Femorale arteriële en veneuze catheterisatie voor bloedafname, Drug Administration en bewust Bloeddruk en hartslag metingen

1. Vóór de start van chirurgische procedure Let op: Voordat u begint met een dier procedures zorgen ervoor dat u over de juiste machtiging via uw instelling / organisatie verkregen. Zoals bij alle operaties overleven, zorg ervoor dat de operatie wordt uitgevoerd onder steriele omstandigheden en de juiste pijnmedicatie en moest antibiotica worden gebruikt voor een succesvol resultaat. Voorafgaand aan het begin van de catheterisatie procedure te evalueren van de katheters door spoelen ze met steriele zoutoplossing te zorgen dat ze zijn patent. Verdoven van de rat. Bereid de rat voor de chirurgische ingreep. Shave het bont van de chirurgische regio's, die de achterkant van de nek (tussen de schouderbladen) en de binnenpoot regio zijn. Met behulp van Betadine en een 70% ethanol scrub respectievelijk scrub de geschoren chirurgische regio's beginnen in het centrum en het maken van een cirkelvormige zwaai naar buiten. Herhalendit 3 keer voor elke regio, eindigend met een definitieve reiniging met 70% ethanol. Leg het dier op een steriele ondergrond en plaats steriel laken boven chirurgische gebieden. (Het gebruik van Press-n-Seal is een ideale chirurgische draperen zodat de onderzoeker om het dier te controleren tijdens de gehele procedure.) Zorg ervoor dat alle chirurgische instrumenten voor de chirurgische procedure zijn gesteriliseerd. 2. Voorbereiding van de Chirurgische Gebieden voor katheter Met de rat leggen gevoelig (op de buik), maken ongeveer een ½ inch (12 mm) horizontale incisie aan de achterkant van de nek op het niveau van de schouderbladen met een schaar of een scalpel, dan stomp ontleden een onderhuidse "pocket" in de achterkant ongeveer de grootte van een kwartaal. Deze zal gebruikt worden als een gebied om een ​​kleine hoeveelheid van de buis dat zal compenseren voor groei van de dieren en / of beweging plaats, dat wil zeggen, zodat de katheter niet wordt aangetrokken en dus verwijderd van de slagader was plaatsd inch (Alternatief deze stap kan onmiddellijk worden uitgevoerd voorafgaand aan de ondertunneling van de katheter.) Plaats de rat op zijn rug (rugligging) en maak een incisie in de lies regio [ongeveer ½ inch (12 mm) incisie langs de natuurlijke hoek van de achterpoot. Blunt ontleden om het bindweefsel (Figuur 1) apart (kunt gebruik maken van bot-tip schaar, hemostats, wattenstaafjes, etc.) (meestal door je botte getipt schaar en / of wattenstaafje in een hoek van 45 graden zorgt dit des te gemakkelijker lokalisatie van de regio van belang) tot aan de femorale slagader en ader worden blootgesteld. De ader is donkerrood van kleur en de slagader is duidelijker en helderder dan de ader. De zenuw die loopt langs de slagader is witachtig van toon. Blunt ontleden in het been regio om een ​​kleine open regio onder de huid (dat wil zeggen pocket, ongeveer de grootte van een kwart) te maken langs de binnenkant van het been voor de plaatsing van een klein deel van de catheter (wederom rekening te houden met het verkeer van dieren en de groei van het dier, indien chronisch plaatsing). Plaats de oprolmechanismen in de incisie gebied zodat u zich volledig kunt bekijken van de slagader en ader. Met behulp van fijne punt tang voorzichtig los van de zenuw (witachtig van kleur), dat is langs de femorale slagader uit de buurt van de slagader en ader. (Figuur 2) Wees voorzichtig om niet snijden of beschadiging van de zenuw. Scheid de slagader en ader als een eenheid, in een poging tot een ongeveer ¼ inch (5-7 mm) lengte deel van de slagader / ader bloot te leggen. Herhaal het proces in het scheiden van de ader van de slagader. Houd uw chirurgische instrumenten (bijv. fijne punt tang) loodrecht op de schepen en scheid de schepen in parallel. Dit helpt bij het voorkomen van scheuren, prikken of beschadiging van de schepen. Door het plaatsen van de fijne tip pincet voorzichtig tussen de slagader en ader van onderen en langzaam openen van de tang en het herhalen van dit, zal je langzaam los van de schepen. Let op: als je scheuren of waarnemen watbloeden gebruik maken van een steriel wattenstaafje en / of 2 x 2 gaas en plaats de druk op het gebied tot het bloeden is gestopt, ga dan verder met de operatie. 