测量细菌细胞的抗弯刚度，使用光学陷阱

卢里亚Beltrani肉汤（LB）培养基中的大肠杆菌细胞生长指数生长期（OD = 0.2-0.4）。 增长在50微克/毫升头孢氨苄15分钟诱发丝状增长为辅的LB培养，然后通过离心5次集中的文化。 流流室加水稀释成1％的聚乙烯涂层裴盖玻片，孵育5分钟后用清水洗净。 流入集中的细胞培养室，3分钟后冲洗，以去除独立的细胞，LB和头孢氨苄（50μg/mL）的混合物。 室在37℃，30分钟1小时让贴壁细胞上的光学诱捕仪器安置前的生长。 孵化在直径0.5微米的聚苯乙烯珠（刘海实验室）30分钟的水稀释0.1％多聚赖氨酸多聚赖氨酸包被的磁珠。然后洗珠的3倍，并重新悬浮在水中。 珠的解决方案由两个因素与头孢氨苄（50μg/mL）LB稀释，并添加到流室。 光陷阱一个漂珠，触摸到一个单元格的免费提示。 （我们使用一个疯狂的城市实验室压电阶段控制样品的议案。）当找到一个合适的珠/单元组合，洗磅（50μg/mL）室与头孢氨苄删除独立的珠子。 运行自定义编写的LabVIEW程序申请弯曲力，细胞和记录力 – 位移数据。节目详情校准光栅扫描范围内检测激光束和录制3D PSD电压信号的附加珠探测器响应。 确定细胞在显微镜图像的长轴。 将细胞在细胞长轴垂直方向的步骤。 记录移动的距离从光陷阱和位移。 转换位移施加的力，使用以前测量的陷阱刚度和节省尖位移和力文件。 成功秘诀：在第8步），需要找到一个定义良好的粘结束​​的细胞。一些细胞只是停留在一个提示，并在其他尖端弯曲力，导致整个细胞旋转，而不是弯曲。找到一个合适的一对是由每个细胞迅速弯曲手使用操纵杆控制阶段的议案。 代表性的成果： 图1此图显示了一个单细胞的力-位移数据。这条生产线的斜率是细胞的抗弯刚度。