Planar Lipid-Doppelschichten, die auch als künstliche Lipid-Doppelschichten, können Sie studieren ionenleitenden Kanälen in einem genau definierten Umgebung. Hier zeigen wir die einzelnen Schritte nötig, um die Doppelschicht Kammer vorzubereiten, die Elektroden und wie man testen, ob der Doppelschicht für Einkanal-Messungen ist.
Abstract
Planar Lipid-Doppelschichten, die auch als künstliche Lipid-Doppelschichten, können Sie studieren ionenleitenden Kanälen in einem genau definierten Umgebung. Diese Doppelschichten können für viele verschiedene Studien, wie zum Beispiel die Charakterisierung von Membran-aktive Peptide, die Wiederherstellung von Ionenkanälen oder Untersuchungen darüber, wie Veränderungen in der Lipid-Doppelschicht Eigenschaften verändern die Funktion der Transmembrandomänen Kanäle verwendet werden. Hier zeigen wir, wie man eine planare Doppelschicht bilden und wie kleine Flecken aus der Doppelschicht zu isolieren, und in einem zweiten Video wird zeigen auch ein Verfahren zur Verwendung Gramicidin-Kanäle, um Änderungen in Lipiddoppelschicht elastischen Eigenschaften zu bestimmen. Wir zeigen auch die einzelnen Schritte nötig, um die Doppelschicht Kammer vorzubereiten, die Elektroden und wie man testen, ob der Doppelschicht für Einkanal-Messungen ist.
Protocol
Bitte besuchen Springer Protocols für weitere Informationen über die Vorbereitung künstlichen Doppelschichten und mit Gramicidin-Kanäle für das Sondieren Membran Elastizität.
Kapoor, R., H. Kim, J., Ingolfson, H., Sparre Andersen, O. Preparation of Artificial Bilayers for Electrophysiology Experiments. J. Vis. Exp. (20), e1033, doi:10.3791/1033 (2008).