3. De ondertunneling van de katheter Plaats een steriele zoutoplossing geweekt 2 x 2 gaasje op de incisie en draai het dier aan zijn maag. Plaats de Rochester Pean pincet (lange rechte pincet) in de incisie aan de achterkant die eerder werd gemaakt en begeleiden de tang subcutaan op de rug op het niveau van de heupen [zorgen voor de uiteinden van de hemostats zijn puntige up, niet (in de richting van de wervelkolom ) om te voorkomen dat verwonden het ruggenmerg]. Op ongeveer de heup draai de hemostaat de punt naar de incisie die werd gemaakt in het been regio en druk op de top van de hemostats uit van de bereide been incisie. Voorzichtig te vatten aan het einde van de katheters (niet het einde dat zal worden ingebracht in de slagader / ader) met de tang en voorzichtig de katheters te trekken door middel van de holte die is gemaakten uiteindelijk de nek incisie. Plaats de juiste afgestompte-tip naald spuit gevuld met 20 U / ml heparine / zoutoplossing aan het eind van de respectievelijke katheters en vul de katheters (ervoor zorgen dat er geen luchtbellen) met de gehepariniseerde / zoutoplossing. Opnieuw te controleren of de katheters zijn patent en geen schade is gekomen om de katheters. Laat de spuiten aan het einde van de katheter lijnen om ervoor te zorgen geen lucht kan krijgen in de katheter lijnen en de rat weer op zijn rug weer. 4. Het inbrengen van de katheter in de lies en de arterie (figuur 3) Leg een opgevouwen stuk van steriele 4,0 zijde / draad onder de femorale ader en snijd de zijde aan het gevouwen einde. Er zullen nu twee stukken zijde onder de ader. Of anders 2 stuks van 4,0 zijde individueel plaats onder de ader. Scheid de zijde die je onder de ader, een stuk naar het been (distale einde) en de andere naar het lichaam. Tdat wil zeggen een losse ligatuur aan de kant het dichtst bij het lichaam, dan met behulp van kleine hemostats, pak de zijden en trek onderwezen, maar niet draai de knoop. Trek het andere stuk van de zijde zo ver mogelijk naar het been (distale uiteinde) en bind dit in een driedubbele knoop, pak de zijde met kleine hemostats en trek onderwezen. Deze methode zal toelaten de ader te vullen met bloed, waardoor het makkelijker om de de incisie die nodig is voor het inbrengen van de katheter (stap 4) te maken. Plaats 1-2 druppels van lidocaïne op de ader. Met behulp van de Vanna micro-ontleden schaar, ongeveer een kleine incisie in de ader ¼ door en in een hoek van 45 graden. Plaats fijne punt pincet (45 pincet) in de incisie en met behulp van een ander paar pincetten, dus wees voer in de ader katheter. Open voorzichtig de tang die zijn geplaatst in de ader, omdat dit zal de onderzoeker om de veneuze katheter voorzichtig plaats onder de tang en in de ader. Wanneer de katheter volledig is ingebracht (passendex. 6-7 cm) (bij het maken van de katheter een merk is geplaatst op de katheter aan de chirurg helpen bij het identificeren wanneer de katheter volledig is geplaatst) (dit plaatst de veneuze katheter in de buik vena cava) en zet de voorste ligatuur rond de ader en katheter, binden een driedubbele knoop (zorgen dat het niet is de ader afsluitende). Gebruik maken van de zijden hechtdraad in de buurt van het been (achterste ligatuur) weer veilig de katheter (triple knoop) en plaatsing te verzekeren. Langzaam trekken terug de spuit totdat er een beetje bloed zichtbaar is in de katheter, die helpt om ervoor te zorgen dat de hechtdraad knopen niet te strak is en dat de katheter is functioneel. Na controle op de zuiger totdat het bloed niet meer zichtbaar is in de katheter. Let op: het is mogelijk om twee katheters in te voegen in de lies, indien nodig. Herhaal de stappen 9-13 om een ​​arteria femoralis katheter te plaatsen met de volgende uitzonderingen: Bind de zijde het dichtst bij het been (achterste) met een drievoudige knoop en trek taught voor de binding van de losse ligatuur nabij het lichaam (voorste) voorafgaand aan het maken van de incisie van de katheter plaatsing. Hierdoor kan de slagader te vullen met bloed waardoor het makkelijker te snijden. Zorg ervoor dat de proximale hechtdraad wordt getrokken geleerd om de slagader af te sluiten voorafgaand aan het snijden van de slagader. Hierdoor wordt voorkomen dat het bloed verlies wanneer de snede wordt gemaakt. Plaats de arteriële katheter ongeveer 5 cm van de arteria femoralis (dit plaatst de catheter in de abdominale aorta). Bij de beveiliging van de katheter met de hechting, zorg ervoor dat de hechting is niet te strak en afsluitende de katheter. 