Summary

L'enregistrement des potentiels d'action unique neurones de se déplacer librement à travers Pigeons Trois étapes de l'apprentissage

Published: June 02, 2014
doi:

Summary

Apprendre de nouvelles associations stimulus-réponse engage un large éventail de processus neuronaux qui sont finalement pris en compte dans l'évolution sortie de pic de neurones individuels. Nous décrivons ici un protocole de comportement permettant un enregistrement continu de l'activité unique neurone tandis que les animaux acquièrent, éteindre, et réacquérir une réponse conditionnée dans une seule session expérimentale.

Abstract

Bien que le sujet de l'apprentissage a attiré un immense intérêt des scientifiques à la fois comportementales et neuronales, seulement peu de chercheurs ont observé une activité unique neurone tandis que les animaux acquièrent une réponse opérante conditionné, ou lorsque cette réponse est éteint. Mais même dans ces cas, les périodes d'observation comprennent généralement une seule étape de l'apprentissage, c'est à dire l'acquisition ou de l'extinction, mais pas les deux (exceptions comprennent des protocoles utilisant l'apprentissage de retournement; voir Bingman et al 1 pour un exemple.). Toutefois, l'acquisition et l'extinction comportent des mécanismes d'apprentissage différents et devraient donc être accompagnés par différents types et / ou loci de la plasticité neuronale.

En conséquence, nous avons développé un modèle de comportement qui institue trois stades de l'apprentissage en une seule session de comportement et qui est bien adapté pour l'enregistrement simultané de l'action des potentiels des neurones simples de. Animaux unre formé sur une tâche de choix forcé seul intervalle qui nécessite la cartographie chacun des deux choix de réponses possibles à la présentation des différents nouveaux stimuli visuels (d'acquisition). Après avoir atteint un critère de performance prédéfini, l'une des deux réponses à choix n'est plus armé (extinction). Après une certaine décroissance du niveau de performance, les bonnes réponses sont encore renforcés (réacquisition). En utilisant un nouvel ensemble de stimuli à chaque session, les animaux peuvent subir le processus d'acquisition extinction-réacquisition à plusieurs reprises. Parce que tous les trois étapes de l'apprentissage se produisent en une seule session de comportement, le paradigme est idéal pour l'observation simultanée de la sortie de dopage de plusieurs neurones individuels. Nous utilisons les pigeons comme des systèmes modèles, mais la tâche peut facilement être adapté à d'autres espèces capables d'apprendre de discrimination conditionné.

Introduction

Apprendre de nouvelles associations stimulus-réponse-résultat engage un large éventail de processus de plasticité neuronale. Ces procédés sont en fin de compte en compte dans la production de la modification transitoire des neurones individuels. Sans doute, l'un des paradigmes les plus fréquemment employé d'apprentissage est pavlovien conditionnement de la peur menée par les rongeurs. Dans ce cadre, l'acquisition et l'extinction d'une réponse conditionnée ont lieu dans quelques dizaines d'essais 2. Le développement rapide de la peur conditionnée peut être avantageux car il permet l'exécution d'un grand nombre d'animaux dans un court laps de temps. En outre, l'acquisition et l'extinction peuvent être observées dans quelques dizaines d'essais sur un seul jour chez les animaux naïfs 3,4 ou répartis sur 2 à 3 jours 2,5-8. Cependant, les connaissances acquises sur les changements de l'activité neuronale pendant l'apprentissage dans ces expériences ne s'appliquent pas nécessairement à l'extérieur du domaine de conditionnement de la peur. Par exemple, le comportement orienté vers un but entraînée par positionrenforcement tive est plus adéquate modélisé par opérant plutôt que des procédures de conditionnement pavlovien, et peut en partie dépendre de différents substrats neuronaux 9,10. Aussi, conditionnement de la peur se développe si rapidement que les réponses neuronales à la CS ne peuvent être observées pour les quelques dizaines de procès, imposant de sévères limites à l'analyse des changements de l'activité neuronale pendant l'apprentissage.

Malheureusement, l'acquisition et l'extinction de répondre opérant prend habituellement plusieurs jours. Cela est préjudiciable pour les enquêtes neurophysiologiques, car il est notoirement difficile à enregistrer l'activité des cellules individuelles pendant plus de quelques heures. En raison de la grande similitude des formes d'onde des potentiels d'action extracellulaire enregistrées, il est problématique d'affirmer que les pics enregistrés dans une journée sont générés à partir de la même cellule que les pointes avec des formes d'onde similaires enregistrées sur la prochaine 11,12, en particulier dans les zones à forte densité de cellules tel que l'hippocampe.

