定期保养和维护的斑马鱼（<em>斑马鱼</em>）实验室简介

1。系统维护斑马鱼被保存在一个循环体系，不断过滤器和充气系统的水，以保持水质，需要一个健康的水生环境。循环的系统还有助于去除过量的食物和鱼的排泄物。不同的公司提供了斑马鱼系统，但水生栖息地，美国在我们的实验室，我们使用的系统。室温或油箱温度一般保持在26-28.5℃，并在光照条件之间是十四时一十小时（光照：黑暗）。斑马鱼系统由水生栖息地（ 例如 ，台式系统）的费用约9,000美元。这种台式系统具有两个货架可以容纳6个10升，12 3升，或20个1.5升罐每个货架上。鱼的多行（ 例如 ，转基因，突变体，野生型）也可以被容纳在同一系统上。 不同种的一组过滤器，用于在系统中。在我们的系统中，所有的坦克每年的水小规模企业，通过一个120微米的过滤垫，50微米罐过滤，生物过滤，活性炭吸附过滤器和紫外线消毒器，然后分发流回油箱。 de-chlorinated/aged水斑马鱼系统中使用。水可以氯化老化至少48小时。在理想的条件下，水应保持在水库泵循环水，以保持温暖，并加快除氯。 应每天检查系统的水的pH值，并保持在6.8和7.5之间。在必要时，应该使用碳酸氢钠以提高pH值。 应定期清洗鱼缸。要清洁鱼缸，关闭水流的该型坦克，沥干多余的水向后倾斜罐的罐小心地从系统中删除。将是显而易见的，在槽的底部和侧面的污垢和藻类生长。 将挡板到一个干净的罐，并填写与氯化水（又名系统娃之三）。小心渔网的鱼转移到该型坦克。盖上盖子，转让的标签名称的坦克。小心地放置在干净的坦克进入了系统和交换机的供水。 净化鱼网，喷以70％的乙醇，在水冲洗，并让它干，然后再重新使用。拆下挡板从污槽和喷洒的两个部分用70％的乙醇。用自来水彻底冲洗，并允许坦克和挡板要重新使用前充分干燥。 循环系统的过滤器必须定期进行检查和修改，以确保其正常功能。这些过滤器应定期更换，以确保适当和清洁水供应的所有鱼缸。 的120微米过滤器垫通常是重新定位或者每天更换;朝向水流重新定位，以用它完全与一个新的更换前。 筒式过滤器应每周更换一次。要更改罐过滤器，去除过滤器单元的扭曲蚂蚁扳手或手iclockwise与。将塑料片或毛巾以下，以防止水或吸收溢漏。用一个新的过滤器更换碳罐和适合的过滤器单元回系统中，小心地拧紧用的手，如有必要的扳手。 活性炭过滤器应改为半月刊（每两个星期）。要更改的碳过滤器，仔细去除碳过滤器单元，用扳手。丢弃用过的活性炭，取而代之的是新的活性炭。重新装上碳的持有人，并把它放回过滤器单元。适合的过滤器单元的背面进入系统。切换系统，并检查，水流入到过滤器。如果有必要，冲洗一些水通过管道清洁之前嵌合到系统中的过滤器管道中的污垢。 生物过滤器应每半年清洗。通常位于之间的碳罐和碳过滤器，在循环系统中的生物过滤器。要改变生物过滤器，REM奥雅纳从系统中的过滤器单元。释放压力从过滤器按压力释放按钮。用扳手拧开过滤器。一般情况下，两个人都需要这一步。卸下的过滤器单元的盖体。清空的内容的过滤器成筛分的的容器分开siporax从水中。注：Siporax是一个很好的孔隙生物过滤介质，有能力进行硝化和反硝化。 ，如果siporax非常脏更换新的。填写过滤器单元与系统的水（含氯的水），盖上盖子，返回过滤装置的供水系统和开关。注意：在一个适应的水族馆，siporax将几个硝化细菌。这些微生物是保持水族箱内的氮循环，并消除一手住房的生物过滤器（脏siporax），其次是亚硝酸盐峰值，可能会导致严重的氨尖峰而n：EW生物过滤器（新siporax）重新建立。这些中间状态的氮循环对水生生物有毒，可能会杀死如果没有回应，适当的斑马鱼。因此，重要的是有继发其他生物过滤器中的斑马鱼的住房制度（ 例如 ，在集水箱水生生境系统），让这些重要微生物的新siporax上的快速复育。 UV过滤器是用来控制系统的生物污染物（如细菌），应改为每九十二个月。应当指出，过滤紫外线的消毒剂量率是〜110毫焦/厘米2在灯的寿命的开始和剂量率的降低超过时间的过程中，因此即使当它出现仍然是必要的，以取代的EUROPAGES功能。 2。馈送斑马鱼可喂干（食物从100微米大小的幼虫吨O 300/400微米的成鱼）或活的食物（丰年虾）。丰年虾（ 卤虫 ）卵可从当地的宠物商店，可以在实验室中孵化以下简单的步骤如下所述。 