Einzelzelldissoziation von Caenorhabditis elegans: Eine Methode, um lebende Zellen zu isolieren
Published: April 30, 2023
Abstract
Quelle: Deutschland, E.M., et al. Isolierung spezifischer Neuronenpopulationen von Roundworm Caenorhabditis elegans. J. Vis. (2019).
Dieses Video beschreibt eine Methode, um ganze Würmer in eine einzellige Suspension zu dissoziieren, die für FACS oder Immunpräzipitation intakter Zellen geeignet ist.
Protocol
Dieses Protokoll ist ein Auszug aus Germany et al, Isolation of Specific Neuron Populations from Roundworm Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2019). 1. Vorbereitung und Sammlung von gealterten Würmern zur Zellisolierung HINWEIS: Im Folgenden wird die Isolierung von cholinergen …
Materials
| Agar, Molecular Biology Grade | VWR | A0930 | |
| CaCl2 | Sigma | C5670 | |
| Contess Automated Cell Counter | Invitrogen | Z359629 | |
| DTT | USBiological | D8070 | |
| FBS | Omega Scientific | FB-02 | |
| Fluorodeoxyuridine | Sigma | F0503 | |
| HEPES | Sigma | H3375 | |
| KCl | Amresco | O395 | |
| KH2PO4 | USBiological | P5110 | |
| Leibovitz's L-15 Medium | Gibco | 21083027 | |
| MgCl2 | Sigma | M8266 | |
| MgSO4 | USBiological | M2090 | |
| Na2HPO4·7H2O | USBiological | S5199 | |
| NaCl | VWR | X190 | |
| NaOCl (Bleach) | Clorox | ||
| Penicillin-Streptomicen | Fisher Scientific | 15140122 | |
| Pronase E | Sigma | 7433 | protease mixture from Streptomyces griseus |
| SDS | Amresco | O227 | |
| SMT1-FLQC fluorescence stereomicroscope | Tritech Research | ||
| Sucrose | USBiological | S8010 |
Citar este artículo
Single Cell Dissociation of Caenorhabditis elegans: A Method to Isolate Live Cells. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20135, doi: (2023).