ve konsantrasyonunu yansıtan kan akımı ile, kan akışı yerine kan akışı (ml / dak) olarak temsil edilir. Kan akışı ölçümü, doğrusal gerçek kan akışı 13 ile ilişkilidir. LDF aksine, LDI böylece deri kan akımının heterojenite için muhasebe ve tekniğin tekrarlanabilirliği artan geniş bir alana tarayabilir, çünkü LDI değerlendirilmesi, LDF karşısında önemli avantajlar sunuyor12.
LDI sırasında kan akışını artırmak için, uyarıcı, zayıf bir elektrik akımı 14 deri içine, sırasıyla endotele bağımlı ve endotel bağımsız fonksiyonunu değerlendirmek vazodilatör agonistleri olarak asetilkolin (Ach) ve sodyum nitroprusid (SNP) ait iyontoforez yolu ile sağlanır. Bir kez deri yoluyla ACh damar genişletici nitrik oksit (NO) açığa hücre muskarinik reseptörleri endotel bağlanır. SNP kullanımı doğrudan maksimum geminin vazodilatasyona ve düz kas bütünlüğü 15 incelenmesi için izin düz kas hücre reseptörlerini harekete geçirir. ACh gibi Siklooksijenaz aracılı yollar 12 gibi olmayan YOK yollar uyarabilir olarak ACh-aracılı dilatasyon, HAYIR tüm içerir konusunda bazı belirsizlikler vardır. Yine de, daha önce ACh ve SNP yanıtları CVD 16 artmış riski olan hasta popülasyonlarında engelli olduğunu bildirdi ve bu egzersiz müdahaleler YOK b artırmak için bilinenioactivity da LDI 17 ile ACh aracılı kan akışı artırmak. Cilt mikrodamarlara maddeler taşınması için araç genellikle sodyum klorür veya deiyonize su 18,19 sayılabilir. Kan basıncı çalışma süresini değişebilir nerede 12 (yani, egzersiz ya da anti-hipertansif tedavi sırasında) arter basıncı bölü akı bir ürünü, çalışmalarda kullanılan – mikrovasküler endotel fonksiyonu kutanöz vasküler iletkenliği ile farklı yaklaşımlar kullanılarak belirlenebilir. Başka yaygın olarak kullanılan ölçüm, kan akı için eğri altında kalan alan hesaplamak veya başlangıca akı yüzde artışı ifade etmektir. Bu verileri sunmak için kurulan kurallar olduğunu not etmek önemlidir, ancak müfettişlerin iyi tekrarlanabilirlik gösteren bir yaklaşım kullanmak gerekir.
Büyük damarlarda, akım aracılı dilatasyon (FMD) ve gliserol-trinitratın aracılı dilatasyon (GTN) tayini için yapılırs endotel bağımlı ve endotel bağımsız fonksiyon sırasıyla 20. Şap tipik olarak bir manşon 5 dakika boyunca kan akışını tıkamak için kullanılan kol arter içinde gerçekleştirilir; manşet serbest geminin kesme-stres aracılı dilatasyon sonuçlanan brakiyal arterden kan akımı (reaktif hiperemi) ani bir artışa neden olur. Bazal ve post-kaf serbest çapı damar çapı sonraki değerlendirmeler geminin ultrason görüntüleme ile ölçülebilir olan manuel veya otomatik kenar 20 algılama yazılımını 21,22 kullanılarak yapılan. GTN kullanımı vazodilatasyona anormallikler endotel hücreleri 23 bir düz kas hücre bütünlüğü kaybı veya NO engelli salınımına bağlı olup olmadığını belirlemenize yardımcı olur. FMD ve GTN temel çapına sonrası uyaran damar çapı göreli artış yüzdesi olarak ifade edilir.
