高密度的自由移动，使用基于聚酰亚胺的微电极的小鼠的脑电图记录

1。摘要只C57BL/6J – 129S4/SvJae混合小鼠（12〜15周龄）麻醉与氯胺酮（120毫克/公斤的IP）和甲苯噻嗪（6毫克/公斤，IP）的鸡尾酒。尾巴或脚趾捏之前检查手术麻醉深度。鼠标是固定的立体定位仪（大卫Kopf仪器，型号902，加州，美国）。头皮切开约25毫米利多卡因减轻疼痛的治疗颅骨暴露在中线。任何头骨碎片是被盐水浸泡过的棉花提示，以提高电极坚持头骨。前囟门和lambda点标记，并在同一水平面。聚酰亚胺为基础的微电极阵列（矿务局阵列）的位置，所以，它的垂直中线符合的头骨中线。前囟门点应设在第 5层的前矿务局阵列中间。使用两个或三个microscrews在边缘的头骨，以帮助确保电极用牙科水泥的位置空空间。为支撑矿务局阵列连接器，我们对头部的中间支撑位置，并用牙科水泥覆盖。固化后，切开皮肤缝合，至少5天的恢复。在恢复过程中，老鼠被安置在个别笼免费获得食物和水。恢复后，进行脑电记录。动物护理，外科手术，并记录程序，按照机构的动物护理和使用委员会的指引，继1992年的韩国实验室动物保护条例“和相关准则的法。在这个手稿矿务局阵列制备蔡描述。等。人请联系作者在视频使用的相同的PBM阵列。 2。程序准备消毒的手术器械和立体定位仪。 麻醉与麻醉（例如，氯胺酮/甲苯​​噻嗪，剂量为120和60毫克/公斤的IP，repectively）鼠标。尾巴或脚趾捏之前检查手术麻醉深度。 立体定位仪安装到鼠标放入鼠标的耳道，耳酒吧，并拧紧到位。眼睛可覆盖生物相容性果冻（如凡士林），以防止眼睛干燥，手术灯。保湿鼠标的头部，用70％乙醇后，剃光头皮毛。 切开头皮约25毫米的头部。这是可取的，适用2％的少量利多卡因头皮下的盐酸。捏皮肤微夹钳（18052-03，精细的科学工具（美国），公司​​，加州，美国），以保持切口敞开。 擦拭用盐水浸泡棉签提高矿务局阵列坚持颅骨其余的头骨上的任何组织碎片。使用去除膜的残留过氧化氢也是有效的。 前囟和lambda点上找到的头骨，并与石油为基础的记号笔标记。矿务局阵列，所以，它的垂直中线符合图1所示的头骨中线放置。矿务局阵列的前5次用一滴自来水层中间位置的前囟门。从内侧向外侧，为更好地遵守仔细擦拭薄膜电极。为了帮助薄膜电极薄膜电极坚持严格的头骨，应完全干燥的头骨。薄膜电极仍然被固定在头骨上的范德华力。重新定位电极，另一滴自来水是必要的，以防止被撕裂的电极。 图1（左）鼠标头骨矿务局阵列。矿务局阵列anterio后轴相匹配的前囟（BP）和lambda点（LP）之间的线。 （右）上公认的鼠脑表面电极位置。鼠标的解剖结构分割的3 – D的磁共振成像数字地图集在布鲁克海文国家实验室和电极位置生产的成年C57BL/6J小鼠脑数据库，根据立体测量标记。地线（G）和参考（REF）电极标记在右边的图。 标记至少有三个开放区域的头骨上的位置，然后在这些地点使用支持microscrews定位一个牙钻的孔。这些microscrews的stanchion作用和机械支持的头骨上的牙科水泥。在钻井过程中需要格外小心。由于小鼠颅骨的薄层组成，出血可发生在钻井过程中轻松。出血发生时，停钻成孔止血粉少量申请。 应用牙科丙烯酸水泥（牙科顶点，顶点自固化，荷兰），覆盖的PBM的阵列，锚钉，而其余的头骨。准备在胶和粘性彗星的牙科水泥ondition。 一个刚性棒作为一个支柱上使用强力胶头（例如，乐泰，汉高乐泰公司，都柏林，爱尔兰）的中间位置。放在后面的连接器平面双面胶带。操纵矿务局阵列连接器连接支柱的一角。头骨和连接器之间的垂直距离应超过5毫米。棒连接器的平面和提示使用强力胶水粘更好的附着力。 确保彻底治愈，牙科水泥。然后申请在头骨的牙齿丙烯酸水泥和安全颅骨的连接器连接器平面的背面。 删除微夹钳。缝合切开皮肤消毒缝合纤维。从设备中取出鼠标。你可以申请额外的牙科丙烯酸水泥盾暴露颅骨。周围的水泥和缝合皮肤应用抗生素（fucidin软膏，东和制药，韩国）。 鼠标放置在消毒笼，直到它恢复其原来的体重（约5至7天）。建议不作任何笼交配。 恢复后，由一个轻量级的印刷电路板（PCB）连接器连接到一个多通道脑电放大器系统，在自己的笼子里（Synamps 2），美国北卡罗莱纳州的流浆箱的连接鼠标。连接线应慎重对待，因此它不纠缠不清。 经过1小时的习惯，进行脑电记录。扫描4.4。 （美国北卡罗莱纳州）在本实验中使用采集软件。一个典型的时间跟踪鼠标脑电图的设置如图2所示。建议记录的视频与鼠标的行为。 MATLAB（MathWorks公司，纳提克，马萨诸塞州，美国）获得的信号可以分析产生的地形脑图。鼠脑的脑电功率图的示例拓扑图如图3所示。 3。代表性的成果如果上述手术过程中正确地进行，将成功地执行了40个频道的鼠标脑电记录，无不良渠道。下图显示的代表性原始脑电图跟踪和地形图。 图2：一个脑电图经历的情况下通过注射γ-丁内酯（GBL，经口50mg/kg，IP）致痫样本跟踪。红色条表示在失神发作棘波放电（SWDS）。水平和垂直轴表示时间和电压分别。在图中定义的通道蒙太奇数如下。 1（右）。 图3。地形图显示2-6赫兹配电。在彩条的值代表的势力地图的颜色规模。在棘波和γ-丁内酯（GBL，经口50mg/kg，IP），大额顶皮层区域的力量诱导显着的排放（SWDS）相比增加GBL注射前（基线）的权力。