5. Chirurgische Wrap-up Maak een dubbeltje tot kwartaal grote lus in de katheters en plaats aan de binnenkant van het been (de lus moet passen in het gebied dat was eerder bot ontleed). Na het plaatsen van beide katheters, maak ze met 1-2 steken van 5,0 chirurgische hechtdraad in de spier laag. Sluit de incisie met 4,0 Ethilon met niet-continue sutures. Draai de rat op zijn maag en maak een andere lus in de katheters over de grootte van een kwart en plaats in de pocket ontleed in de rug. Sluit de incisie met hechtdraad. Met behulp van een druppel vetbond, zet de katheters in de rug. Klem de katheters bij de achterkant incisie met gewatteerde hemostats en verwijder het spuiten van de uiteinden. Plaats de rat met een ketting-type jas, cap de katheters (om de heparine slot te behouden), en verwijder de gevoerde hemostats. – Vervang Voor de lange termijn onderhoud katheter zoutoplossing met 20 U / ml heparine / zoutoplossing. 6. Onderhoud van katheter (steriele handschoenen te dragen tijdens de procedure) Klem de katheter met gevoerde tang. Verwijder de katheter stekker. Plaats een stompe tip spuit met lock-oplossing op de katheter. Ontspan de tang. Vul de katheter met het slot-oplossing (volume is pre-DETErmined-typisch 0,3 ml). Klem de katheter tijdens het spoelen op een terugstroom van het bloed voorkomen dat de katheter tip en de spuit te verwijderen. Vervang de catheter stekker. Ontspan de tang voorzichtig de plug duw in iets om ervoor te zorgen geen bloed is in het uiteinde van de katheter. 7. Bloedafname (steriele handschoenen te dragen tijdens de procedure) Klem de katheter met gevoerde tang. Verwijder de katheter stekker. Langzaam terug te trekken lock-oplossing met behulp van een stompe getipt spuit en gooi deze weg. Bevestig de bemonstering spuit met de katheter en langzaam terug te trekken van het monster. Klem de katheter met gecapitonneerde pincet en plaats een spuit met lock-oplossing op de katheter en de katheter opnieuw te vullen met het slot-oplossing. Klem de katheter tijdens het bijvullen van de katheter met de oplossing. Plaats de katheter stekker. Verwijder de gevoerde pincet en duw t hij sluit iets verder. 8. Toediening van het geneesmiddel Klem de katheter met gevoerde tang. Verwijder de katheter stekker. Langzaam terug te trekken lock-oplossing met behulp van een stompe getipt spuit en gooi deze weg. Bevestig de drug spuit op de katheter en trekken de stof in het dier. kan men gebruik maken van een 3-weg kraan als een intermediair als er meerdere injecties nodig zijn, zodat er minder vocht infusie in het dier. kan men een constante infusie spuitpomp hechten ook met een steriele filter voor continue infusies. Klem met gevoerde pincet en plaats een spuit met lock-oplossing op de katheter en de katheter opnieuw te vullen met het slot-oplossing. Klem de katheter tijdens het bijvullen van de katheter met de oplossing. Plaats de katheter stekker. Verwijder de gevoerde pincet voorzichtig de plug duw in iets verder. e "> 9. Bloeddruk en hartslag Sampling Klem de arteriële katheter met gevoerde pincet en verwijder de katheter plug. Bevestig de arteriële lijn naar de druksensor. Volg de productie instructies voor het gebruik van de software voor de bloeddruk collectie. Aan het einde van de controle van de bloeddruk periode, met behulp van gewatteerde tang klem de katheter en los te koppelen van de transducer. Spoel de katheter met het slot-oplossing en vervang de katheter stekker zoals hierboven beschreven. 10. Representatieve resultaten Een vertegenwoordiger van de bloeddruk te meten is afkomstig van een bewuste vrij bewegende dieren en is weergegeven in figuur 4. Fenylefrine (3 ug / kg, iv), een alfa-1-adrenerge receptor agonist, werd toegediend in de lies lijn om de bloeddruk te verhogen, terwijl gelijktijdig meten van de bloeddruk van de femorale arteriële lijn. Fentolamine (4 mg / kg, iv),een niet-selectieve alfa-adrenerge antagonist, werd vervolgens toegediend om de bloeddruk te verlagen. Figuur 1. Blunt ontleding van weefsel. Met de rat op zijn rug, heb je gemaakt van ongeveer een ½ inch (12 mm) incisie op de hoek van het achterbeen en het gebruik van botte schaar of hemostats u bot ontleden het bindweefsel om de femorale slagader en ader bloot te leggen. Figuur 2. Scheiding van femorale slagader en ader uit bindweefsel. Figuur 3. Katheter plaatsing. Met behulp van micro-Vanna ontleden schaar ongeveer plaats een kleine incisie ¼ van de weg door het vaartuig op een hoek van 45 graden (boven) en plaats fijne punt pincet in the incisie en met een ander paar pincetten voeden de katheter in het vat (midden). Ten slotte, na voltooiing van de plaatsing van de katheter hechtdraad de katheter op zijn plaats (onder). Figuur 4. Vertegenwoordiger van de bloeddruk te meten uit een vrij bewegende bewuste dier.