Concentración, la carga, y la alineación de una célula de ultracentrifugación analítica de muestras

Muestra la Asamblea Celular y Torque Comenzamos la construcción de la muestra de células uniendo dos montajes de ventana. Coloque una junta de ventana en el soporte de la ventana. Coloque el revestimiento de la ventana (o es algunas veces llamado un amortiguador de la ventana) en el interior del soporte de ventana para que la abertura de la camisa se encuentra frente a la ranura del soporte. Con una ligera inclinación, coloque la ventana en el soporte de la alineación de la marca escriba en la ventana con la forma en clave del titular de la ventana. Presione con suavidad en los bordes muy a ambos lados de la ventana. Para garantizar el cierre y el par exacto de la celda de muestra, cubrir ligeramente la junta de la vivienda y la rosca con un lubricante Spinkote. Extender una pequeña cantidad de Spinkote entre el pulgar y el índice. Cubra las roscas rosca con una fina capa invisible de Spinkote. Del mismo modo, cubra la junta de la vivienda. Limpie cualquier lubricante visible. Iniciación de Montaje de la muestra de células de un montaje de ventanas corredizas, con la ventana que daba hacia usted, en la caja del celular mediante la alineación de la ranura de la llave de la vivienda. Alinear la ranura central con la llave de la vivienda y se deja caer suavemente en la parte superior del montaje de ventanas dentro de la célula. Nunca utilice ningún tipo de herramienta para empujar la pieza central en la caja del celular. Esto podría causar daños permanentes en el CP que resulta en pérdida durante los experimentos. Gire el conjunto segunda ventana para que la ventana esté mirando hacia el centro, lejos de ti, alinear chavetero con llave de vivienda y deslice hacia abajo en la parte superior de la central. Coloque una junta de vivienda en la parte superior, entonces, una tuerca por lo que la palabra "Out" es visible. Con los dedos y una herramienta de alineación, apriete la rosca. Si el CP no se desliza fácilmente en el barril de la vivienda, la primera alineación, entonces, colocar el conjunto de segunda ventana en la parte superior de la misma. Al aplicar presión a la baja suave en el montaje de ventanas, deslice ambos en la caja del celular al mismo tiempo. De esta manera, evitar presionar directamente en el PC. Ahora es un buen momento para mirar dentro de la célula de polvo, pelusas y las huellas dactilares. También se dará cuenta de los Anillos de Newton que indican que aún queda aire entre el PP y las ventanas. Estas desaparecerán después de la aplicación de torque. Con la rosca y la palabra "fuera" visible, coloque la celda muestra todo el camino hasta el interior de la pinza par de células de la pie de torque. Mantenga la célula en su lugar mediante la aplicación de una presión constante sobre el mango de pie de torque. En un movimiento continuo, apriete la rosca de entre 120 a 140 en-libras. Si se utiliza una llave de torsión ajustable micrómetro, se establece en entre 120 a 140 in / lbs y apriete la rosca hasta que la llave haga "clic" que indica el par de giro se ha alcanzado. Suelte la palanca de pie de par y retire con cuidado la celda de la muestra sin tocar las ventanas. De carga y sellado de la celda de la muestra Para los experimentos de velocidad de sedimentación, de manera rutinaria cargar un volumen de 400ul en cada sector de la piedra angular de 12mm con una pipeta 200ul. La posición de la celda de muestra con los orificios de carga en la parte superior y la palabra "out" en la rosca visible. Deslice la punta de la pipeta hasta la mitad en el sector central de la izquierda a través de los orificios de carga y poco a poco prescindir de 200ul de solución de referencia. Repetir una vez a un total de 400ul. Utilizando la punta de la pipeta mismo y la misma técnica, con cuidado y lentamente llenar el sector central de la derecha con 400ul de solución de la muestra. Volúmenes de 150 a 180 ul se utilizan para los experimentos de equilibrio de sedimentación, pero el mismo cuidado y la técnica se debe seguir. Es imprescindible para que coincida con los volúmenes de las soluciones de referencia y la muestra lo más cerca posible. Colocación de la punta de la pipeta con firmeza en la pipeta, poco a poco la carga y distribución de soluciones, evitando las burbujas de carga y el uso de la misma punta de la pipeta para ambas soluciones a todos ayudar a mantener el volumen lo más equitativa posible. Sello de la célula mediante la colocación de dos nuevas juntas de clavija de la vivienda perfectamente en cada agujero de carga asegurándose de que están situados entre la pieza central y la carcasa de aluminio. Cubra cada uno con un enchufe de la vivienda. Apriete a mano con un destornillador plano pequeño. Alineación de la celda de la muestra en el rotor Antes de cargar el rotor, asegúrese de que el contrapeso no es más que 0,5 g más ligera que la célula de muestra en la posición opuesta en el caso de que las filtraciones de la celda de muestra. Comience con el saldo en cero. Primer pesaje de la célula de la muestra que estará en posición opuesta al CB. Tarar la balanza para restar peso de la célula de la muestra, entonces, pese la CB. Sumar o restar el peso del orificio de fijación del contrapeso. Asegúrese de que los pesos no sobresalen de la parte superior. Pesar de nuevo para asegurarse de que el contrapeso final está dentro de 0,5 g más ligera que la célula de muestra lo contrario. El uso de un rotor de 4 posiciones, coloque el contrapeso en la posición 4, de manera que la flecha blanca es visible y apuntando en tque la dirección de la fuerza centrífuga. Asegúrese de que está todo el camino hasta el interior del rotor. Suavemente apriete el tornillo de fijación, que se encuentra en la parte superior del contrapeso justo al otro lado de la flecha blanca, hasta que el contrapeso es firme en su lugar, pero aún capaz de ser alineados. La posición de la celda de muestra equilibrada con los tapones de vivienda que enfrenta el centro del rotor y la palabra "out" en la rosca visible. Mirando desde debajo del rotor, alinear la marca de escribano en el interior (la marca más cercana al centro del rotor) con la marca de escribano en el contrapeso mediante una herramienta de alineación. Apriete el tornillo de fijación para bloquear contrarrestar alineados en su lugar. De la misma manera, alinear la celda de la muestra marca escribano con la marca escriba en el interior en la posición 2 en el rotor. Para más información, consulte https://sedfitsedphat.nibib.nih.gov/default.aspx