Şap doğru değerlendirme bir dizi gerektirirÇalışma protokolü 24,25 önemli hususlar. manşet tıkanıklığı süresi dikkatle zamanlı olmalıdır; Olmayan NO uzun manşet tıkanıklığı sonuçları dilatasyon 26 aracılı ise manşet tıkanıklığı 5 dk NO aracılı dilatasyon için yeterlidir. Prob üst kol ve proksimali- manşet yerleştirme sadece kısmen YOK 27 uyarır oysa Benzer şekilde, ultrason probu gelen bileği ve distale etrafında kapatıcı manşet yerleştirme ağırlıklı, NO aracılı dilatasyon çağırır. % 40 28 – 25 ile FMD hafife olabilir manşet deflasyon sonraki ilk 60 saniye içinde tepe çapı ölçümü gibi zaman uzunca bir süre boyunca manşet deflasyon aşağıdaki pik dilatasyon, ölçmek için de önemlidir. Gerçekten de, 180 saniye bir süre en tepe değerleri, ilk 120 saniyede 28 içinde meydana gelen gerçek tepe çapı yakalama yeterli olması muhtemeldir.
FMD için uyarıcı içerenNO 29 serbest bırakmak için özel endotel reseptörleri aktive kesme stresi üretimini s. Ancak, kesme stres de HAYIR 26 yolaklarıyla gelen uyarılmış kayma gerilmesi uyaran vazodilatasyon yansıttığını esastır hale (vazokonstriksiyonu neden olabilir bazıları) birkaç diğer vazoaktif faktörler 30 aktive edebilir. Ayrıca kayma gerilmesi yeterli bir önlem olarak görev kayma hızı (hız / çap) hesaplanması ile, şap sırasında kayma gerilmesi uyaran hesaba önemli, ama ille de zirve akışını yansıtan 31 değil. Son fizyolojik öneriler ultrason sistemleri dubleks modunda 25 nabız dalga hızı ve aktif B-mod görüntüleme ölçümünü izin verdiğinizde kayma gerilmesi profili daima karakterize edilmesi gerektiğini göstermektedir.
B-mod ultrason kullanılarak karotis arterlerin değerlendirilmesi karotis intima-media kalınlığı (cIMT) hakkında bilgi vermek, ve ilk describ oldu olabilirpignoli ve arkadaşları 32 tarafından 1986 yılında ed. CIMT Değerlendirilmesi kabın intimasına düz kas hücrelerinin çoğalmasını gösterir ve erken ateroskleroz 33 klinik olaylar için yararlı bir belirleyicisidir. Karotis ultrason genellikle 34 (manyetik rezonans görüntüleme ya da radyografik değerlendirmeler gibi) benzer teknikler daha arter yapısı iyi tahmin edebilirsiniz. Buna ek olarak, yaşlanma, hipertansiyon ve dislipidemi 35 de dahil olmak üzere, klasik kardiyovasküler risk faktörlerinin bir dizi cIMT ilişkilendirir. Karotid arter duvarları değişiklikler genellikle kap 36 içinde iltihabı teşvik eden hiçbir biyo bir azalma ile başlatılır. her site benzer kardiyovasküler olayları 37 tahmin edebileceği gibi karotid arter, internal karotid arter ve karotid çatallanma noktaları, CIMT belirlemek için kullanılabilir.
Bu yazıda, microvascula değerlendirilmesi üzerine detaylı metodoloji sağlamakr endotel fonksiyonu (iyontoforez ile LDI), büyük damar endotel fonksiyonu (FMD ve GTN) ve vasküler morfolojisi (cIMT). Ateroskleroz endotel disfonksiyonu ile başlar ve geniş arterlerde fokal aterosklerotik lezyonların ile biten bir çok-aşamalı süreçtir. Yukarıdaki değerlendirmeler seçilmesindeki mantık onlar ateroskleroz farklı aşamalarını yansıtan ve damar 38 heterojen doğası hesaba yardımcı olmasıdır. Ayrıca, daha önce KVH riski yüksek hasta popülasyonunda, mikrovasküler endotel fonksiyonu büyük damar endotel fonksiyonu 39 bağımsız olduğunu göstermiştir, ve fonksiyonel değerlendirmeler damar 40 yapısal değerlendirmeler bağımsız idi. Bu nedenle, damar küresel değerlendirmeler ateroskleroz farklı aşamalarında deşifre yardımcı olabilir.
Bu makale, periferik damar yapılabilir vasküler fonksiyon ve morfolojisinin çok sayıda farklı değerlendirme yöntemini göstermektedir. Her değerlendirme ateroskleroz farklı aşamalar hakkında bilgi sağlar ve farklı vasküler topraklarının damar profilini karakterize yardımcı olur.
