JoVE Journal > Environment
Summary
Abstract
Introduction
Protocol
Resultados
Discussion
Divulgaciones
Acknowledgements
Materials
Referencias
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.
Medio ambiente

טכניקת לימוד של פרוקים-רגליים וקהילות חיידקים בתוך רקמות עץ

Published: November 16, 2014
doi:
10.3791/50793
, , , ,
1School of Forestry,Northern Arizona University, 2Acoustic Ecology Institute

Summary

We provide a technique to preserve intact tree phloem and prepare it for observation. We create an apparatus called a phloem sandwich that allows for the introduction and observation of arthropods, microbes, and other organisms that inhabit phloem tissues.

Abstract

Phloem tissues of pine are habitats for many thousands of organisms. Arthropods and microbes use phloem and cambium tissues to seek mates, lay eggs, rear young, feed, or hide from natural enemies or harsh environmental conditions outside of the tree. Organisms that persist within the phloem habitat are difficult to observe given their location under bark. We provide a technique to preserve intact phloem and prepare it for experimentation with invertebrates and microorganisms. The apparatus is called a ‘phloem sandwich’ and allows for the introduction and observation of arthropods, microbes, and other organisms. This technique has resulted in a better understanding of the feeding behaviors, life-history traits, reproduction, development, and interactions of organisms within tree phloem. The strengths of this technique include the use of inexpensive materials, variability in sandwich size, flexibility to re-open the sandwich or introduce multiple organisms through drilled holes, and the preservation and maintenance of phloem integrity. The phloem sandwich is an excellent educational tool for scientific discovery in both K-12 science courses and university research laboratories.

Introduction

רקמות השיפה וקליפה של עצי מחט הן מארח לאלפי אורגניזמים. Phloeophagy, ההאכלה ברקמות השיפה של הקליפה הפנימית, היא הרגל מזוהה בדרך כלל עם חיפושיות קליפה, woodborers, וכמה מינים של חסרי חוליות וחיידקים אחרים שחיות בתוך עצים 23 חיפושיות קליפה. (Coleoptera: חידקוניתיים) לפתח ולחיות בתוך השיפה פרט ל תקופות קצרות, כאשר מבוגרים מחפשים עצי מארח חדשים. ביום 31 בחיפושיות קליפה נחקרו רבות בשל ההשפעות הכלכליות שלהם על עצים 18,19, אבל תצפיות התנהגותיות ישירות של החרקים בתוך חומרי עץ היו מוגבלות. 4 יתר על כן, הגלריות נבנו על ידי חיפושיות קליפה הפך בית גידול למספר עצום של מינים. 11 מספרים עצומים של פטריות 30, חיידקי 3, קרדית 10,21, ונמטודות 16,19 יחד עם פרוקי רגליים טורפות וטפילות אחרים 22,24 מאכלסים את חומר השיפה. הטכניקות ניתנות כאןלאפשר להתבוננות ישירה בחיפושיות קליפה, קרדית, וborers העץ, כי בדרך כלל חיים בסביבות קורטיקליים. שינויים קלים בפרוטוקול יכולים להתבצע ללמוד פטריות וחיידקים.

חיפושיות קליפה ואורגניזמים סביבתיים ברקמות עץ נחקרו באמצעות "כריך השיפה." ניתן למצוא שימוש מוקדם של טכניקה זו בהיכרויות הספרות חזרה לשנת 1933, כאשר נעשה בו שימוש כדי לבחון את instars הזחל של חיפושית דאגלס-אשוח (Dendroctonus pseudotsugae). 2 כריך השיפה עבר נגזרות רבות כחומרים שונים הפכו זמינים. במקור, מכשיר זה מורכב מחתיכת השיפה הונחה בין שני לוחות זכוכית, צמודות זו לזו ברצועות של גומי. 2 מאוחר יותר, מהדק, קלטת, דבק, פלסטיק, וחומרים אחרים המשמשים לבנייה של הכריך. 13,14 , 15,17,26,28 הפרוטוקול המתואר כאן מציע שיפורים על פני כמה העיצובים האחרונים. לדוגמא, בהעבר, מיני מבחן היו נכנסו לצד של הכריך, בין הצלחות מזכוכית או מפלסטיק. זה הגביל את הבנייה של גלריות לכיוון אחד. השימוש של חורי כניסה בצלחת העליונה מאפשר חופש רב יותר למיני מבחן ליזום בניית גלריה טבעית. יתרון נוסף של הפרוטוקול שהוצג הוא העיצוב הפשוט שלה, אשר ניתן לבנות בקלות עם כמה כלים. השימוש בכריך השיפה אפשר לתצפיות ישירות של התנהגות האכלה, רבייה, התפתחות, ואינטראקציות של אורגניזמים שאחרת לא היו אפשריות. 1,5, 22 שיטה זו היא גם כלי מצוין לחינוך K-12 ומדע תוכניות ומציג.

