Ablation ciblée du foie : Induire la mort des hépatocytes avec le métronidazole chez les larves transgéniques de poisson zèbre
Published: April 30, 2023
Abstract
Source : Choi T.Y., et coll. Ablation spécifique aux hépatocytes chez zebrafish pour étudier la régénération hépatique entraînée par Biliary. J. Vis. Exp. (2015)
L’article décrit l’ablation ciblée du foie, une méthode pour induire la mort des hépatocytes avec du métronidazole chez les larves transgéniques de poisson zèbre. Le protocole de l’échantillon décrit le processus de génération, de manipulation et d’évaluation de l’ablation ciblée du foie chez le poisson zèbre.
Protocol
1. Préparation d’embryons/larves Transférer 100 embryons dans une boîte de Pétri de 100 mm avec 25 ml d’eau d’œuf. Ne gardez pas plus de 100 embryons par boîte de Pétri et augmentez-les à 28 °C. Pour inhiber la pigmentation, ajouter la phénylthiourea (PTU) dans les boîtes de Pétri avant 10 heures après la fécondation (hpf), et élever les embryons/larves jusqu’à 80 hpf. La concentration finale de PTU est de 0,2 mM.ATTENTION: La PTU est toxique. Utiliser conf…
Materials
| 3-amino benzoic acid ethyl ester (Tricaine) powder | Sigma-Aldrich | A5040 | Make 0.4% (15 mM) tricaine stock : Bring 0.4 g tricaine to 100 mL with egg water. Adjust to pH 7. |
| Dimethyl sulfoxide (DMSO) | Sigma-Aldrich | D8418 | |
| Metronidazole | Sigma-Aldrich | M1547 | |
| N-Phenylthiourea (PTU) | Sigma-Aldrich | P7629 | |
| 100 x 15 mm petri dish | Denville Scientific Inc. | M5300 | |
| egg water | 0.3 g/L of sea salts ‘Instant Ocean’ and 0.5 mM CaSO4 in distilled water. | ||
| epifluorescence microscope | Leica Microsystems | M205FA |
Citar este artículo
Targeted Liver Ablation: Inducing Hepatocyte Death with Metronidazole in Transgenic Zebrafish Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20181, doi: (2023).