הכנת דגימת מיקרוסקופיה של יריעות אור: הרכבה של עוברי זברה חיים להדמיה ארוכת טווח
Published: April 30, 2023
Abstract
מקור: Icha J., ואח ‘. באמצעות יריעת אור פלואורסצנטי מיקרוסקופיה כדי תמונה זברהפיש פיתוח עיניים. ג’יי ויס אקספ. (2016).
מאמר זה מתאר הכנה לדוגמה עבור מיקרוסקופ פלואורסצנטי גיליון אור. הוא גם מדגים שיטה להרכבת עוברי זברה חיים להדמיה ארוכת טווח, המאפשרת הקלטה של סרטים ארוכי טווח של עוברים חיים בתנאים כמעט פיזיולוגיים.
Protocol
1. הכנה לדוגמה הכנת תערובת אגרוז 15 דקות לפני ביצוע תערובת agarose, להמיס אחד 1 מיליליטר aliquot של 1% נקודת התכה נמוכה agarose (מומס בינוני E3) בבלוק חימום להגדיר 70 °C (70 °F). לאחר agarose הוא מותך לחלוטין, להעביר 600 μl לתוך צינור טרי 1.5 מיליליטר, להוסיף 250 μl של E3 בינוני, 50 μl של 0.4% MS-222 ו 25 μl של פתר…
Materials
| Lightsheet Z.1 microscope | Carl Zeiss Microscopy | ||
| Low melting point agarose | Roth | 6351.1 | |
| Low melting point agarose | Sigma | A4018 or A9414 | |
| Ethyl 3-aminobenzoate methanesulfonate (MESAB/ MS-222/Tricaine) | Sigma | E10521 | |
| 20 μl (1 mm inner diameter, marked black) capilllaries | Brand | 701904 | sold as spare part for transferpettor |
| Teflon tip plungers for 20 μl capillarie | Brand | 701932 | sold as spare part for transferpettor |
Citar este artículo
Light Sheet Microscopy Sample Preparation: Mounting Live Zebrafish Embryos for Long-Term Imaging. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20185, doi: (2023).