יש כמה דקויות ביצירת כריך השיפה שקשה לפרש מאו לא דווח בכתבי יד. אנו מאמינים כי תיאור חזותי (כלומר, וידאו) של הייצור של כריך השיפה נחוץ ויהיהשל ערך למדענים ואנשי חינוך מעוניין ללמוד אורגניזמים phloeophagous. הפרוטוקול שלנו מספק דרך פשוטה וזולה כדי לצפות פרוקי רגליים, חיידקים, ואורגניזמים אחרים המאכלסים את רקמות השיפה.

Protocol

1. השיפה בחירה והוצאה מעץ בחר עץ עם מאפיינים מסוימים. לאסוף השיפה מאורנים (כלומר, עצים בסוג Pinus) כמו שיש להם שכבה ייחודית השיפה שהיא כמה מילימטרים. 18,27 ברגע שעץ נמצא שיש כמה ענפים נמוכים, לבדוק אותו לכל פגמים אחרים כגון התקפות חרקים ו / או גורמי מחלה. לחלופין, להשתמש השיפה מעצי מחט אחרות כגון עצי אשוח בכריכי השיפה. 9 מיני עצים אחרים עשויים להיות מתאימים להסרת השיפה כמו מעץ קשה. הערה: מחטי עצים עם כתרים גדולים יש בדרך כלל רקמת השיפה העבה. למקסם את כמות השיפה, עדיף לחתוך עצים שיש לי כמה פגמים וענפים על הגזע (בגזע). מיני אורן שעבודת גיזום עצמי הטוב ביותר. השיפה היא בדרך כלל עבה במהלך עונת הגידול והוא עבה יותר את תא המטען מ קרוב לקרקע. השיפה לפעמים קשה removדואר מהעצים בעונות הסתיו או בחורף. לחתוך עץ למטה או להשתמש ביומנים לחתוך לאחרונה להשיג רקמת השיפה. בחר כיוון נפילה שימזער פגיעה בעץ, כמו גם עצים סמוכים. ענפים מנותקים תא המטען כדי לאפשר גישה קלה יותר לחומרי קליפה במהלך הסרת השיפה. ברגע שעץ נחתך (כרות; הושלך על הקרקע) מתחיל גירוד הקליפה מהגזע עם תיקו להב חד (איור 1 א.). לגרד בשטח של הקליפה מעל עד שתגיע לשכבת השיפה. הערה: שכבת השיפה היא בדרך כלל בהירה יותר בצבע (למשל, בצבע שמנת) ולח, ואילו הקליפה החיצונית היא יבשה יותר וכהה יותר בצבע (איור 1 ב '.). קח טיפול מיוחד שלא לגרד את השיפה. האזור של קליפה מגורדת תלוי בגודל נתח השיפה (ים) נדרש. אחרי הקליפה מוסרת, לחתוך קווי המתאר של יצירת השיפה עם סכין חד. ודא הסכין חותך את כל הדרך לעצה (איור. 2 א). כדי להסיר את השיפה, להתחיל בפינה של יצירת השיפה באמצעות אצבעות לקלף בזהירות את השיפה. השתמש בסכין כדי לסייע בגירוד השיפה את העצה. המשך מושך השיפה את עד שכל פיסה מוסרת. הערה: השיפה בדרך כלל מקלף של העץ הכי קל בקיץ. להשיפה שהיא קשה ביותר להסרת, כלי בצורת מרית יכול לסייע במאמץ. מניחים את יריעת השיפה מייד לתוך שקית סטרילית. לקבלת התוצאות הטובות ביותר, ואקום לאטום את השקית (איור. 2 ב) או, אם שימוש בשקיות ניילון אטום, להסיר את כל האוויר מהשקית. זה מגדיל את תוחלת החיים של השיפה. לחלופין, להניח את החלקים מרובים של השיפה בתיק אחד. השיפה חנות בשקיות אטומות מעט מעל ההקפאה (בין 1 ל 10C) כדי לשמור על הטריות שלו. 2. יצירת סנדוויץ השיפה חותך שתי חתיכות שווה של חומר פלסטי שקוף, פוליקרבונט, או חומר קשה, ברור דומה (למשל, זכוכית) גדול מעטr מהחתיכה (איור. 2C) של השיפה. סביב שולי אקריליק כדי למנוע את הפינות מקורעים את חותם Parafilm. פרוטוקול זה משתמש 1/8 ב. אקריליק ברור העבה. הערה: הגודל של החתיכות לחתוך תלויה בצרכי של האורגניזם הנושא ואת אורכו של המחקר. לדוגמא, זוג חיפושיות קליפה מנצל 4 dm 2 של השיפה על פני