Biz daha önce mikrovasküler endotel fonksiyonu CVD 39 artmış riski romatoid artrit hastalarının nüfusu büyük damar endotel fonksiyonu bağımsız olduğunu bildirdi. Ayrıca, vasküler fonksiyon ve morfolojisi değerlendirmeler hastaların aynı grupta ve KVH 40,41 olan hastalarda da birbirinden bağımsız olduğunu. Bu bulgular, işlevi, farklı vasküler alanların 38, endotel hücrelerinin yapısı heterojen olarak morfolojik fonksiyonel değişiklikler ilerlemesi için olası bir zaman gecikmesi ile açıklanabilirkap içinde anormallikler. Hashimoto ve arkadaşları 42 tarafından yapılan bir çalışma ateroskleroz ile birkaç katılımcı FMD değerleri ancak normal cIMT değerleri azalmış olduğunu ortaya çıkardı. Bu bulgular çeşitli yöntemler kullanarak subklinik aterosklerozun bu sınav CVD küresel etkilerini deşifre etmek önemlidir düşündürmektedir.
Sağlıkta ve hastalıkta mikrovasküler önemi tıbbi literatürde giderek artan ilgi kazanıyor. mikrodamarlar zararlı uyaranlara 43 hasar için onlara önemli hedefleri yapma, büyük damarlar çok daha büyük yüzey alanı oluşturur. Bu mikrodamarlar lezyon oluşumu 43 giden büyük damarların endotel sızmak inflamatuar aracıların temel kaynağı olabileceği öne sürülmüştür. Tip II diyabetlilerde, mikrovasküler hastalık genellikle romatoid arthri gibi KVH riski diğer toplumlarda büyük damar hastalığı 44 öncesinde vetis, CVD riskini azaltmak müdahaleler büyük damar endotel fonksiyonunu 45,46 mikrovasküler geliştirmek, ama değil. Topluca, bu bulgular mikrovasküler fonksiyonunun incelenmesi ateroskleroz başlatmak karmaşık mekanizmalar anlamada yardımcı olabileceğini düşündürmektedir.
Bu çalışmada, mikrovasküler endotel fonksiyonunun değerlendirilmesi, vazoaktif ajanların iyontoforez ile LDI kullanılarak gerçekleştirilmiştir. Birkaç diğer değerlendirmeler kapilaroskopi ve venöz oklüzyon pletismografisi dahil mikrovasküler fonksiyonunu değerlendirmek için kullanılabilir. İkinci zaman alıcı ve bağlı içi brakiyal vazoaktif ajanların 1 yönetimine invaziv bazı protokollerde olduğu Bununla birlikte, eski değerlendirme, yalnızca mikrovasküler morfolojisi hakkında bilgi sağlar. Bunun aksine, LDI olmayan invas tatbik edilmektedir vazoaktif ajanların yanıt olarak deri kan damarlarının mikrovasküler perfüzyon ölçmek için basit, zaman etkili bir yaklaşım sunarively. cilt kan akımının ölçülmesi nedeniyle kurulu görüntü CVD 12 ile erişilebilirlik ve güçlü bir korelasyon kolaylığı için literatürde yaygın kabul görmüştür. Ayrıca, bu tür lazer Doppler flowmetre gibi diğer Doppler teknikleri üzerinde LDI avantajı, aynı anda belirli bir bölgede birden fazla puan tarayabilirsiniz olduğunu ve etkileyen her ikisi de hücresel hareket eserler ve cilt kan akımının mekansal farklılıklar, hesaba nedenle olabilir geminin 47,48 perfüzyon.
