Summary

당뇨병 쥐의 열전달 Nociceptive 본부 신속한 결정

Published: May 17, 2012
doi:

Summary

여기서는, 쥐가이나 쥐가 nocifensive 동작 표시되는 최저 온도를 결정하는 빠른 안정적이고 간단한 절차를 설명<em> 즉</em><em> 열 nociceptive 임계값</em> (TNT). 어떤 경우에이 방법은 동물, 스트레스를 최소로 TNTs의 정확하고 재현성 평가있게 천천히 증가 열 자극을 적용합니다.

Abstract

고통스런 당뇨병의 신경 장해 (PDN)는 hyperalgesia 즉, 유해 자극에 대한 민감성 증가, 그리고 allodynia 즉, 일반적으로 무해한 자극에 1 ~ 과민성이 특징입니다. Hyperalgesia와 allodynia은 당뇨병 2의 다양한 설치류 모델에서 공부했습니다. 그러나, 같은 Bölcskei 외, 동물 모델에서 "고통"의 결정에 의해 명시하는 것은 그것의 주관적 성격 3 ~ 인해 도전한다. 또한, 유해 열 자극에 대한 행동 반응을 결정하는 데 사용되는 전통적인 방법은 일반적으로 재현성과 pharmacological 감도 3 부족합니다. 예를 들어, Ankier 4의 핫 플레이트 메서드를 사용하여, 움찔, 금단 증상 및 / 또는 두 뒷다리와 / 또는 이물-발냄새 핥아는 일정한 높은 온도 자극 (52-55 ° C)에서 반사 대기 시간으로 계량합니다. 그러나, 열 자극에 hyperalgesic있는 동물 reproducibly 재의 차이를 표시하지 않습니다그 위에 – 임계 온도 3,5를 사용하는 플렉스 대기. Bölcskei 외. 6 최근에 설명한 방법으로, 여기에 설명된 절차는 생쥐와 쥐에서 열 nociceptive 임계값의 신속한 민감하고 재현성 결정 (TNTs)에 있습니다. 방법은 마우스 / 쥐 발바닥 표면의 피부에 주로 적용 서서히 증가하고 열 자극을 사용합니다. 방법은 같은 PDN 같은 hyperalgesic 주들 중에 안티 nociception를 공부할 특히 민감합니다. 우는 설명한 절차 Almási 5 Bölcskei 3 자세하게 출판 것들을 기반으로합니다. 절차는 실험실 동물 관리 및 사용위원회 (LACUC), 라이트 주립 대학의 승인되었습니다 여기에 설명했다.

Protocol

생쥐와 쥐의 TNTs은 사용에 의해 결정되는 증분 핫 플레이트 무통 m [iHPAM, IITC 주식 회사 생명 과학 (우드랜드 힐스, 캘리포니아)]. ; 데이터 수집을위한 열 조절 장치, 소프트웨어 (IITC 파트 # 소프트 시리즈 8), PC (개인용 밑에 난방 시스템 이상 플렉시 글라스 관측 챔버와 알루미늄 판 (10 × 20cm) : 장비는 여러 구성 요소로 구성되어 컴퓨터)와 footswitch 원격 출발, 중지 또는 장치의 제어를 재설정하십시…

Discussion

마찬가지로 열 hyperalgesia 4,13를 정할 클래식 핫 플레이트 테스트로 nociception의 분석은 여기에서 설명한 쥐 및 생쥐의 nocifensive 행동을 계량하기위한 빠르고 안정적인 방법을 허용합니다. 그러나 고전 검사와는 반대로, 증분 핫 플레이트 방식은 비침습와 거의 스트레스는 무료입니다. 구속 일부가 (즉, 동물 관찰 실에 있어야합니다) 테스트를 수행할 필요가 있지만, 쥐 또는 생쥐가 유…

Divulgaciones

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

이 작품은 미국 당뇨병 협회 (ADA), 그랜트 JF1-10-14 (MDiF)에 의해 재정 지원되었다. 우리는 WSU에서 동물 자원 연구소의 인원을 감사드립니다. 저자는 기꺼이 그 닐 Paton 박사로부터 데이터의 통계 분석에 도움을 인정