תקופה חודש, אבל רק צריך dm 1 2 אם המחקר מתרחש בתוך כמה ימים. לקדוח חור לתוך אחת יצירות אקריליק כדי לאפשר כניסה של האורגניזם מחקר (ים). הגודל ומספר החורים תלויים במטרות (איור. 2 ד). לפני הצבת השיפה בין חתיכות אקריליק, לעקר את פני השטח אקרילי (עם> 70% אתנול) או, אם באמצעות אקריליק החדש, להסיר את הסרט המגן. הנח חתיכת השיפה הטרי בין חתיכות אקריליק סטרילי. אוריינט פיסת אקרילי עם החור (ים) בצד הפנימי או חיצוני של השיפה, whicheveיש צורך בr. בדרך כלל, להתמודד עם הצד החיצוני של השיפה (צד שקליפה על זה) לכיוון חורי הכניסה. 3. איטום סנדוויץ השיפה ליצור חותם זמני סביב כריך השיפה, להשתמש 2 ב. רצועות Parafilm רחבות משכו בקצוות של כריך השיפה (איור. 2 ג). לחלופין, להשתמש לעטוף כלוריד polyvinylidene לאטום את הקצוות. 6 הבא, למקם את מהדק בכל צד של הכריך לסחוט אקריליק השיפה. ודא את כל פני השטח הוא הידק למטה כדי למנוע את חלל אוויר בין אקריליק והשיפה (איור 2 ג). אם לא הידק כראוי, דגימות עשויות לנוע בין אקריליק והשיפה. ליצור חותם חצי קבוע להוסיף ריבת אפוקסי או נפט שאינו הדבקה סביב השיפה. ודא כי החומר המקיף את השיפה לחלוטין. לאחר מכן, השתמש מהדק או ברגים עם ברגים (ייתכן שיהיה צורך לקדוח חורים מראש) להחזיק אקריליק ההדוק להשיפה.הכריכים להישאר קיימא רק לתקופה של עד חודש או חודשים. בהתאם לצרכים החמצן של אורגניזמים המחקר, להוסיף מסנן אוויר על צד אחד או יותר של הכריך. זה יאפשר לאוויר להיכנס לתוך כריך השיפה אבל להגביל את אובדן מים מהשיפה. אנו משתמשים במסנני פחם פשוטים שגם להפחית את הסיכון של פטריות וזיהום חיידקים. לדגימות מחקר שדורשות כניסה ויציאה כרצונו, להחליף את אחד חלקי אקריליק עם עץ או חומר דומה שחרקים יכולים נשאו ל. הדבר חשוב במיוחד להתבוננות בborers העץ, כי אחרי מצב הזחל שלהם הושלם בשכבת השיפה, אז הם נשאו לעצה. כדי למנוע נבדקים מלצאת את חורי הכניסה, מקום מנות קטנות פטרי (או חפצים אחרים, קלטת) על החורים, בריחת חסימה. מאז אורגניזמים הנמצאים בחללים אלה הם להרגיל רמות אור נמוכות, ייתכן שיהיה צורך למקם את הכריכים בחדר חשוך או בתיבה, או o המקוםחומר Paque על גבי לחסום את האור. 4. אורגניזמים התבוננות בסנדוויץ השיפה להציג את דגימות מחקר לתוך חור כניסה של כריך השיפה (איור. 2 ד). שים לב דגימות באמצעות מיקרוסקופ לנתח תחת אור אדום או אור הלבן נקבע על עצמה נמוכה (איור. 2E). כדי להקליט את הפעילות או צמיחה של דגימות בתוך כריך השיפה לצרף מצלמה או מצלמת וידאו למיקרוסקופ. צרף מצלמות מיוחדות וידאו לעינית המיקרוסקופ (איור. 2E & F). לאורגניזמים קטנים מאוד כגון קרדית, נמטודות, וpseudoscorpions, משתמש במצלמת וידאו בחדות גבוהה שצורפה למיקרוסקופ. כדי להקליט צלילים, להכניס מיקרופונים לתוך חור הכניסה של כריך השיפה או באמצעות צד כריך השיפה. בגלל חור הכניסה קטן, להשתמש במיקרופון קטן כגון מיקרופון הקבל electret. כדי להקליט מהצד או המשטח שלכריך השיפה להשתמש אלמנט פייזו (איור. 3 ב). כדי השמעת צליל, להשתמש באותו האלמנט פייזו, או לצרף את מתמר מישוש (מְעוֹרֵר) על פני השטח של החלק העליון או תחתון של אקריליק.