Iyontoforez bariz avantajlara rağmen, bu iyontoforez o akım kaynaklı vazodilatasyon (CIV) özellikle katotta vazoaktif ajanların etkilerini yanıltabilecek dikkat etmek önemlidir. ilaç verilmesi için araç seçimi CIV 18 sınırlandırılmasında etkili (bu protokolde kullanılan gibi),% 0.5 sodyum klorid ile, bu etkiyi azaltmak için yardımcı olabilir. Ayrıca, büyük çaplı odaları ve düşük elektrik cur kullanımı(Mevcut protokolde kullanılan) kiralar tüm CIV 18 azaltmaya yardımcı olur. Bir kontrol sitesinin kullanımı da 12 tavsiye edilmiştir. Biyolojik ve davranışsal faktörler de tekniğin güvenilirliği ve tekrarlanabilirliği etkileyebilir. Örneğin, sirkadiyen varyasyon ve sigara mikrovasküler endotel işlev 49,50 etkilemeye gösterilmiştir. Sıkı kayıt koşulları doğru sonuçlar elde etmek için uyulması gereken ve protokolleri 12 tasarlarken kurulan kurallar takip edilmelidir.
FMD ve GTN-aracılı dilatasyon ölçümü büyük kan damarlarında endotel disfonksiyonu hakkında bilgi sağlar, ve non-invaziv damar araştırmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır. FMD tekniği YOK biyoyararlanım üzerine vekil bilgi sağlar ve farklı klinik popülasyonlarda 7-9 kardiyak olayların yararlı bir prognostik göstergedir. Bu çalışmada, protokol faktörlerinin çoğu için hesap sundu kiNO dolayımlı damar genişlemesi 25 yeterli uyarılması için gereklidir. Örneğin, tıkayıcı manşet ultrason probu ile uzak yerleştirildi ve bileğin 27 civarında, iskemi süresi 5 dk 26 ve yeterli zaman reaktif hiperemi 28 aşağıdaki 'gerçek' pik çapı kaydetmek için izin verildi. Otomatik kenar algılama yazılımı damar çapı ve nabız dalga hızı sinyali aynı anda kayıt izin vermedi ne yazık ki, protokol kayma gerilmesi profilinin karakterizasyonu içermiyordu. kayma gerilmesi hesaplanması FMD 26 doğru ölçümü ayrılmaz bir parçasıdır ve mümkün, damar araştırma grupları bu tür ölçümler yapılmasına izin veren yazılım kullanımı nerede, tavsiye.
FMD ve GTN-aracılı dilatasyon değerlendirmeler vasküler çapı küçük değişiklikler gibi, aynı zamanda çevresel ve biyolojik değişimler 24 yatkındır canBüyük FMD / GTN tepkiler. 5 mm bir çapa sahip bir arter arter çapı 0.5 mm değişikliği – Örneğin, sağlıklı kişiden için tipik Şap değerleri 0.25 tekabül 5-10% 51 arasında değişir. Arteriyel çapı böyle küçük değişiklikler göz önüne alındığında, çok dikkat ölçümü etkileyebilecek teknik ve biyolojik faktörlere dikkat edilmelidir. Nitekim, FMD gibi 55 sigara sempatik aktivasyon 52, uyku yoksunluğu 53, kafein tüketimi 54, gibi biyolojik ve davranışsal faktörlerin çeşitli etkilenebilir, antioksidan tedavisi 56 ve günün 57 saati. Bu duruma göre, bu oluşturulan kılavuzlar 24,25 bilgileri kullanılarak bu faktörlerin kontrol edilmesi önemlidir.
Gelişmiş ancak subklinik aterosklerozun Değerlendirme CIMT kullanılarak yapıldı. tekniği, çeşitli klinik popülasyonlarda kullanılan ve arteriyel st büyük ayrıntı sağlar olmuşturörneğin manyetik rezonans görüntüleme 34 gibi daha karmaşık teknikler ile karşılaştırıldığında kezlerinin. Diğer vasküler teknikler gibi, cIMT ölçüm ölçümünü etkileyen teknik faktörlerin dikkatli bir değerlendirme gerektirir. Genellikle, cIMT karotis arter uzak duvarında plak serbest bölgelerde yapılmalıdır. FMD, cIMT ölçümü benzer yüksek çözünürlüklü ultrasonografi ile ve çok yüksek kullanıcı bağlıdır gerçekleştirilir. 84% 59 – FMD için 1 iken,% 18.3 58 – 2.4 varyasyon (CofV) aralık katsayısı bildirdi. Bununla birlikte, her iki teknik de kontrollü dış faktörlerle yetkili ultrasonographers tarafından gerçekleştirilen zaman bile, yüksek CofV 58,60,61 devam etmektedir. Bunun bir nedeni, damar sınırların analizi manuel yöntemler 60,61 ile gerçekleştirilmektedir olduğunu olabilir. Böyle bir analiz gibi ultraso gelen sahte sınırları, gürültü gibi görüntüleme eserler olarak güvenilirliğini azaltabilirund sinyal, ve gemilerin bozulma görüntüsünün 22 yorumlanmasını etkileyebilir.
