Journal
/
Biochemie
/
Et optimeret enkeltmolekyle pull-down assay til kvantificering af proteinfosforylering
JoVE Journal
Biochemie
Zum Anzeigen dieser Inhalte ist ein JoVE-Abonnement erforderlich.  Melden Sie sich an oder starten Sie Ihre kostenlose Testversion.
JoVE Journal Biochemie
An Optimized Single-Molecule Pull-Down Assay for Quantification of Protein Phosphorylation

Et optimeret enkeltmolekyle pull-down assay til kvantificering af proteinfosforylering

DOI:
10.3791/63665-v

•

07:45 min

•

June 06, 2022

•

, , , , , , ,
1Department of Pathology,University of New Mexico School of Medicine, 2Department of Physics and Astronomy,University of New Mexico, 3Comprehensive Cancer Center,University of New Mexico Health Sciences Center

Kapitel

  • 00:04Introduction
  • 00:53Coverslip Preparation
  • 03:18Functionalization of Array with Biotinylated Antibody
  • 04:09SiMPull of Proteins of Interest from Whole-Cell Lysates
  • 04:40Image Acquisition
  • 05:45Results: Capture of EGFR-GFP from Protein Lysates Using SiMPull
  • 07:19Conclusion

Summary

Automatische Übersetzung

Automatische Übersetzung

Denne protokol beskriver prøveforberedelse og dataanalyse for at kvantificere proteinfosforylering ved hjælp af et forbedret enkeltmolekyle pull-down (SiMPull) assay.

Tags

AI-powered Protein Phosphorylation QuantificationSingle-molecule Pull-down AssaySiMPull ProtocolAntibody LabelingAutofluorescence ReductionSingle-molecule AnalysisPhosphorylation Status Of Individual ProteinsAlternative To Western Blotting And Mass Spectrometry

Article

Embed

ZUR WIEDERGABELISTE HINZUFÜGEN

Usage Statistics

Verwandte Videos

En optimeret protokol for elektroforetisk mobilitet Shift Assay brug af infrarød fluorescerende farvestof-mærkede oligonukleotider

Oligopeptidkonkurrenceanalyse for phosphoryleringsstedbestemmelse

Assay for fosforylering og mikrotubulus bindende sammen med lokalisering af Tau Protein i kolorektal cancerceller

Enkelt-molekyle Manipulation af G-quadruplexes af magnetiske pincet

Ved hjælp af trefarvet enkelt-molekyle FRET at studere sammenhængen af Protein interaktioner

Kovalente immobilisering af proteiner for enkelt molekyle kraft spektroskopi

Proteom-wide kvantificering af mærkning homogenitet på enkelt-molekyle niveau

OaAEP1-Medieret enzymatisk syntese og immobilisering af polymeriseret protein til enkeltmolekylet spektroskopi

En elektrokæminescensbaseret analyse af MeCP2-proteinvarianter

En In Vitro Single-Molecule Imaging Assay til analyse af cap-afhængige oversættelse kinetik

Read Article