Спинной мозг электрофизиологии II: внеклеточной изготовление электродов Всасывающая
Summary
Демонстрация изготовления и использования внеклеточных электродов всасывания используется для измерения электрофизиологических записей новорожденных грызунов спинного мозга<em> В пробирке</em
Abstract
Развитие нейронных схемотехника и передвижения могут быть изучены с помощью новорожденных грызунов спинного мозга центральной картины генератора (CPG) поведение. Мы демонстрируем метод для изготовления электродов всасывания, которые используются для изучения CPG деятельности, или фиктивной локомоции, в расчлененное грызунов спинного мозга. Грызун спинного мозга находятся в искусственной спинномозговой жидкости и вентральных корешков втягиваются в всасывающего электрода. Электрода построен путем изменения имеющихся в продаже всасывания электрода. Тяжелее серебряной проволоки используется вместо стандартной проволоки дается коммерчески доступных электрода. Стеклянным наконечником на коммерческой электрод заменен пластмассовым наконечником для увеличения долговечности. Мы готовим рисованной электроды и электроды из конкретных размеров трубки, что позволяет согласованность и воспроизводимость. Данные собраны при помощи усилителя и программного обеспечения neurogram приобретения. Записи выполняются на стол воздуха внутри клетки Фарадея для предотвращения механических и электрических помех, соответственно.
Protocol
Discussion
Нервная система развития могут быть изучены с помощью изолированного спинного мозга грызунов. В присутствии медиаторов, фиктивный передвижения могут быть сгенерированы из спинного мозга в виде узорной электрической активности 1,3. Эти ритмичные очередей производятся на 0,2 до 0,5 ?…
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Сэмюэл Л. Пфафф является профессором в лаборатории экспрессии генов в Солка института биологических исследований и следователь в Медицинского института Говарда Хьюза. Эта работа была поддержана Кристофера и Даны Рив Foundation. Джо Belcovson, Кент Schnoeker и Майк Салливан в мультимедийных ресурсов в Институте Солка оказана помощь с фотографией и редактирования.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| PTFE Sub Lite Wall Tubing (Small tubing) | Zeus | 36AWG | 0.005”ID x 0.003” Wall (Small Parts) Also available in 0.003” to 0.006” | |
| Large tubing (0.86mm (0.34”)) | Clay Adams Brand Intramedic Becton Dickinson and Company | 427420 | 0.86mm (0.34”) O.D. 1.27mm (.050”) | |
| Electrode Barrel | A-M Systems | 573000 | ||
| Adhesive | JB Weld | |||
| Adhesive: Silicone caulk | ||||
| Solder and soldering iron | ||||
| Bleach | ||||
| Xylene | ||||
| Silver wire: 0.010” | A-M Systems | |||
| Insect pins: Austerlitz 0.1mm | Fine Science Tools | 26002-10 | ||
| Magnetic Stand | Narishige | GJ-8 | ||
| Micromanipulator | Narishige | MN 151 | ||
| Miniboard (Headstage) | Grass Industries | F-15EB/B1 | ||
| Polyview Adaptor Unit | Grass Industries | PVA 8 | ||
| Bipolar Portable Physiodata Amplifier System | Grass Industries | 15LT | ||
| ANALOG TO DIGITAL CARD | National Instruments | 6035E | ||
| Air Table; Vibraplane | Kinetic Systems |
Referencias
- Gallarda, B. W., Sharpee, T. O., Pfaff, S. L., Alaynick, W. A. Defining rhythmic locomotor burst patterns using a continuous wavelet transform. Ann N Y Acad Sci. 1198, 133-139 (2010).
- Meyer, A., Gallarda, B. W., Pfaff, S., Alaynick, W. Spinal cord electrophysiology. J Vis Exp. , (2010).
- Gallarda, B. W. Segregation of axial motor and sensory pathways via heterotypic trans-axonal signaling. Science. 320, 233-236 (2008).
- Landmesser, L. The development of motor projection patterns in the chick hind limb. J Physiol. 284, 391-414 (1978).
- Myers, C. P. Cholinergic input is required during embryonic development to mediate proper assembly of spinal locomotor circuits. Neuron. 46, 37-49 (2005).
- Chanin, M. The determination of chloride by use of the silver-silver chloride electrode. Science. 119, 323-324 (1954).
- Goulding, M. Circuits controlling vertebrate locomotion: moving in a new direction. Nat Rev Neurosci. 10, 507-518 (2009).
