Inyección intracraneal de adeno-asociado vectores virales

Inyección intracraneal de vectores virales para expresar una proteína fluorescente es una técnica de etiquetado versátil para la visualización de grupos específicos de células en diferentes regiones del cerebro, tanto en vivo y en secciones de cerebro. A diferencia de la inyección de colorantes fluorescentes, etiquetado viral ofrece focalización de los tipos de células y es menos costoso y consume mucho tiempo que el establecimiento de líneas de ratones transgénicos. En esta técnica, un virus adeno-asociados (AAV) vector se inyecta por vía intracraneal mediante coordenadas estereotáxica, una micropipeta y una bomba automática para la entrega precisa de AAV en la zona deseada con el mínimo daño a los tejidos circundantes. Los parámetros de inyección se pueden adaptar a los distintos experimentos mediante el ajuste de la edad del animal a una velocidad de inyección, la ubicación de la inyección, el volumen de la inyección, la inyección, el serotipo AAV y el promotor dirige la expresión de genes. Dependiendo de las condiciones elegidas, de forma viral inducida por la expresión del transgén puede permitir la visualización de grupos de células, las células individuales o bien los procesos celulares, hasta el nivel de las espinas dendríticas. El experimento que se muestra aquí muestra una inyección de doble cadena AAV que expresa la proteína verde fluorescente para el etiquetado de las neuronas y la glía en la corteza visual primaria del ratón.