Summary

Органотипической гиппокампа Модель культуры фрагмент за рассмотрение нейронов травмы

Published: October 28, 2010
doi:

Summary

Organoptypic гиппокампа модель культуры срез<em> В пробирке</em> Модели используются для изучения нейронных травмы в различных парадигм. В этой статье мы опишем методы генерации срез культуры и количественной нейронов травмы.

Abstract

Органотипической гиппокампа культуры срез в пробирке метод для изучения механизмов нейронных травмы, в которой базовая архитектура и состав гиппокампа является относительно сохранившихся 1. Органотипической системе культуры позволяет изучение нейронов, астроцитов и микроглии эффекты, но, как бывший подготовки естественных условиях, не рассматриваются последствия кровоток, или вербовки периферических воспалительных клеток. С этой целью, эта культура метод часто используется для изучения excitotoxic и гипоксических повреждений пирамидных нейронов гиппокампа, а также используется для изучения воспалительной реакции. Здесь мы опишем методы генерации гиппокампа культур ломтик от послеродовой мозга грызуна, управления токсичными стимулы, чтобы побудить нейронов травмы, и опробование и количественной гибель нейронов гиппокампа.

Protocol

1. Подготовка Прежде чем начать, собрать необходимые хирургические инструменты, рассечение и питательных сред, а также на 7 дней старая крыса или мышь щенков. Протокол является одинаковым для мышей и крыс препаратов. (Я) Материалы и оборудование Операц…

Discussion

Есть два важных момента, чтобы следовать, чтобы обеспечить воспроизводимость и устойчивые результаты при репликации экспериментов. Во-первых, важно, чтобы гиппокампа возрасте ломтиками по 12-14 дней до начала эксперимента. С ломтиком изоляции, существует значительная микроглии ответ, и …

Divulgaciones

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Финансируемая NINDS, Американской ассоциации сердца, Американской федерации исследований старения, март Dimes

Referencias

  1. Stoppin, L., Buchs, P. A., Muller, D. A simple method for organotypic cultures of nervous tissue. J Neurosci Methods. 37 (2), 173-173 (1991).
  2. McCullough, L., Wu, L., Haughey, N. Neuroprotective Function of the PGE2 EP2 Receptor in Cerebral Ischemia. J Neurosci. 24 (1), 257-257 (2004).
  3. Czapiga, M., Colton, C. A. Function of microglia in organotypic slice cultures. J Neurosci Res. 56, 644-644 (1999).
  4. Newell, D. W., Barth, A., Papermaster, V. Glutamate and non-glutamate receptor mediated toxicity caused by oxygen and glucose deprivation in organotypic hippocampal cultures. J Neurosci. 15, 7702-7702 (1995).
  5. Wu, L., Wang, Q., Liang, X. Divergent Effects of prostaglandin recetor signaling on neuronal survival. Neuroscience letter. 421, 253-253 (2007).
  6. Hailer, N. P., Jarhult, J. D., Nitsch, R., R, . Resting microglial cells in vitro: Analysis of morphology and adhesion molecule expression in organotypic hippocampal slice cultures. Glia. 18, 319-319 (1996).

Play Video

Citar este artículo
Wang, Q., Andreasson, K. The Organotypic Hippocampal Slice Culture Model for Examining Neuronal Injury. J. Vis. Exp. (44), e2106, doi:10.3791/2106 (2010).

View Video