דרוזופילה בויו הדמיית סידן: שיטה להדמיה תפקודית של פעילות עצבית
Published: April 30, 2023
Abstract
מקור: הנקוק, C. E., ואח ‘. ב Vivo אופטי סידן הדמיה של למידה-induced פלסטיות סינפטית במלנוגאסטר דרוזופילה. ג’יי ויס אקספ. (2019).
וידאו זה מתאר הדמיית סידן vivo בנוירונים Drosophila באמצעות GCaMP. סרטון הפרוטוקול המוצג מראה כיצד לתעד שינויים בפלואורסצנטיות GCaMP של נוירונים בגוף פטריות במהלך ניסוי מיזוג חוש הריח.
Protocol
פרוטוקול זה הוא קטע מתוך הנקוק ואח ‘, ב Vivo אופטי סידן הדמיה של פלסטיקה סינפטית הנגרמת על ידי למידה ב Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2019). 1. בהדמיית סידן vivo השתמש במיקרוסקופ מולטי פוטון המצויד בלייזר אינפרא אדום ומטרת טבילה במים (ראה טבלת חומרים), המותקנת על ?…
Materials
| 1-Octen-3-ol | Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA | O5284 | Chemical used as odorant |
| 3-Octanol | Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA | 218405 | Chemical used as odorant |
| 4-Methylcyclohexanol | Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA | 153095 | Chemical used as odorant |
| Bandpass filter for EGFP (525/50 nm) | Carl Zeiss Microscopy GmbH, Jena, Germany | ||
| Mineral oil | Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA | M8410 | Used as diluent for odorants |
| Mode-locked Ti-Sapphire laser Chameleon Vision 2 | Coherent Inc., Santa Clara, CA, USA | Tunable infrared femtosecond laser | |
| Multiphoton Microscope LSM 7MP equipped with BiG detectors | Carl Zeiss Microscopy GmbH, Jena, Germany | Multiphoton microscope, multiple companies provide similar devices. | |
| Plan-Apochromat 20x (NA = 1.0) water immersion objective | Carl Zeiss Microscopy GmbH, Jena, Germany | 421452-9900-000 | Objective W "Plan-Apochromat" 20x/1.0 DIC M27 70mm |
| Visual Basics of Applicatons (VBA) software to receive a trigger from the odor-delivery device and the electric shock application device (power supply) to interact with the ZEN software from Zeiss that controls the microscope | Custom-written and available upon request | n.a. | n.a. |
Citar este artículo
Drosophila In Vivo Calcium Imaging: A Method for Functional Imaging of Neuronal Activity. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20129, doi: (2023).