الفحص الاستراتيجي وتوصيف مجمع إشارات البروتين البصرية GPCR-mini-G للتبلور الناجح

JoVE Journal
Biochemie

This content is Free Access.

JoVE Journal Biochemie

Strategic Screening and Characterization of the Visual GPCR-mini-G Protein Signaling Complex for Successful Crystallization

Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

الفحص الاستراتيجي وتوصيف مجمع إشارات البروتين البصرية GPCR-mini-G للتبلور الناجح

DOI:

10.3791/60747-v

•

09:19 min

•

March 16, 2020

•

Filip Pamula², Jonas Mühle, Alain Blanc, Rony Nehmé, Patricia C. Edwards, Christopher G. Tate, Ching-Ju Tsai

¹Laboratory of Biomolecular Research,Paul Scherrer Institute, ²Department of Biology,ETH Zürich, ³Center for Radiopharmaceutical Sciences,Paul Scherrer Institute, ⁴Laboratory of Molecular Biology,Medical Research Council

Kapitel

00:04Introduction
00:45Cell Membrane Solubilization and Protein Extraction
03:53UV-VIS Spectroscopy
04:33Automated Size-Exclusion Chromatography of Rhodopsin and Rhodopsin Mini-Go Complex
06:04Deglycosylation
06:44Results: UV-VIS Spectroscopy, SEC, and SDS-PAGE
08:34Conclusion

Summary

Automatische Übersetzung

يصف هذا التقرير فحص المنظفات المختلفة لإعداد GPCR البصرية، رودوبسين، ومجمعها مع مصغرة G_o. يتم عرض الطرق الكيميائية الحيوية التي تميز نوعية المجمع في مراحل مختلفة أثناء التنقية. يمكن تعميم هذا البروتوكول على مجمعات بروتين غشاء أخرى لدراساتهم الهيكلية في المستقبل.

الفحص الاستراتيجي وتوصيف مجمع إشارات البروتين البصرية GPCR-mini-G للتبلور الناجح

•

•

•

Kapitel

Summary

Automatische Übersetzung

Tags

Article

Embed

ZUR WIEDERGABELISTE HINZUFÜGEN

Usage Statistics

Verwandte Videos

البروتين مجمع القبض على الانجذاب من خلايا الثدييات Cryomilled

قياس إشارة مستقبلات G- البروتينات عبر الملزمة غتب المسمى راديو

وصف SP0092 الركيزة-ملزمة-بروتين النقل الكربوهيدرات البيوكيميائية والهيكلية

تنامي البلورات البروتينية مع أبعاد متميزة باستخدام الآلي تبلور مقرونا في الموقع الحيوي تشتت الضوء

التبادل الأيوني اللوني (المستوى) بالإضافة إلى تشتت الضوء زاوية المتعددة (مالس) لفصل البروتين وتوصيف

اشتقاق بلورات البروتين مع I3C باستخدام عشوائي Microseed مصفوفة الفرز

التبلور والتصميم الهيكلي للانزيم: مجمع الركيزة بواسطة البلورات التسلسلية في رقاقة Microfluidic متعددة الاستخدامات

قياس تكوين CD95 الموت المسببة للإشارات المعقدة ومعالجة Procaspase-8 في هذا المجمع

تبلور البروتين عالي الإنتاجية عن طريق غسيل الكلى

فحص عالي الإنتاجية للحصول على نتائج بلورية لعلم بلورات البروتين

Read Article