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Isolation of Region-specific Microglia from One Adult Mouse Brain Hemisphere for Deep Single-cell RNA Sequencing

Isolamento da Microglia específica da Região de um hemisfério cerebral de camundongo adulto para sequenciamento profundo de RNA unicelular

DOI:
10.3791/60347-v

•

09:49 min

•

December 03, 2019

•

,
1Department of Neurobiology,Stanford University School of Medicine

Kapitel

  • 00:05Titel
  • 00:43Brain Region Dissection
  • 01:43Mechanical Tissue Dissociation
  • 02:40Myelin Removal
  • 04:25Staining for Fluorescence-activated Cell Sorting
  • 05:18Index FACS Sorting
  • 05:46Single-cell RNA-sequencing Library Preparation
  • 07:17Results: Isolation of Region-Specific Microglia for Deep Single-Cell RNA Sequencing
  • 09:16Conclusion

Summary

Automatische Übersetzung

Automatische Übersetzung

Nós fornecemos um protocolo para o isolamento da microglia de diferentes regiões dissecadas de um hemisfério cerebral de camundongo adulto, seguido de preparação de biblioteca semi-automatizada para sequenciamento profundo de RNA unicelular de transcrições completas. Este método ajudará a elucidar a heterogeneidade funcional da microglia na saúde e na doença.

Tags

MicrogliaSingle-cell RNA SequencingBrain RegionsCell IsolationCell SeparationDounce HomogenizerMagnetic SeparationRNA ExtractionLibrary PreparationDeep Sequencing

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