<p class="Jove_content"> Pour répondre à ces questions, nous avons développé un paradigme comportemental roman utilisant trois conditions d'apprentissage dans une session expérimentale sur une seule journée. Cela exige que l'animal expérimental est prêt à effectuer des centaines d'essais dans des conditions variables sur une mince programme de renforcement. Pigeons voyageurs (Columbia livia domestica forma) sont des organismes modèles classiques en psychologie expérimentale 13-17. Ces oiseaux sont capables d'effectuer des discriminations visuelles complexes 18, peut s'adapter avec souplesse à l'évolution des comportements contingences de renforcement 19,20, et sont des travailleurs uniquement avides, effectuer des essais avec 1000 montant minimum de ferraillage. Ces caractéristiques les rendent particulièrement approprié pour les expériences décrites ci-dessous.

Protocol

Déclaration d'éthique Toutes les expériences ont été menées en conformité avec les directives allemandes pour le soin et l'utilisation des animaux en science. Procédures ont été approuvées par un comité national d'éthique de l'Etat de Rhénanie du Nord-Westphalie, Allemagne. Présentation du système Opérant Chambre Test La chambre opérant (Figure 1)</s…

Representative Results

Comportement La figure 4A montre les performances de comportement d'un animal dans une session d'exemple. Le niveau de l'animal de performance atteint critère pour NS 2 dans les 180 essais (45 présentations de relance) et est proche de 100% pour la NS 1 depuis le début. Cette stratégie – la première réponse à la même clé pour deux nouveaux stimuli, et puis en ajustant les réponses pour l'un des stimuli – est à peu près aussi souvent observé comme in…

Discussion

Ce protocole décrit une tâche comportementale complexe adapté aux enregistrements unitaires simultanées. Nous avons décrit la tâche SIFC pour les pigeons, mais il peut être facilement adapté aux rongeurs en exigeant pokes nez ou levier de pression plutôt que des coups de bec clés, et son remplacement par visuel olfactif, auditif, ou stimuli tactiles.

Peut-être les étapes les plus critiques lors de la procédure de formation sont: 1) la réduction progressive de la récompense pro…

Divulgaciones

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Cette recherche a été financée par des subventions de la Fondation allemande pour la recherche (DFG) à MCS (POUR 1581, STU 544/1-1) et OG (POUR 1581, SFB 874). Le site de la DFG est http://www.dfg.de/en/index.jsp. Les bailleurs de fonds n'ont joué aucun rôle dans la conception de l'étude, la collecte et l'analyse des données, la décision de publier, ou de la préparation des auteurs manuscript.The remercier Thomas Seidenbecher pour nous fournir le protocole dorure ainsi que Tobias Otto de l'aide pour la mise en place de la électrophysiologique matériel d'enregistrement.

Materials

Name of Material/ Equipment Company Catalog Number Comments/Description
Resistance wire (for use as electrodes) California Fine Wire, Grover Beach (CA), USA Stablohm 675; formvar-coated nichrome wires (outer diameter 25 µm)
Microconnectors Ginder Scientific, Nepean, Ontario, Canada GS18PLG-220 (plug) & GS18SKT-220 (socket to build headstage)
Cannulae Henke Sass Wolf, Tuttlingen, Germany 0.4x20mm/ 27Gx3/4"
Gold solution for plating Neuralynx, Bozeman (MT), USA SIFCO Process Gold Non-Cyanide, Code 5355
Solution for ultrasonic bath Alconox, Inc., New York, USA 1304 Tergazyme
Conductive glue Henkel Loctite LOCTITE 3888 Silver filled, conductive, adhesive
Stainless steel screws J.I. Morris, Southbridge (MA), USA F0CE125 self-tapping miniature screws, body length 1/8 inches
Light-curing dental cement van der Ven Dental, Duisburg, Germany Omniceram Evo Flow A2
Light-curing unit van der Ven Dental, Duisburg, Germany Jovident Excelled 215 Curing Light (wireless LED light curing unit)
Filter amplifiers npi electronic GmbH, Germany DPA-2FS
A/D converter Cambridge Electronic Design, Cambridge, UK power 1401
Spike2 software Cambridge Electronic Design, Cambridge, UK Version 7.06a
Matlab The Mathworks, Natick (MA), USA R2012a