溶解红海盐老年水置于烧杯中，与更好的溶解度在磁力搅拌器上的盐。另外，盐可以溶解在水中，通过与曝气管曝气。即时海洋盐也可使用作为孵化的解决方案，如果不可用食用盐红色的海洋。丰年虾可以容忍宽范围的盐度，但是，我们在30-35克/ L红色的海洋咸水孵化的丰年虾（10-15克）。注：如果没有现成的丰年虾卵，然后再封装盐水虾“的去”前分批将它们添加到虾孵化场，也可用于后在当地的宠物商店。这也可能避免频繁旅行的宠物商店。 填写丰年虾孵化器与一个公升水和1.2汤匙/升的浓度添加的虾卵。大力通气的孵化器，空气泵和离开丰年虾卵孵化〜48小时。 注意：应该注意的是，未增浓盐水虾失去营养价值每隔一小时孵化后。因此，它可能是适合要么舱口超过24小时或丰富超过48小时，以便获得最大的营养价值从盐水虾。 从孵化系统的废水中加入含漂白剂的消毒和设置稍后检疫废物。 要收集丰年虾，清除管道中的空气，让文化为4-5分钟解决，但不超过10分钟。孵化丰年虾聚集在底部的孵化器。 收集丰年虾的孵化器的底部使用自来水。其中包括未孵化的丰年虾卵的初始流量丢弃。 <l我后丢弃的未孵化的丰年虾，收集孵化丰年虾将被用来作为斑马鱼的食物。 分开的盐水虾，咸的水，用盐水虾收藏网（〜350微米的尼龙网）。冲洗盐水虾从网系统的水容器使用。 将收集的盐水洗涤虾一般存在于高浓度的底部的容器，给它一个相当橙色。 饲料的盐水洗涤虾到斑马鱼使用吸移管或滴管/ squeezy的瓶。分配的食物的量取决于个人坦克的人口规模。斑马鱼是普遍接受的比率在每天的食物中获得4％的体重。斑马鱼千万不要吃得太多，因为这可能会增加在水中的硝酸盐含量，可能会影响其繁殖，活力，有些鱼可能是由于饮食过量而死亡。 当注入的食物进入水，饥饿的鱼游，赶上丰年虾。 干喂养可利用的水生生态系统的/水生生境简单的基于Spring的鱼食分配器。另外，干燥的进料也可以使用一个简单的勺子来执行，或通过切割塑料滴管斜用剪刀给它的外观的一小汤匙。 3。选育斑马鱼开始繁育开始时的光。受精卵可通过在水箱养殖或成对繁殖。虽然在水箱养殖是更多的劳动效率，并定期的胚胎收集在我们的实验室实施基因或突变时，最好是从鱼个体进行筛选，配对繁殖。 在水箱养殖，聚集在坦克饲养员和缓慢下降到鱼缸发病后的光。此外，在水箱养殖设置可以在鱼缸放置过夜。 ł屋檐坦克种鸡约15分钟，让鱼交配，然后删除，饲养员从水箱和收集鸡蛋。 配对繁殖通常在下午晚些时候喂奶后。 组装养殖池，并填写账龄系统的水。 一名女性和一名男性转移到养殖池的两侧。女性可以区别于男性，因为其更大的下腹部。男性也可以从女性的区别，因为他们更修长，颜色较深高于女性。此外，男性在臀鳍有黄色着色相比，女性（参见图1）。当疑问，寻找产卵的雌性斑马鱼（ 见图4）。 卸下分频器第二天早晨在发病后不久的光。允许交配发生静置20分钟或直到足够数量的胚胎在水箱底部铺设。 繁殖季结束后，鱼返回到他们的坦克。使用过滤器收集的鸡蛋。 系统的水彻底洗净胚胎。 将胚胎转移到陪替氏培养皿KH 2漂洗过滤器与胚胎介质;又名EM3氯化钠（NaCl，13.7毫摩尔;氯化钾，0.54毫摩尔，用MgSO 4，1.0mM的的CaCl 2，1.3毫摩尔的Na 2 HPO 4，0.025毫摩尔; 0.044毫米; PO 4，碳酸氢钠 ，4.2毫米）。 胚胎可以在显微镜下观察。受精卵，然后分离从用一个针头和一个移液管（参见图3）的未受精的卵。 4。提高幼虫受精卵保持的培养箱中（〜28.5℃）下72小时，直至孵出幼虫。 现在的幼虫是的绒毛膜和游泳的自由，他们准备转移到一个主要鱼缸。幼虫需要从5天受精后（dpf）的馈送，并保持在胚胎培养基（组合物中所述第3部分，10）或系统的水。幼虫可保持在第二轮的菜肴〜50％或更多的水其中每天改变。水改应包括去除死亡或患病的幼虫和任何其他碎片。 轻轻的幼虫转移到坦克，包含一个小型挡板（300-400微米）。应除去死亡和患病的幼虫，每天几毫升的水应缓慢加入。 14天之后，幼虫坦克可以被搁置到系统中，并附带一条小溪的循环水（每秒1-2滴）。在幼虫生长，水流量可以增加。不同尺寸的挡板，可以根据使用上的幼虫的大小（ 例如，挡板尺寸300-400，500，700-750，和1000微米）和一个正常的塑料挡板应用于成人鱼类。 它通常需要3个月的胚胎发育到性成熟的成年。