Kornea mikrocep Testi: Fare Eye Angiogenezis Bir Model

Anjiyogenez süreci, yeni kan damarlarının oluşumu olan önceden varolan de kurulabilir, oldukça karmaşıktır ve damar filizlenme ve morfojenezinin farklı aşamaları kontrol eden endojen faktörler ile düzenlenir. Anjiyogenesis nedeniyle yanlısı ve anti-anjiyogenik faktörler arasındaki dengenin bir vardiya, normalde hareketsiz bir durumda damarsal koruyan bir denge için tetiklenir. Yetişkinlerde Anjiyogenez, kadın yumurtalık döngüsü sırasında veya yara iyileşmesi ve doku rejenerasyonu gibi tamir yöntemleriyle bazı fizyolojik koşullar altında meydana gelir. Ancak, aynı zamanda maligniteler, otoimmün hastalık ve enflamatuar hastalıklar da dahil olmak üzere birkaç patolojiden bir özelliğidir. Bu fizyolojik ve patolojik durumlarda angiogenesisin katılımı araştırma ve terapisi için çekici bir hedef yapan önemli bir konudur.

Nedeniyle anjiyogenez karmaşıklığı ve çeşitli ce tutulumunamodelleri sınırlı kalması ve eşsiz bir mikro-ortam, in vivo özetlemek olamaz in vitro endotel hücreleri, perisitler, destek hücreler ve stromal dolaşımdaki hücreleri de dahil olmak üzere bu süreçte ve LLS etkenler. Angiogenesis in vitro tahlilleri ana ölçüde endotel hücreleri üzerinde doğrudan etkilerinin gözlenmesi ve kontrollü koşullar altında anjiyojenik işleminde bazı adımlar ölçme üzerine odaklanmıştır. Bu deneyler ^1, endotel hücre çoğalmasının, göç ^{2, 3} ağı oluşumu, tüp oluşumu ⁴ ölçülmesini ve parçacıklarının ⁵ çimlenme bulunmaktadır. Ex vivo modelleri, in vitro olanlardan farklı olarak, daha karmaşık ve çoğul doku hücre tipleri dahil, bir örnek olmak aort halkası deney ^6. In vivo var Yine de, diğer sistemler gibi, dolaşımdaki hücrelerin katkısını ve endotel hücrelerinin doğal dokudan yakalayamazsınız. Girişimleriçok gelişmiş olmasına rağmen, mikroakışkan sistemleri ⁷ kullanılarak yapılmaktadır in vivo ayarı, ancak hatta bu deneyleri taklit akış altında anjiogenezisi çalışma, halen in vivo mevcut tüm bölmelere için açıklayamazlar.

Nedeniyle, in vitro ve ex vivo anjiyogenez modellerinin sınırlamalara in vivo modeller anjiyogenez çalışmaları için daha güvenilir seçimler kalır. Bu modelleri örnekleri mikroskop ⁸ altında büyüyen kan damarlarının görselleştirme izin şeffaf odaları, "pencere", implantasyon dahil, örneğin fare kulağı ve tavuk koryoallantoik zarı gibi normal dokularda matrigel ve damar oluşumu gibi enjekte cilt altı implantları (CAM ). Bununla birlikte, en kabul edilebilir ve kantitatif in vivo anjiyogenez modellerden biri doğal avasküler kullanan burada tarif edilen korneal mikrocep neovaskularizasyon tahlili, birBir "ekran" olarak kornea görselleştirmek ve yeni anjiyojenik büyüme ⁹ değerlendirmek için.

Farelerde geliştirilen Burada komea mikro-tahlili tarif eder. İlk model tavşan kornealarından spesifik olmayan anjiyojenik uyaranlara ölçmek için kullanılmıştır. Bu, tavşan gözün ön odasının sulu cismi; tümör parçaları sokulması ile yapılabilir ve tümörle tetiklenmiş neovaskülarizasyon ¹¹ ölçülmüştür.

Ancak, deney sonra daha iyi belirlemek ve anjiyojenik etkisini standardize spesifik büyüme etkilerini incelemek için ¹⁰ faktörleri gelişti. Gözdeki büyüme faktörü serbest bırakmak amacıyla, anjiogenik büyüme faktörleri, bilinen miktarlarda ihtiva eden yavaş salımlı peletler yerine dokuların kullanılmıştır. Örneğin bFGF ve VEGF gibi saflaştırılmış rekombinant anjiyojenik proteinlerin mevcudiyeti anjiyojenez module ¹² belirli hedeflere olarak kullanımı gerekmektedir. Başlangıçta, tahlilidirbüyük ölçüde onların büyüklüğü nedeniyle ancak daha sonra model fareler çevrilmiş ile çalışmak daha kolay tavşanlarda, kullanılan; Bir daha küçük ve daha az pahalı hayvan modeli. Farelere tavşan kayıyor böylece anjio ¹³ etkileyen genetik bileşenleri içine yeni bir araştırma alanı oluşturarak, genetik manipüle hayvanları kullanmak için güçlü olmak önemli bir avantaj sağladı. Anjiyojenez okuyan kornea deneyinin daha kabul edilebilir kullanımına ek olarak, diğer biyolojik prosesler için de değiştirilebilir deneyler kullanılarak araştırılmaktadır olabilir. Örneğin, lenfanjiyogenezin çalışmalar spesifik moleküler belirteçlerin ¹⁴ ile lenfatik damarların görselleştirme izin düşük doz bFGF'dir pelet implantasyonu ile mümkün yapılmıştır. Buna ek olarak, bu tahlili, angiogenesisin ¹⁵ radyasyonun etkilerini değerlendirmek için bir araç sağlamaktadır.

Toplamı, korneal mikrocep denemesi anjiyojenez niceliksel, temsilcisi olduğunuroducible, in vivo anjiyogenezin esnek bir değerlendirme. Bu tahlilde önemli bir avantajı, gemilerin, doğal olarak avasküler doku üzerinde büyür, çünkü arka plan kapların ölçüm gereksiz olmasıdır. Burada ayrıntılı olarak, bu testin protokolü tarif oluşabilir ve farklı senaryolar tartışır. Deney, 3 'farklı parçadan oluşur. Burada elde edilen nörovasküler büyüme ölçmek için kullanılan bir gelişme faktörü dahil topakların hazırlanmasını izleyen cerrahi implantasyon metodu ve son olarak anlatacağız.