Journal
/
Biochemie
/
Стратегический скрининг и характеристика визуального GPCR-мини-G Белковый сигнальный комплекс для успешной кристаллизации
JoVE Journal
Biochemie
This content is Free Access.
JoVE Journal Biochemie
Strategic Screening and Characterization of the Visual GPCR-mini-G Protein Signaling Complex for Successful Crystallization
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Стратегический скрининг и характеристика визуального GPCR-мини-G Белковый сигнальный комплекс для успешной кристаллизации

DOI:
10.3791/60747-v

•

09:19 min

•

March 16, 2020

•

, , , , , ,
1Laboratory of Biomolecular Research,Paul Scherrer Institute, 2Department of Biology,ETH Zürich, 3Center for Radiopharmaceutical Sciences,Paul Scherrer Institute, 4Laboratory of Molecular Biology,Medical Research Council

Kapitel

  • 00:04Introduction
  • 00:45Cell Membrane Solubilization and Protein Extraction
  • 03:53UV-VIS Spectroscopy
  • 04:33Automated Size-Exclusion Chromatography of Rhodopsin and Rhodopsin Mini-Go Complex
  • 06:04Deglycosylation
  • 06:44Results: UV-VIS Spectroscopy, SEC, and SDS-PAGE
  • 08:34Conclusion

Summary

Automatische Übersetzung

Automatische Übersetzung

В настоящем докладе описывается скрининг различных моющих средств для подготовки визуального GPCR, родопсин, и его комплекс с мини-Go. Демонстрируются биохимические методы, характеризующие качество комплекса на разных этапах очистки. Этот протокол можно обобщить к другим комплексам протеина мембраны для их будущих структурных изучений.

Tags

Keywords: GPCRMini-G ProteinSignal TransductionMembrane Protein ComplexDetergent ScreeningCrystallizationHEK293 CellsAffinity Purification9-cis RetinalBuffer Exchange

Article

Embed

ZUR WIEDERGABELISTE HINZUFÜGEN

Usage Statistics

Verwandte Videos

check_url/de/60747?article_type=v

Белковый комплекс Affinity Capture от Cryomilled клеток млекопитающих
check_url/de/60747?article_type=v

Измерение сигнальной связи рецептора с G-белком с помощью радиомаркированного связывания GTP
check_url/de/60747?article_type=v

Биохимических и структурных характеристик углеводный транспорта субстрата белок-SP0092
check_url/de/60747?article_type=v

Растущий белок кристаллы с отдельных измерений с помощью автоматизированных кристаллизации, в сочетании с в Situ Динамическое рассеяние света
check_url/de/60747?article_type=v

Ионообменной хроматографии (IEX) в сочетании с мульти-угол рассеяния света (MALS) для разделения белков и характеристика
check_url/de/60747?article_type=v

Вывод белковых кристаллов с I3C с помощью случайного скрининга матрицы микросея
check_url/de/60747?article_type=v

Кристаллизация и структурное определение фермента: Субстратный комплекс по серийной кристаллографии в универсальном микрофлюидной чипе
check_url/de/60747?article_type=v

Измерение состава CD95 Индуцирующего Смерть Сигнального Комплекса и Обработка Прокаспазы-8 в этом Комплексе
check_url/de/60747?article_type=v

Высокопроизводительная кристаллизация белка с помощью микродиализа
check_url/de/60747?article_type=v

Высокопроизводительный скрининг для получения кристаллических попаданий для кристаллографии белка

Read Article