Representative Results

הפרוטוקול שתואר לעיל יאפשר חוקר להתבונן אורגניזמים שחיים בסביבה הנסתר מתחת לקליפת עץ. כדי להמחיש את השימוש בטכניקה זו אנו מתארים מחקר נציג מהמעבדה שלנו שמשתמשת בטכניקה זו. 12 בניסוי זה, כריכי השיפה שמשו כדי לבחון את ההשפעות של טיפולים אקוסטיים בתפוקת רבייה, מרחק מנהור, והישרדות של חיפושיות קליפה (איור . 2E ו2F). תצפית ישירה של חיפושיות, מתאפשרת על ידי השימוש בכריך השיפה, חשפה כמה ממצאים מעניינים. ראשית, הקלטנו מרחקי נהור יומיים על ידי סימון מיקומם של החיפושיות באקריליק עם סמן כל 24h. תהליך זה נמצא הבדלים משמעותיים על פני טיפולי קול שהיה מוסתר בלי כריך השיפה. בשלב הבא, חוקרים מצאנו ירידה בייצור ביצים עם טיפולי צליל מסוימים. הטבע הנייד של כריך השיפה אפשר לדוארתצפיות GG להסתיים תחת מיקרוסקופ לנתח מבלי להפריע החיפושיות. במהלך התצפיות הללו, אנחנו שבויים של התנהגות ביצת חיפושית הנחת עם מצלמה בחדות גבוהה שצורפה למיקרוסקופ. תצפיות בולטות אחרות כללו את הריגתם של בני זוג והייזום של טיסה כרוכה בטיפולים אקוסטיים מיוחדים. Assay כריך השיפה היה חיוני למחקר של תגובות חיפושית קליפה לטיפולים אקוסטיים שלנו. גילויים אלה, שיהיו בלתי אפשריים לשמור מתחת לקליפת עץ, תרומות רבות ערך לפיתוח אפשרויות ניהול למאבק בהתפרצויות חיפושית קליפה. 1. כלים איור) נדרשו כדי להסיר קליפה מעץ. פריטי 1 ו -2 הם לצייר להבים המשמשים לגרד קליפה מהעץ. פריטי 3 (גרזן) ו- 4 (ראה משיכה) יעילים להסרת סניפיםאזור סמוך גילוח. ב) שימוש של תיקו להב כדי להסיר קליפה מעץ. שים לב לצבע האור של השיפה מתחת לקליפה האדמדמה. איור 2.) הסרת השיפה אחרי הקליפה היה לגרד מעץ. השיפה טריות המאוחסנת בשקית ואקום אטומה. כריך השיפה עם מהדק מחזיק חתיכות אקריליק יחד וParafilm סביב הקצוות כדי למנוע זיהום והתייבשות של השיפה C) B). D ) חור ליד חיפושית קליפה קדח לתוך אקריליק. E) באמצעות מיקרוסקופ כדי להתבונן כריך השיפה. תצוגת F) וידאו של חיפושיות קליפה בתוך כריך השיפה. איור 3. <stרונג>) רכישת פרומון מחיפושיות בכריך השיפה. האוויר נמשך דרך צינורות שהכילו הקלטה סופר-Q סופג. B) והשמעה של קול באמצעות מתמר piezo החשמלי (מרכז התמונה) לחיפושיות אורן הר בתוך כריך השיפה.

