血液サンプリング、医薬品の管理と意識血圧および心拍数測定のための大腿動脈および静脈カテーテル

1。前に外科手術を開始 注：前にあなたの機関/組織を介して適切な許可を取得していることを保証するあらゆる動物の手順を開始する。すべての生存の手術と同様に、手術は無菌条件下で行われ、必要に応じて適切な鎮痛薬と抗生物質がある成果のために使用されていることを確認します。 前にカテーテルの手順を開始する彼らは特許であることを確認するために滅菌生理食塩水でそれらをフラッシュすることによりカテーテルを評価する。 ラットを麻酔。 外科手術のためにラットを準備します。 首の後ろ（肩甲骨の間）と内側下腿部を含む外科の領域、から毛皮を剃る。 それぞれBetadineと70％エタノールのスクラブを使用して、センターで開始し、円形のスイープの外側を作る剃ら外科領域をスクラブ。繰り返します各地域のこの3回、70％エタノールで最終的な洗浄と仕上げ。 外科の分野にわたって無菌面と場所滅菌ドレープで動物を置きます。 （プレスの- n -シールの使用は、調査員が手順を通して動物を監視することが理想的な手術の立体裁断です。） 外科手術のためのすべての手術器具が滅菌されていることを確認します。 2。カテーテル留置のための外科領域の準備 （その胃上）が発生しやすく敷設ラットで、ハサミやメスで肩甲骨のレベルでの首の後ろに約½インチ（12 mm）、横切開し、最後の皮下"ポケット"を解剖鈍らせるバック約4分の1の大きさ。これは、すなわちそのカテーテルがオンに引っ張らので、それが場所だった動脈から削除されていないこと、動物の成長および/または動きを補償するチューブの少量を配置する領域として使用されます。Dインチ（あるいはこのステップは、前にカテーテルをトンネリングするために直ちに実行することができます。） そのバック（仰臥位）にラットを置き、後肢の自然な角度に沿って鼠径部[おおよその½インチ（12 mm）切開の切開を行います。 （通常は45度の角度であなたの鈍先端がはさみ及び/または綿棒を保持することによってこれを簡単にローカライズを保証する（鈍チップはさみ、止血、綿棒などを使用することができます）、結合組織（図1）を分離するために解剖鈍らせるの大腿動脈と静脈までの関心領域）が公開されています。 静脈は暗赤色で、動脈がより明確と静脈より明るいです。動脈に沿って実行される神経は、口調で白っぽいです。 catheteの小さなセクションを配置するための脚の内側に沿って皮膚の下にある小さなオープン領域（すなわちポケット、四半期の約サイズ）を作るために下腿部に解剖鈍らせるrは（再びアカウントの動物の動きを考慮し、慢性的な配置であれば、動物の成長に）。 あなたが完全に動脈と静脈を表示できるように、切開領域に開創器を置きます。 ファインチップを使用すると、静かに動脈と静脈から大腿動脈に沿って神経を（色で白っぽい）を分離鉗子。 （図2）神経を切断または損傷しないように注意してください。 動脈/静脈の約¼インチ（5-7 mm）の長さのセクションを公開しようと、1つのユニットとして動脈と静脈を区切ります。 動脈から静脈を分離するプロセスを繰り返します。容器にあなたの外科用器具（すなわち細かい先端の鉗子）垂直を維持し、並行して血管を分離する。これは、血管を刺したり、損傷、断裂回避に役立ちます。下から動脈と静脈の間に静かに先端の細い鉗子を置き、徐々に鉗子を開き、これを繰り返すことで、あなたは徐々に血管を分離します。注：いくつかの涙や観察しなければ出血が停止するまで滅菌綿棒および/または2 × 2ガーゼや地域での場所の圧力を使用して出血すると、その後手術を続行。 3。カテーテルをトンネリング場所滅菌生理食塩水は、切開を介して2 × 2ガーゼを浸し、その胃に動物を入れてください。 以前に作られたと腰のレベルに戻ってダウン皮下鉗子を導く[止血のヒントを確保した背面の切開にロチェスターペアン鉗子を（長いストレートピンセット）に置かないで背骨に向かって（、アップ指摘されている）脊髄を負傷しないように]。約で股関節部には下腿部に作られた切開に向かって止血鉗子の先端を回して、準備脚切開から止血の先端を押してください。 