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Laser Capture Microdissection of Glioma Subregions for Spatial and Molecular Characterization of Intratumoral Heterogeneity, Oncostreams, and Invasion

Microdissecção de Captura a Laser de Sub-regiões de Glioma para Caracterização Espacial e Molecular da Heterogeneidade Intratumoral, Oncostreams e Invasão

DOI:
10.3791/60939-v

•

09:09 min

•

April 12, 2020

•

, , , , , ,
1Dept. of Neurosurgery,University of Michigan Medical School, 2Dept. of Cell and Developmental Biology,University of Michigan Medical School, 3Dept. of Ophthalmology & Visual Science,University of Michigan Medical School, 4Rogel Cancer Center,University of Michigan Medical School

Kapitel

  • 00:05Introduction
  • 01:17Animal Perfusion and Brain Preservation
  • 02:01Glioma Brain Tumors Tissue Cryopreservation
  • 02:52Frozen Brain Tumor Tissue Sectioning
  • 03:58Cryopreserved Brain Tissue Section Fixation and Staining
  • 04:48Laser Capture Microdissection
  • 06:30Results: Representative RNA Quality Control and Library Preparation
  • 07:55Conclusion

Summary

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A microdissecção a laser (LMD) é uma técnica sensível e altamente reprodutível que pode ser usada para descobrir caminhos que mediam a heterogeneidade e invasão do glioma. Aqui, descrevemos um protocolo otimizado para isolar áreas discretas do tecido glioma usando LMD a laser seguido de análise transcritiva.

Tags

Laser MicrodissectionRNA SequencingIntratumor HeterogeneityMesenchymal CellsTumor InvasionTumor MorphologyMolecular ProfilesTumor ProgressionTherapeutic TargetsBioluminescencePerfusionCryopreservationSpatial CharacterizationMolecular Characterization

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