Discussion

כריך השיפה מאפשר את ההקדמה והתבוננות של פרוקי רגליים, חיידקים, ואורגניזמים קטנים אחרים המאכלסים את רקמות השיפה. 1,7,8,9,17,18 טכניקה זו הביאה לתגליות חדשות והבנה טובה יותר של התנהגויות, life- תכונות היסטוריה, פיתוח, ואינטראקציות של אורגניזמים בתוך השיפה עץ. 1,5,10 פרוטוקול הכריך שתואר כאן היא היברידי של עיצובי עבר, ותספקנה כריך חסכוני כי הוא נבנה בקלות עם ציוד וחומרים מינימאליים. ניתן לעשות שימוש חוזר חתיכות הזכוכית, אקריליק, או פוליקרבונט, והחומרים מתכלים רק Parafilm והשיפה.

למרות שכל השלבים בפרוטוקול חשובים, צריכים להיות אחרי צעדים מסוימים אך ורק על מנת להבטיח את הרמה הגבוהה ביותר של הצלחה. ראשון, עץ צריך להיות ממוקם שיש לו חלק מגזעו חופשי, או חופשי יחסית, של סניפים. עצים שיש לו סניפים רבים קשים להתגלח ויהיה yכמה חתיכות ield קיימא השיפה, כמו בכל ענף יש לחתוך סביב בעת הסרת השיפה. בשלב הבא, חשוב למזער את החשיפה לאוויר של השיפה. אנחנו שמים במהירות כל פיסת השיפה בשקית עם ההסרה. ברגע ש05:57 חתיכות יוסרו, הם מועברים לתוך שקית אטום ואקום; אנו משתמשים ממיר מתח כדי להפעיל את אוטם את הסוללה רכב בתחום. אחרון, חיטוי חתיכות אקריליק וניקיון כללי בעת ביצוע פרוטוקול זה יאט את גידול פטריות בכריך. זה חשוב במיוחד לתצפיות ממושכות.

כפי שצוין לעיל, יש מגבלות של מנגנון כריך השיפה. מאז שכבת השיפה היא דקה, רק אורגניזמים קטנים שנשארים בהשיפה יכולים להיות מוחדרים הכריך. חרקים גדולים יותר כמו borers עץ (כלומר, Buprestid, מיני Cerambycid) יכול להיות מוצגים ונצפו לשלבים המוקדמים של מחזור החיים שלהם בשלבים. פרק זמן זה הוא מוגבל בדרך כלל לשני לשלושה שבועות; לאחר שלב זה הזחלים דורשים עץ עצה לשעמם להתגלמות. בניגוד לכך, לחיפושיות קליפה, במיוחד אלה בסוג IPS, מחזור חיים מלאים ניתן הזדווגות, בקיעת ביצה, האכלה, pupating, וeclosion לחיפושית בוגרת-כוללים נצפו. בשלב זה, את הכדאיות של הכריך בדרך כלל מותשת מהתייבשות ופטריות צמיחה. 28 בנוסף, מנגנון זה אינו מאפשר חרקים ליישב או לצאת מכריך השיפה בחופשיות ובאופן טבעי. 27

הפרוטוקול שלנו הוא גמיש במונחים של גודל, צורה, וסוג של השיפה משמש. מחקרים קצרים דורשים פחות חומר השיפה וגודל כריך וניתן לשנותם בהתאם. מינים מחטניים רבים שנוצלו כתורמי השיפה בכריך השיפה (למשל, אורן עץ אורן 12, דאגלס-אשוח 2, אשוחית 29, 27 Loblolly אורן, אורן לונגליף 27). חומרים בכריך יכולים גם להשתנות; עבור לשעברצלחות בשפע, זכוכית יכולות לשמש במקום אקריליק ואפוקסי או קלטת במקום Parafilm.

החלק הקשה ביותר של פרוטוקול זה הוא תהליך הסרת השיפה. עצים אחד ליד שני יכולים להיות שונים באופן קשה השיפה שלהם היא להסיר. כאשר עץ יש השיפה קשה, סבלנות היא קריטית. במקרים אלה, בזהירות לרוץ סכין בין העצה הקשה והשיפה הספוגית. תהליך זה מרגיש ממש כמו לפשוט את עור העץ.