Sürekli otomatik kenar algılama yazılımı son gelişmeler büyük ölçüde damar duvar sınırları 21,22 tespiti düzeldi. AMS CIMT tespit etmek için kullanılan iken bu çalışmada, VIA yazılım, brakiyal arter çapını ölçmek için kullanılmıştır. Bu yazılımın kullanımı büyük ölçüde operatör bağımlılığını azaltır, henüz AMS durumunda, operatör kontrolü bir miktar görüntü kalitesi 62 düşük olabilir durumlarda hala mevcuttur. Kenar algılama yazılımını otomatik kullanmak Laboratuvarlar genellikle böylece sonuçların doğruluğunu sağlamak amacıyla damar sınırların otomatik ölçümü dahil tüm vasküler araştırma laboratuvarlarında amacı olmalıdır, düşük CofV 58,63,64 sahip olma eğilimindedir. Aynı zamanda çalışma sonuçlarını yayınlarken belirli protokoller için uyarlık çalışmalarının sonuçlarını rapor etmek iyi bir uygulamadır.
<p cvasküler fonksiyon değerlendirmeleri rutin klinik araştırmalarda kullanılan rağmen lass = "jove_content">, teknik bir sınırlama iyontoforez ve FMD ile LDI için normatif değerleri yok olmasıdır. Sağlıklı yaş ve cinsiyet uyumlu kontrol grupları deneysel grubu ile bulguları karşılaştırmak için incelendiğinde bu nedenle önemlidir. Bu teknikler CVD 6-9 kanıtı olan nüfusun çeşitli kötü prognoz ile ilişkilendirmek olsa, böyle miyokard enfarktüsü ve inme gibi kötü endotel fonksiyonu ve olumsuz kardiyovasküler sonuçları arasındaki ilişkiyi inceleyen çalışmaların bir eksiklik hala var. Daha fazla prospektif çalışmalar bu endişeleri gidermek için gereklidir. Başka bir sınırlama değerlendirmelerini gerçekleştirmek ve analiz yürütmek için insan operatörlerin kullanımı. Bu önyargı potansiyel kaynağı tanıttı; Bununla birlikte, bu sonuç operatör kör ya da okuyucu operatöründen farklı sağlayarak sınırlandırılabilir. OTüm veriler sürekli olarak analiz edilir, böylece okuyucu, veri analizi için bir standartlaştırılmış protokol izlenmiş sağlamak için de önemlidir.Özetle, mevcut elyazması başarıyla mikrodamarlarda ve büyük damar endotel fonksiyonu değerlendirmelerini yanı sıra periferik dolaşım damar morfolojisi gerçekleştirmek için gerekli metodolojik adımlar hakkında ayrıntılı bilgi sağlar. Birlikte kullanıldığında, değerlendirmeler ateroskleroz farklı aşamalarında küresel bilgi sağlar. Bu tekniklerin potansiyel tanı rolünü inceleyen daha fazla prospektif çalışmalara gereksinim duyulmaktadır.
The authors have nothing to disclose.
The authors would like to thank Dr George Balanos for his assistance in the flow-mediated dilatation technique.
Name of Reagent/ Equipment | Company | Catalog Number | Comments/Description |
Laser Doppler Imager | Moor Instruments, Devon, UK | moorLDI2 | |
Iontophoresis Controller | Moor Instruments, Devon, UK | MIC2 | |
Miochol-E 20mg | Novartis UK | Prescribed by physician | Acetylcholine for endothelium-dependent function |
Nitroprussiat Fides 50mg | Rottapharm Spain | Prescribed by physician | Sodium nitroprusside for endothelium-independent function |
Doppler Ultrasound | Siemens PLC, Camberley UK | Accuson Antares | |
Glyceryl Trinitrate 500 mcg | Alpharma, Barnstaple, UK | Prescribed by physician |