미마리 지방 패드탈세포: 매머 지방 패드에서 세포외 매트릭스 하이드로겔을 제거
Published: April 30, 2023
Abstract
출처: Alves 외., 세포외 매트릭스 하이드로겔을 사용하여 정상적인 조직 방사선 효과를 연구. J. Vis. Exp. (2019).
이 비디오는 체외 연구에 대한 전 생체 조사 다음 murine mammary 지방 패드를 탈세포화하여 세포외 매트릭스 하이드로겔을 유도하는 기술을 설명합니다. 이 하이드로겔은 종양 세포 행동을 연구하기 위해 방사선 후 생체 내 유방 조직 환경을 모방하는 데 도움이됩니다.
Protocol
1. 세포 탈세포화 참고: 이 절차는 DNA를 효율적으로 제거하기 위해 도데실 황산나트륨보다는 탈옥염 이온 세제 나트륨을 포함하는 지방 탈세포화에 초점을 맞춘 이전에 발표된 방법에서 채택되었다. 1일째에는냉동 유방 지방 패드 또는 MFP를 -80°C에서 제거하고 실온에서 해동하십시오. 일단 해동, 섬세한 작업 닦아에 잠시 건조 MVP…
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Materials
| 10% Neutral Buffered Formalin, Cube with Spigot | VWR | 16004-128 | |
| 2-methylbutane | Alfa Aesar | 19387 | |
| Bovine Serum Albumin | Sigma-Aldrich | A1933-25G | |
| Dulbecco's phosphate-buffered saline | Gibco | 14040133 | |
| Fisher Healthcare Tissue-Plus O.C.T. Compound | Fisher Scientific | 23-730-571 | cryostat embedding medium |
| Kimtech Science Kimwipes | Kimberly Clark | delicate task wipes | |
| n-Propanol (Peroxide-Free/ Sequencing), Fisher BioReagents | Fisher Scientific | BP1130-500 | |
| PBS (10X), pH 7.4 | Quality Biological, Inc. | 119-069-151 | Phosphate-buffered saline |
| Penicillin-Streptomycin | Gibco | 15140-122 | |
| Peracetic acid | Sigma-Aldrich | 77240-100ML | |
| Triton x-100 | Sigma-Aldrich | X100-100ML | t-Octylphenoxypolyethoxyethanol |
| Trypsin-EDTA (0.25%), phenol red | Gibco | 25200-056 | |
| Richard-Allan Scientific Signature Series Hematoxylin 7211 | Richard-Allan Scientific | 7211 | |
| Whatman qualitative filter paper, Grade 4 | Whatman | 1004-110 | grade 4 qualitative filter paper |
| Xylenes (Certified ACS), Fisher Chemical | Fisher Scientific | X5-5 |
Citar este artículo
Decellularizing Mammary Fat Pads: Deriving Extracellular Matrix Hydrogels from Mammary Fat Pads. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20229, doi: (2023).