أصبح التصوير بالرنين المغناطيسي (MRI) أداة شعبية متزايدة لدراسة النمط الظاهري من الفئران المعدلة وراثيا. هذه المقالة يوضح الأساليب اللازمة لتحقيق الإنتاجية العالية phenotyping من الفئران المعدلة وراثيا باستخدام عدة الفأر التصوير بالرنين المغناطيسي.
ميدان phenotyping الفأر مع التصوير بالرنين المغناطيسي (MRI) هي التي تنمو بسرعة ، بدافع الحاجة إلى أدوات أفضل لتوصيف وتقييم نماذج الماوس من الأمراض التي تصيب البشر. التصوير بالرنين المغناطيسي هو طريقة ممتازة لتحقيق الحيوانات المعدلة وراثيا. فهي قادرة على تغطية كامل الدماغ ، يمكن أن تستخدم في الجسم الحي ، ويوفر آليات متعددة لتحقيق النقيض من جوانب مختلفة من neuranatomy والفيزيولوجيا. ظهور الماسحات الضوئية عالية الميدان جنبا إلى جنب مع القدرة على تفحص الفئران متعددة في وقت واحد يسمح لphenotyping السريع للطفرات الرواية.
فعالة الماوس دراسات التصوير بالرنين المغناطيسي تتطلب الانتباه الى جوانب كثيرة من تصميم التجربة. في هذه المقالة ، سنقوم بشرح طرق عامة للحصول على صور عالية الجودة للphenotyping الماوس باستخدام نظام الفئران أن الصور في وقت واحد في محمية تردد الراديو الإرسال / التلقي (RF) الملفوف في المغناطيس الشائعة (بوك وآخرون ، 2003). ونحن نركز بشكل خاص على phenotyping التشريحية ، والتطبيقات الهامة والوصول التي أظهرت قدرة عالية على التأثير في العديد من نماذج الماوس في مركز التصوير لدينا. قبل أن نتمكن من تقديم الخطوات التفصيلية للحصول على مثل هذه الصور ، هناك اعتبارات عملية هامة لكلا التصوير الدماغ في الجسم الحي (Dazai وآخرون ، 2004) ، والتصوير خارج الجسم في الدماغ (ربيع وآخرون ، 2007) أنه ينبغي أن يلاحظ. وتناقش هذه أدناه.
على حد سواء في الجسم الحي وخارج الجسم الحي الماوس صورة نظم التصوير مواضيع متعددة في آن واحد لزيادة الإنتاجية من الدراسات التصوير دون زيادة كبيرة في وقت التصوير. الصور من كل من الدماغ في الجسم الحي وخارج الجسم الحي تقنيات التصوير متعددة الماوس ذات جودة عالية ومناسبة لphenotyping الهياكل الرئيسية والثانوية في مخ الفأر على التوالي.
لتقليل الوقت اللازم لإعداد الحيوان عينات متعددة ، والموازاة من العمليات ذات أهمية قصوى. على سبيل المثال ، وتطوير الغرفة التعريفي يسمح للتحريض على عينات متعددة في وقت واحد ، وزلاجات وقد تزامن تطبيق تخطيط القلب ودرجة الحرارة أثناء تحقيقات لتحديد المواقع توحيد الجسم. وعلاوة على ذلك ، لدينا نظام التصوير السابقين فيفو تمكننا من الحصول على ثلاث صور عالية الدقة ثلاثية الأبعاد من أدمغة 16 كلها ثابتة في وقت واحد والذي يعتبر مثاليا للدراسات phenotyping الإنتاجية العالية.
قيود محتملة لدينا نظام التصوير في فيفو وتشمل عدم القدرة على التحكم في درجة الحرارة وحدة التخدير لكل الماوس. يمكن إذا أن تنفذ المطلوب السيطرة الفردية مخدر مع اضافة التبخير مخدر الحصري لكل الماوس. آخر قيود على نظام التصوير في الجسم الحي هو أن يقتصر المسح على الفئران التي هي أقل من حوالي 32 غراما. ومع ذلك ، هناك خطة حاليا لزيادة حجم الملف لاستيعاب أكبر الحيوانات.
The authors have nothing to disclose.
هذا العمل هو جزء من مركز التصوير ماوس (الفئران) في مستشفى الأطفال المرضى ، وجامعة تورنتو.
Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
Isoflurane, USP (AErrane) | Baxter | CA2L9108 | ||
NAIR | Church & Dwight Canada Corp. | |||
Tears Naturale P.M. | Alcon | DIN 02082519 | ||
Omniscan (gadodiamide injection USP) | GE healthcare | J-110A | ||
Custom Sleds | Dazai Research Instruments | |||
PBS w/o Ca and Mg | Wisent | 311-010-CL | ||
Heparin 10000USP/10ml | Pharmaceutical Partners of Canada | DIN 02264315 | ||
ProHance (gadoteridol injection USP) | Bracco Diagnostics | 11181 | ||
Parafolmadehyde (powder) | Sigma | P-6148-500g | ||
Sodium Azide | Fisher | S227-100 | ||
Formalin 10% | Fisher | SF100-4 |