静かにピンセットでカテーテル（ ではない動脈/静脈に挿入される端）の端を持ち、ゆっくりと作られた空洞を介してカテーテルを引き抜きますそして最終的に首の切開から。 ヘパリン/食塩水で（に気泡がないことを確認する）それぞれのカテーテルの先端に20 U / mlのヘパリン/食塩水を充填し、カテーテルを埋める適切な平滑化 – 先端の針の注射器を置きます。もう一度カテーテルは特許であり、損傷がカテーテルに来ていないことを確認してください。空気がカテーテルラインに入ると、再びそのバックにラットをオンにすることができるどうかを確認するため、カテーテルの行の末尾に添付された注射器にしておきます。 4。大腿静脈と動脈にカテーテルを挿入すると（図3） 大腿静脈の下で無菌の4.0シルク/スレッドの折り返し部分を配置し、折り返し端にシルクをカット。今静脈下の絹の2つが存在します。または代わりに、個々に静脈の下に4.0絹の2個を置きます。 あなたが静脈の下に置か絹、片方の足に向かってピース（遠位端）と身体に向かって他のを区切ります。 Tその後、小さな止血を使用して、身体に最も近い側に緩やかな合字、すなわち、絹をつかんで教えプルが結び目をきつく締めることはありません。脚部（遠位端）に向かって可能な限り絹の他の部分を引っ張るとトリプルノットにこれを結ぶ、小さな止血とシルクをつかんで教え引き出します。このメソッドは、簡単にカテーテルを（ステップ4）を挿入するために必要な切開をすること、静脈が血液でいっぱいにできるようになります。 静脈にリドカインの1〜2滴を置きます。 ヴァンナミクロ解剖ハサミを使用して、約¼を通じて、45度の角度で静脈に小さな切開を行います。 切開と鉗子の別のペアを使用してに先の細いピンセット（45鉗子を）置き、慎重に静脈カテーテルにフィード。これは、研究者が優しく鉗子の下や静脈に静脈カテーテルを置くことを可能にするように優しく、静脈内に配置される鉗子を開きます。 カテーテルが完全に挿入されている場合（適切X. 6-7センチ）（カテーテルマークはカテーテルが完全に挿入されたときに識別するのに外科医を支援するためにカテーテル上に配置されを行うとき）（この場所腹部大静脈の静脈カテーテル）は、静脈の周囲に前方合字を締めますトリプル結び目を結ぶとカテーテル、（それが静脈を閉塞されていないことを確認）。再びカテーテル（トリプルノット）を確保し、配置を確保するための足の近くに絹の縫合糸（後部合字）を使用してください。縫合糸の結び目がきつすぎるとカテーテルが機能していることではないことを保証するために役立つカテーテル、内の目に見える少し血があるまでゆっくりと注射器を引く。血液がカテーテルに表示されなくなるまでチェックをした後、プランジャーを押し下げる。 注：必要に応じて大腿静脈に2カテーテルを挿入することが可能です。 次の例外を除いて大腿動脈カテーテルを配置する手順9-13を繰り返します。 トリプル結び目と足（後方）に最も近いシルクのネクタイとタウを引くカテーテル留置のための切開を行う前に、ボディ（前部）の近くに緩い結紮を結ぶ前にGHT。これは、動脈は、血液はそれが簡単カットすることでいっぱいにできるようになります。近位縫合が動脈を切断する前に動脈を閉塞するために教えて引っ張られていることを確認します。これは、カットが行われている血液の損失を避けることができます。 動脈カテーテルを挿入する大腿動脈から約5cm（これは腹部大動脈にカテーテルを配置）。 縫合糸でカテーテルを固定する場合、縫合がきつすぎるとカテーテルを閉塞していないことを確認してください。 5。ラップアップ外科足の内側にカテーテル及び場所（ループが鈍いが、以前の解剖した領域に収まるようにしてください）​​の四半期サイズのループにダイムを行います。両方のカテーテルを配置した後、筋層に5.0手術用縫合糸の1〜2糸で固定します。 非連続suturで4.0 Ethilonで切開を閉じてES。 その胃の上にラットを回し、バックで解剖ポケットの四半期と場所の大きさ約カテーテルの別のループを作る。縫合糸で切開を閉じます。 vetbondのドロップを使用して、バックにカテーテルを固定します。 パッド入りの止血と背面切開の近くにカテーテルをクランプし、末端からシリンジを取り外します。 