Beispielvorbereitung für Metabolomik: Eine Methode zur Vorbereitung von Zellproben für metabolitische Profilierung
Published: April 30, 2023
Abstract
Quelle: Zhao, Y.C. et. al., Systems Biology of Metabolic Regulation by Östrogen Receptor Signaling in Breast Cancer. J. Vis. Exp. (2016).
Dieses Video beschreibt eine Technik zur Vorbereitung von Brustkrebszellproben für die Metabolitenprofilierung. Brustkrebszellen werden mit Estradiol behandelt, das an den Östrogenrezeptor alpha bindet und veränderungen in der Metabolitenzusammensetzung bewirkt.
Protocol
1. Metabolomics Assay Probenvorbereitung Zellkultur und -behandlung Samen 400.000 MCF7-Zellen pro 10 cm Platte im Wachstumsmedium. Für jede Behandlung bereiten Sie drei Proben vor. Verwenden Sie zwei Platten in jeder Probe, um genügend Zellen für die Erkennung zu erhalten. Am 3. Tag das Medium entfernen und 5 ml frisches Medium mit oder ohne 10-8 M Estradiol oder E2 in die Zellen geben. Behandeln Sie die Zellen für 24 Stunden (37 °C in befeuchteter 5%CO2-Atmosphäre). </…
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
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Sample Preparation for Metabolomics: A Method to Prepare Cell Samples for Metabolite Profiling. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20227, doi: (2023).