כאשר ישלוט בטכניקת הכריך הבסיסית, שינויים בפרוטוקול יכולים לעזור לצרכימים ספציפיים בכושר. לדוגמא, על ידי השחזת הטכניקות נדרשו להסיר השיפה, ניתן להסיר חתיכות גדולות ומשמשות ליצירת כריכים גדולים יותר. כמו כן, ניתן לבצע שינויים כדי להתאים מכשירים ספציפיים, לדוגמא, חורים נוספים כדי לפקח על פליטה כימית (איור. 3 א), או להקליט או השמעת צלילים (איור. 3 ב). שינויים יכולים להתבצע כדי לאפשר לשימור חצי קבוע של השיפה ואיברההאיזמים, או לתצפיות זמניות של אורגניזמים שיכולים להיות מאוחר יותר לתת חופשי.

Divulgaciones

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

We thank Eli Jensen, Stefano Padilla, and Kasey Yturralde for assistance, and Karen London and anonymous reviewers of the manuscript. We thank Jake Baker and Karla Torres for video footage. Funding was provided to R.W.H by the NAU School of Forestry and NAU Technology and Research Initiative Fund (TRIF).

Materials

Draw blade Big Horn Brand  20265 11” blade
Fillet Knife American Angler 30530 9” blade
Polycarbonate Nexan GE-33 0.093 in. thickness
Parafilm M Fisher Scientific S37441 2” wide
Clamps Pony Jaw Opening 3201-HT-K 4” x 1”
Vacuum Sealer  FoodSaver V2840,  VacLoc vacuum 
and bags FSFSBF0742-015 bags in rolls
DOWNLOAD MATERIALS LIST