テザータイプのジャケットとラットを合わせ、カテーテルを（ヘパリンロックを維持するために）キャップ、パッド入りの止血を取り外します。 – 長期的なメンテナンスは20 U / mlのヘパリン/食塩水でカテーテル生理食塩水を交換してください。 6。カテーテルの維持管理（滅菌手袋が手続き中に着用してください） パッド入りのピンセットでカテーテルをクランプする。 カテーテルのプラグを取り外します。 カテーテル上にロック溶液と鈍先端が注射器を置きます。 鉗子をアンクランプ。 ロック溶液でカテーテルを埋める（ボリュームはプリdeteですrmined – 通常0.3 ml）を。 カテーテルの先端に血の任意の逆流を防止し、シリンジを削除するには、フラッシュ中にカテーテルをクランプする。 カテーテルのプラグを交換してください。 鉗子をアンクランプし、優しくも血液がカテーテルの先端にあることを確認するため、若干のプラグを押し込みます。 7。採血（滅菌手袋が手続き中に着用してください） パッド入りのピンセットでカテーテルをクランプする。 カテーテルのプラグを取り外します。 徐々に鈍い先端が注射器と廃棄を使用してロックのソリューションを撤回。 カテーテルにサンプリングシリンジを取り付け、ゆっくりとサンプルを撤回する。 パッド入りのピンセットでカテーテルをクランプし、ロック溶液で注射器を置いてカテーテル上およびロック溶液でカテーテルを再入力してください。 溶液をカテーテルを再充填しながらカテーテルをクランプする。 カテーテルのプラグを再挿入。 パッド入りの鉗子を外し、ゆっくりとtを押す彼は少しさらに差し込みます。 8。薬剤注入パッド入りのピンセットでカテーテルをクランプする。 カテーテルのプラグを取り外します。 徐々に鈍い先端が注射器と廃棄を使用してロックのソリューションを撤回。 カテーテルへの薬剤充填したシリンジを接続し、動物に物質を注入する。 複数の注射が必要な場合は、1つは、このように動物に少ない流体注入を必要とする、3方活栓だけでなく、中間を使用することができます。 一つは、連続注入用の滅菌フィルターで持続注入シリンジポンプを接続することができます。 パッド入りの鉗子でクランプし、ロック溶液で注射器を置いてカテーテル上およびロック溶液でカテーテルを再入力してください。 溶液をカテーテルを再充填しながらカテーテルをクランプする。 カテーテルのプラグを再挿入。 パッド入りの鉗子を外し、ゆっくりと少しさらに、プラグインを押してください。 E"> 9。血圧および心拍数のサンプリングパッド入りの鉗子で動脈カテーテルをクランプし、カテーテルのプラグを取り外します。 圧力変換器に動脈ラインを取り付けます。 血圧のコレクションのためにソフトウェアを使用するための製造の指示に従ってください。 血圧の監視期間の終了時に、パディングされた鉗子を使用すると、カテーテルをクランプし、トランスデューサーから切り離します。 ロック溶液でカテーテルをフラッシュし、上記のようなカテーテルのプラグを交換してください。 10。代表的な結果代表的な血圧の測定は、意識を自由に移動する動物から採取し、図4に示す。同時に大腿動脈ラインからの血圧を測定しながら、フェニレフリン（3 UG / kgの静脈内）、α1アドレナリン受容体アゴニストは、血圧を高めるために大腿静脈ラインに投与した。フェントラミン（4 mg / kgを、iv）は、非選択的α-アドレナリン受容体拮抗薬は、その後、血圧を下げるために投与した。 図1組織の鈍的切開。背中にはラットを使用すると、後肢の角度が約½インチ（12 mm）切開を行い、鈍ハサミや止血を使用するには、大腿動脈と静脈を露出するために結合組織を解剖鈍らされることになります。 図2。大腿動脈と結合組織から静脈の分離。 図3。カテーテルの配置。ヴァンナを用いた微小解剖ハサミは45度の角度（上）で血管を介しての方法の¼約小さな切開を置き、目に先の細いピンセットを置くeの切開や鉗子の別のペアを使用しては、容器（真ん中）にカテーテルを養う。最後に、カテーテルの配置の完了時に場所（底部）にカテーテルを縫合。 図4に配慮した自由に動く動物から採取した代表的な血圧測定。