Summary

Determinação rápida do limiar térmico nociceptivo em ratos diabéticos

Published: May 17, 2012
doi:

Summary

Aqui, nós descrevemos um procedimento rápido, simples e confiável para determinar a menor temperatura em que ratos ou camundongos mostram comportamento nocifensive,<em> Ou seja,</em> O<em> Limiar térmico nociceptivo</em> (TNT). Este método aplica-se um estímulo aumentando lentamente térmica permitindo estimativa precisa e reprodutível de TNTs com mínima, se alguma, o stress para os animais.

Abstract

Neuropatia diabética dolorosa (PDN) é caracterizada por hiperalgesia isto é, aumento da sensibilidade à estímulo nocivo, e isto é alodinia, hipersensibilidade a estímulos inócuos normalmente 1. Hiperalgesia e alodinia têm sido estudados em muitos modelos de roedores diferentes de diabetes mellitus 2. No entanto, como afirma Bölcskei et al, a determinação de "dor" em modelos animais é um desafio devido à sua natureza subjetiva 3. Além disso, os métodos tradicionais utilizados para determinar as respostas comportamentais a estímulos térmicos nocivos geralmente não possuem reprodutibilidade e 3 sensibilidade farmacológica. Por exemplo, usando o método de placa quente de Ankier 4, recuar, retirada e / ou lamber de qualquer posterior e / ou fore-patas é quantificada como latências do reflexo na elevada e constante estímulos térmicos (52-55 ° C). No entanto, os animais que são de hiperalgesia ao estímulo térmico não reproduzível mostrar diferenças em relatências Flex usando essas temperaturas supra-limiar de 3,5. Como o método descrito recentemente de Bölcskei et al. 6, os processos descritos aqui permite a determinação rápida, sensível e reprodutível de térmicas limiares nociceptivos (TNTs) em ratinhos e ratos. O método utiliza a aumentar lentamente estímulo térmico aplicado principalmente para a pele de rato / rato superfície plantar. O método é particularmente sensível a estudar anti-nocicepção durante estados de hiperalgesia tais como PDN. Os procedimentos descritos abaixo são baseados em os publicados em detalhe por Almasi et al 5 e et al Bölcskei 3. Os procedimentos descritos aqui foram aprovados o Animal Care Laboratório e do Comitê de Uso (LACUC), Wright State University.

Protocol

TNTs de ratinhos e ratos são determinados usando o incrementais placa quente analgesia metros [iHPAM, Inc. IITC Life Science (Woodland Hills, CA)]. O equipamento consiste em vários componentes: uma placa de alumínio (10 x 20 cm) com o sistema de aquecimento por baixo e uma câmara de observação Plexiglas acima; uma unidade de calor controlar, o software de aquisição de dados (IITC Série Parte # suave 8), um PC (pessoal computador) e um pedal de partida remota, parar ou reiniciar o controle da unidade. O sistema …

Discussion

Da mesma forma que no teste da placa quente clássico para quantificar hiperalgesia térmica 4,13, o teste de nocicepção descrito aqui permite uma forma rápida e confiável para quantificar o comportamento nocifensive em ratos e camundongos. No entanto, ao contrário do teste clássico, o método de placa quente incremental é não-invasiva e praticamente livre de estresse. Embora alguns conter é necessário para realizar o teste (ie, o animal deve estar na câmara de observação), ratazanas ou …

Divulgaciones

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Este trabalho foi financiado pela American Diabetes Association (ADA), Grant JF1-10-14 (MDiF). Gostaríamos de agradecer o pessoal do Laboratório de Recursos Animais em WSU. Os autores agradecem a assistência com a análise estatística dos dados de Neil Paton, Ph.D.

Materials

Name Company Catalogue number
Incremental Hot-Plate Analgesia Meter IITC Inc. Life Science Part #PE34
Soft Series 8 IITC Inc. Life Science Part # Series8
Streptozotocin Calbiochem 572201

Referencias

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Citar este artículo
Alshahrani, S., Fernandez-Conti, F., Araujo, A., DiFulvio, M. Rapid Determination of the Thermal Nociceptive Threshold in Diabetic Rats. J. Vis. Exp. (63), e3785, doi:10.3791/3785 (2012).

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