Materials

Name Company Catalogue number
Incremental Hot-Plate Analgesia Meter IITC Inc. Life Science Part #PE34
Soft Series 8 IITC Inc. Life Science Part # Series8
Streptozotocin Calbiochem 572201

Referencias

  1. Baron, R. Peripheral neuropathic pain: From mechanisms to symptoms. Clin. J. Pain. 16, S12-S20 (2000).
  2. Calcutt, N. A., Jorge, M. C., Yaksh, T. L., Chaplan, S. R. Tactile allodynia and formalin hyperalgesia in streptozotocin-diabetic rats: Effects of insulin, aldose reductase inhibition and lidocaine. Pain. 68, 293-299 (1996).
  3. Bolcskei, K., Petho, G., Szolcsanyi, J. Noxious heat threshold measured with slowly increasing temperatures: Novel rat thermal hyperalgesia models. Methods Mol. Biol. 617, 57-66 (2010).
  4. Ankier, S. I. New hot plate tests to quantify antinociceptive and narcotic antagonist activities. Eur. J. Pharmacol. 27, 1-4 (1974).
  5. Almasi, R., Petho, G., Bolcskei, K., Szolcsanyi, J. Effect of resiniferatoxin on the noxious heat threshold temperature in the rat: A novel heat allodynia model sensitive to analgesics. Br. J. Pharmacol. 139, 49-58 (2003).
  6. Bolcskei, K., Horvath, D., Szolcsanyi, J., Petho, G. Heat injury-induced drop of the noxious heat threshold measured with an increasing-temperature water bath: A novel rat thermal hyperalgesia model. Eur. J. Pharmacol. 564, 80-87 (2007).
  7. Chesler, E. J., Wilson, S. G., Lariviere, W. R., Rodriguez-Zas, S. L., Mogil, J. S. Identification and ranking of genetic and laboratory environment factors influencing a behavioral trait, thermal nociception, via computational analysis of a large data archive. Neurosci. Biobehav. Rev. 26, 907-923 (2002).
  8. Langford, D. J., Crager, S. E., Shehzad, Z., Smith, S. B., Sotocinal, S. G., Levenstadt, J. S., Chanda, M. L., Levitin, D. J., Mogil, J. S. Social modulation of pain as evidence for empathy in mice. Science. 312, 1967-1970 (2006).
  9. Hunt, S. P., Koltzenburg, M. . The neurobiology of pain. , (2005).
  10. Willis, W. D. . The pain system : The neural basis of nociceptive transmission in the mammalian nervous system. , (1985).
  11. Calcutt, N. . Modeling diabetic sensory neuropathy in rats. In: Methods in molecular medicine. Pain research: Methods and protocols. , (2004).
  12. Bars, D. L. e., Gozariu, M., Cadden, S. W. Animal models of nociception. Pharmacol. Rev. 53, 597-652 (2001).
  13. Shaikh, A. S., Somani, R. S. Animal models and biomarkers of neuropathy in diabetic rodents. Indian J. Pharmacol. 42, 129-134 (2010).
  14. Hargreaves, K., Dubner, R., Brown, F., Flores, C., Joris, J. A new and sensitive method for measuring thermal nociception in cutaneous hyperalgesia. Pain. 32, 77-88 (1988).
  15. Hardy, J. D. Method for the rapid measurement of skin temperature during exposure to intense thermal radiation. J. Appl. Physiol. 5, 559-566 (1953).
  16. Sumino, R., Dubner, R., Starkman, S. Responses of small myelinated &quot;warm&quot; fibers to noxious heat stimuli applied to the monkey’s face. Brain Res. 62, 260-263 (1973).
  17. Hammond, D. L., Ruda, M. A. Developmental alterations in thermal nociceptive threshold and the distribution of immunoreactive calcitonin gene-related peptide and substance p after neonatal administration of capsaicin in the rat. Neurosci. Lett. 97, 57-62 (1989).

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Alshahrani, S., Fernandez-Conti, F., Araujo, A., DiFulvio, M. Rapid Determination of the Thermal Nociceptive Threshold in Diabetic Rats. J. Vis. Exp. (63), e3785, doi:10.3791/3785 (2012).

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