Retina Bölüm morfometrik Analizleri
Summary
Bu video retina ganglion hücrelerinin sayısı (RGCs) ve niceleme RGCs boyutları ölçülerek, iç nükleer tabaka kalınlığı ölçümü de retinanın morfometrik analizler, üç tip gösterir. Tekniği morfometrik analizler için basit ama bilimsel bir platform sunabilir.
Abstract
Retinal bölümlerin morfo analizleri retinal hastalıklar inceleyerek kullanılmıştır. Örnekler için, nöronal hücrelerde önemli ölçüde N-metil-D-aspartat ile sıçan modelinde retina ganglion hücre tabakası (RGCL) kayboldu (NMDA) eksitotoksisite 1, retinal iskemi-reperfüzyon yaralanması 2 ve glokom 3-indüklenen. INL ve iç pleksiform tabakası azaltılması (IPL) kainik asit-aracılı glutamat eksitotoksi 4 maruz sıçan gözünde sitikolin tedavisi ile tersine döndü kalınlıkta. RGC yoğunluğu ve soma boyutlarda Alterasyon göziçi basınç 3,5,6 gözlerde farklı ilaç tedavileri ile gözlenmiştir. Bu nedenle, retina morphometries analiz objektif yöntemlerle sahip retinal patolojiler ve tedavi stratejilerinin etkinliğini değerlendirmek büyük önem olabilir.
Retina yapısı çoklu katmanlar ve nöronlar exi birkaç farklı olduğunuretinada st. Gibi farklı katmanlardan hücre sayısı, hücre boyutu ve kalınlığı gibi retina morfometrik parametreler hücre kültür sistemi daha karmaşıktır. Erken, bu parametrelerin diğer ticari görüntüleme yazılımı kullanılarak tespit edilebilir. Değerleri göreceli değerinin normalde, ve kesin bir değere değişen daha doğru hesaplama gerekebilir. Ayrıca, hücre boyutu ve morfolojisi izleme, özellikle kronik glokom modeli, doğru ve istatistik analiz için yeterince hassas olmayabilir. Bu protokolde kullanılan ölçümler daha hassas ve kolay bir şekilde sağlanmaktadır. Ve hücre çizgisi ve büyüklüğü mutlak uzunluğu, doğrudan veya diğer dosyaları kopyalanacak kolay kaydedilmiştir. Örneğin, INL yılında iç ve dış en çekirdeklerin marjı takip ve kalınlığını ölçmek için 90 derecelik bir açı çizmek için yazılım kullanarak bir çizgi oluşturdu. Yazılım yardımı olmadan, belki eğik çizgi ve retina kalınlığı değişen olabilir ikenBireysel gözlemciler arasında tekrarlanabilir olmayabilir. Buna ek olarak, RGCs sayısını ve ayrıca yoğunluğu belirlenebilir. Bu protokol başarıyla, retinanın özellikleri miktarlarının değişkenliği azalır minimal değişiklikler tespit hassasiyetini artırır.
Bu video retina bölümleri morfometrik analizler üç tip gösterecektir. Bunlar, INL kalınlığının ölçülmesi RGCs sayısı miktarının ve mutlak değerinin RGCs boyutları ölçüm içerir. Bu üç analizleri Stereo Araştırıcı (- MicroBrightField, Inc MBF Bioscience) ile gerçekleştirilir. Tekniği morfometrik analizler için basit ama bilimsel bir platform sunabilir.
Protocol
Discussion
1. Daha doğru bir kalınlığı ölçümü nasıl elde edilir?
Bu butonu "Zoom" e tıklayarak görüntüyü büyütmek ve izleme penceresinde sol tıklama yapabilirsiniz. INL sınır açıkça görülebilir. Çizginin ucu INL dış sınırında değilse, biz Düzenleme modu altında çizgi ayarlayabilirsiniz. Ilgili satırı alıp sonra sağ izleme penceresi tıklayın ve "Seçilmiş Kontur Nokta Ekle". Eklenen noktası aynı hat boyunca olmalıdır sırada bir nokta dış …
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Bu laboratuvarda göz araştırma çalışmaları Amerikan Sağlık Yardımcısı Vakfı, Açelya (1972) Bağış Fonu ve HKU Küçük Projeler Fonu (20097176185) tarafından desteklenmektedir.
Materials
| Name of the reagent | Tipo | Company | Catalogue number |
| Stereo Investigator | MBF Bioscience Analysis Software | MicroBright Field | |
| Microscope | Olympus BX51 | Olympus Corporation | BX51 |
Referencias
- Lam, T. T., Abler, A. S., Tso, M. O. N-Methyl-D-Aspartate (NMDA)–Induced Apoptosis in Rat Retina. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 40, 2391-2397 (1999).
- Lam, T. T., Abler, A. S., Tso, M. O. Apoptosis and caspases after ischemia-reperfusion injury in rat retina. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 40, 967-975 (1999).
- Luo, X. G., Chiu, K., Lau, H. S., Lee, V. W. H., Yung, K. K. L., So, K. F. The Selective Vulnerability of Retinal Ganglion Cells in Rat Chronic Ocular Hypertension Model at Early Phase. Cellular and Molecular Neurobiology. 29 (8), 1143-1151 (2009).
- Han, Y. S., Chung, I. Y., Park, J. M., Yu, J. M. Neuroprotective effect of citicoline on retinal cell damage induced by kainic acid in rats. Korean J. Ophthalmol. 19, 219-226 (2005).
- Hernandez, M., Urcola, J. H. Retinal ganglion cell neuroprotection in a rat model of glaucoma following brimonidine, latanoprost or combined treatments. Exp. Eye Res. 86, 798-806 (2008).
- Chan, H. C., Chang, R. C. C., Ip, A. K. C., Chiu, K., Yuen, W. H., Zee, S. Y., So, K. F. Neuroprotective effects of Lycium barbarum Lynn on protecting retinal ganglion cells in an ocular hypertension model of glaucoma. Experimental Neurology. 203, 269-273 (2007).