Referencias

  1. Aukema, B. H., Raffa, K. F. Behavior of adult and larval Platysoma cylindrical. (Coleoptera: Histeridae) and larval Medetera bistriata. (Diptera: Dolichopodidae) during subcortical predation of Ips pini (Coleoptera: Scolytidae). J Insect Behav. 17, 115-128 (2004).
  2. Bedard, W. D. The number of larval instars and the appropriate length of the larval stadia of Dendroctonus pseudotsugae. Hopk., with a method for their determination in relation to other bark beetle. J Econ Entomol. 26, 128-134 (1933).
  3. Bridges, J. R. Nitrogen-fixing bacteria associated with bark beetles. Microb Ecol. 7, 131-137 (1981).
  4. Cardoza, Y. J., Klepzig, K. D., Raffa, K. F. Bacteria in oral secretions of an endophytic insect inhibit antagonistic fungi. Ecol Entomol. 31, 636-635 (2006).
  5. Cardoza, Y. J., Moser, J. C., Klepzig, K. D., Raffa, K. F. Multipartite symbioses among fungi, mites, nematodes, and the spruce beetle, Dendroctonus rufipennis. Environ Entomol. 37, 956-963 (2008).
  6. Chen, H. -. F., Salcedo, C., Sun, J. -. H. Male mate choice by chemical cues leads to higher reproductive success in a bark beetle. Animal Behavior. 83, 421-427 (2012).
  7. Dodds, K. J., Graber, C., Stephen, F. M. Facultative intra guild predation by larval Cerambycidae (Coleoptera) on bark beetle larvae (Coleoptera: Scolytidae). Environmental Entomology. 30, 17-22 (2001).
  8. Franklin, R. T. A technique for studying the insect parasites of Dendroctonus frontalis. and other bark beetles (Coleoptera: Scolytidae). Journal of Georgia Entomology Society. 2, 43-44 (1967).
  9. Gries, G., Pierce, H. D., Lindgren, B. S., Borden, J. H. New techniques for capturing and analyzing semiochemicals for Scolytid beetles (Coleoptera: Scolytidae). J Econ Entomol. 81, 1715-1720 (1988).
  10. Hofstetter, R. W., Moser, J. C., McGuire, R. Observations of the mite Schizosthetus lyriformis. (Acari: Parasitidae) preying on bark beetle eggs and larvae. Entomology. News. 120, 397-400 (2009).
  11. Hofstetter, R. W., Klepzig, K. D., Coulson, R. Chapter 11: Mutualists and Phoronts of the Southern Pine Beetle. United States Dept. of Agriculture Forest Service, Southern Research Station General Technical Report SRS-140. , 161-181 (2011).
  12. Hofstetter, R. W., Dunn, D. D., McGuire, R., Potter, K. A. Using acoustic technology to reduce bark beetle reproduction). Pest Manag Sci. 70, 24-27 (2014).
  13. Hopping, G. R. Techniques for rearing Ips. De Geer (Coleoptera: Scolytidae). Can Entomol. 93, 1050-1063 (1961).
  14. Hougardy, E., Gregoire, J. -. C. Cleptoparasitism increases the host finding ability of a polyphagous parasitoid species, Rhopalicus tutela (Hymenoptera: Pteromalidae). Behav Ecol Sociobiol. 55, 184-189 (2003).
  15. Kaston, B. J., Riggs, D. S. Studies on the larvae of the native elm bark beetle. J Econ Entomol. 30, 98-108 (1937).
  16. Kinn, D. N. Life cycle of Dendrolaelaps neodisetus. (Mesostigmata: Digamasellidae), a nematophagous mite associated with pine bark beetles (Coleoptera: Scolytidae). Environ Entomol. 13, 1141-1144 (1984).
  17. Kinn, D. N., Miller, M. C. A phloem sandwich unit for observing bark beetles, associated predators, and parasites. USDA FS Res. Notes SO-269. , 3 (1981).
  18. Lieutier, F., Day, K. R., Battisti, A., Gregoire, J. -. C., Evans, H. F. . Bark and wood boring insects in living trees in Europe, a synthesis. , 569 (2004).
  19. Massey, C. L. The influence of nematode parasites and associates on bark beetles in the United States. Bulletin of the Entomology Society of America. 12, 384-386 (1966).
  20. Moser, J. C., Roton, L. M. Mites associated with southern pine bark beetles in. Allen Parish, Louisiana. Can Entomol. 103, 1775-1798 (1971).
  21. Mills, N. J. The natural enemies of scolytids infesting conifer bark in Europe in relation to the biological control of Dendroctonus. spp in Canada. Biocontrol News Information. 4, 305-328 (1983).
  22. Nagel, W. P., Fitzgerald, T. D. Medetera aldrichii. larval feeding behavior and prey consumption [Dipt.: Dolichopodidae]. Entomophaga. 20, 121-127 (1975).
  23. Paine, T., Raffa, K., Harrington, T. Interactions among scolytid bark beetles, their associated fungi, and live host conifers. Annu Rev Entomol. 42, 179-206 (1997).
  24. Reeve, J. D., Coulson, R. N., Klepzig, K. D. Predators of the southern pine beetle. Southern Pine Beetle II. , 153-160 .
  25. Reid, R. W. The behavior of the mountain pine beetle, Dendroctonus monticolae. Hopkins, during mating, egg laying and gallery construction. Can Entomol. 90, 505-509 (1958).
  26. Taylor, A. D., Hayes, J. L., Roton, L., Moser, J. C. A phloem sandwich allowing attack and colonization by bark beetles (Coleoptera: Scolytidae) and associates. J. Entomol. Soc. Amer. 27, 101-116 (1992).
  27. Yu, C. C., Tsao, C. H. Gallery construction and sexual behavior in the southern pine beetle, Dendroctonus frontalis. Zimm. (Coleoptera: Scolytidae). Georgia Entomology Society. 2, 95-98 (1967).
  28. Yturralde, K. The Acoustic Ecology of Bark Beetles and Bed Bugs. PhD. Dissertation. , 323 (2013).
  29. Wermelinger, B., Seifert, M. Analysis of the temperature dependent development of the spruce bark beetle Ips typographus (L.) (Col., Scolytidae). Journal of Applied Entomology. 122, 185-191 (1998).
  30. Whitney, H. S., Mitton, J. B., Sturgeon, K. B. Relationships between bark beetles and symbiotic organisms. Bark Beetles in North American Conifers. , 183-211 (1982).
  31. Wood, S. L. The bark and ambrosia beetles of North and Central America (Coleoptera: Scolytidae), a taxonomic monograph. , 1359 (1982).

Tags

PhloemCambiumArthropodsMicrobesInvertebratesFeeding BehaviorsLife-history TraitsReproductionDevelopmentInteractionsPhloem SandwichEducational ToolScientific Discovery

Play Video
PDF
DOI
DOWNLOAD MATERIALS LIST
Citar este artículo
Aflitto, N. C., Hofstetter, R. W., McGuire, R., Dunn, D. D., Potter, K. A. Technique for Studying Arthropod and Microbial Communities within Tree Tissues. J. Vis. Exp. (93), e50793, doi:10.3791/50793 (2014).
Descargar cita
Reimpresiones y permisos

View Video

✖

To prove you're not a robot, please enter the text in the image below

CAPTCHA Image
Play CAPTCHA Audio
Refresh Image