Referencias

  1. Bingman, V. P., Gasser, B. A., Colombo, M. Responses of pigeon (Columba livia) wulst neurons during acquisition and reversal of a visual discrimination task. Behav Neurosci. 122, 1139-1147 (2008).
  2. Herry, C., Ciocchi, S., Senn, V., Demmou, L., Müller, C., Lüthi, A. Switching on and off fear by distinct neuronal circuits. Nature. 454, 600-606 (2008).
  3. Quirk, G. J., Repa, C., LeDoux, J. E. Fear conditioning enhances short-latency auditory responses of lateral amygdala neurons: parallel recordings in the freely behaving rat. Neuron. 15, 1029-1039 (1995).
  4. Quirk, G. J., Armony, J. L., Ledoux, J. E. Components of Tone-Evoked Spike Trains in Auditory Cortex and Lateral Amygdala. Neuron. 19, 613-624 (1997).
  5. Maren, S. Auditory fear conditioning increases CS-elicited spike firing in lateral amygdala neurons even after extensive overtraining. Eur J Neurosci. 12, 4047-4054 (2000).
  6. Milad, M. R., Quirk, G. J. Neurons in medial prefrontal cortex signal memory for fear extinction. Nature. 420, 713-717 (2002).
  7. Hobin, J. A., Goosens, K. A., Maren, S. Context-dependent neuronal activity in the lateral amygdala represents fear memories after extinction. J Neurosci. 23, 8410-8416 (2003).
  8. Maren, S., Hobin, J. A. Hippocampal regulation of context-dependent neuronal activity in the lateral amygdala. Learn Mem. 14, 318-324 (2007).
  9. Knapska, E., et al. Differential involvement of the central amygdala in appetitive versus aversive learning. Learn Mem. 13, 192-200 (2006).
  10. Harloe, J. P., Thorpe, A. J., Lichtman, A. H. Differential endocannabinoid regulation of extinction in appetitive and aversive Barnes maze tasks. Learn Mem. 15, 806-809 (2008).
  11. Gray, C. M., Maldonado, P. E., Wilson, M., McNaughton, B. Tetrodes markedly improve the reliability and yield of multiple single-unit isolation from multi-unit recordings in cat striate cortex. J Neurosci Methods. 63, 43-54 (1995).
  12. Lewicki, M. S. A review of methods for spike sorting: the detection and classification of neural action potentials. Network. 9, (1998).
  13. Skinner, B. F. 34;Superstition" in the pigeon. J Exp Psychol. 121, 273-274 (1948).
  14. Herrnstein, R. J. Relative and absolute strength of response as a function of frequency of reinforcement. J Exp Anal Behav. 4, 267-272 (1961).
  15. Brown, P. L., Jenkins, H. M. Auto-shaping of the pigeon’s key-peck. J Exp Anal Behav. 11, 1-8 (1968).
  16. Epstein, R., Kirshnit, C. E., Lanza, R. P., Rubin, L. C. 34;Insight" in the pigeon: antecedents and determinants of an intelligent performance. Nature. 308, 61-62 (1984).
  17. Mazur, J. E. Varying initial-link and terminal-link durations in concurrent-chains schedules: a comparison of three models. Behav Processes. 66, 189-200 (2004).
  18. Herrnstein, R. J., Loveland, D. H. Complex visual concept in the pigeon. Science. 146, 549-551 (1964).
  19. Stüttgen, M. C., Yildiz, A., Güntürkün, O. Adaptive criterion setting in perceptual decision making. J Exp Anal Behav. 96, 155-176 (2011).
  20. Stüttgen, M. C., Kasties, N., Lengersdorf, D., Starosta, S., Güntürkün, O., Jäkel, F. Suboptimal criterion setting in a perceptual choice task with asymmetric reinforcement. Behav Processes. 96, 59-70 (2013).
  21. Rose, J., Otto, T., Dittrich, L. The Biopsychology-Toolbox: a free, open-source Matlab-toolbox for the control of behavioral experiments. J Neurosci Methods. 175, (2008).
  22. Bilkey, D. K., Muir, G. M. A low cost, high precision subminiature microdrive for extracellular unit recording in behaving animals. J Neurosci Methods. 92, 87-90 (1999).
  23. Bilkey, D. K., Russell, N., Colombo, M. A lightweight microdrive for single-unit recording in freely moving rats and pigeons. Methods. 30, 152-158 (2003).
  24. Gallistel, C. R., Gibbon, J. Time, rate, and conditioning. Psychol Rev. 107, 289-344 (1993).
  25. Starosta, S., Güntürkün, O., Stüttgen, M. C. Stimulus-response-outcome coding in the pigeon nidopallium caudolaterale. PLoS One. 8, (2013).
  26. McNaughton, B. L., O’Keefe, J., Barnes, C. A. The stereotrode: a new technique for simultaneous isolation of several single units in the central nervous system from multiple unit records. J Neurosci Methods. 8, 391-397 (1983).
  27. Hill, D. N., Mehta, S. B., Kleinfeld, D. Quality metrics to accompany spike sorting of extracellular signals. J Neurosci. 31, 8699-8705 (2011).

Play Video

Citar este artículo
Starosta, S., Stüttgen, M. C., Güntürkün, O. Recording Single Neurons’ Action Potentials from Freely Moving Pigeons Across Three Stages of Learning. J. Vis. Exp. (88), e51283, doi:10.3791/51283 (2014).

View Video