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Radiomarcação e quantificação dos níveis celulares de Fosfoinositídeos por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência acoplado Fluxo de Cintilação
Kapitel
- 00:05Titel
- 00:58Yeast Cell Culture and Radiolabeling of Phosphoinositides
- 02:58Deacylation and Extraction of the Radiolabeled Phosphoinositides
- 05:14Separation of Tritium-labeled Glycero-inositides by High Pressure Liquid Chromatography (HPLC)
- 07:15Data Analysis
- 08:55Results: HPLC Analysis of Radiolabeled Phosphoinositides
- 09:55Conclusion
Fosfoinositídeos estão sinalizando lipídios, cuja abundância relativa muda rapidamente em resposta a vários estímulos. Este artigo descreve um método para medir a abundância de fosfoinositídeos por meio de rotulagem metabolicamente células com 3 H- mio-inositol, seguido por extracção e desacilação. Extraídos glicero-inositides são então separados por cromatografia líquida de alto desempenho e quantificadas por cintilação fluxo.
