JoVE Science Education
Entwicklungsbiologie
Zum Anzeigen dieser Inhalte ist ein JoVE-Abonnement erforderlich.  Melden Sie sich an oder starten Sie Ihre kostenlose Testversion.
JoVE Science Education Entwicklungsbiologie
Whole-Mount In Situ Hybridization
  • 00:00Übersicht
  • 00:56Concepts Behind In Situ Hybridization
  • 02:27Target Identification and Probe Development
  • 05:15Applications
  • 07:17Summary

הרכבה מלאה בהכלאה במקום

English

Teilen

Übersicht

הרכבה מלאה בהכלאה במקום (WMISH) היא טכניקה נפוצה המשמשת להדמיית המיקום של RNAs מבוטא בעוברים. בתהליך זה, בדיקות RNA המיוצרות באופן סינתטי קשורות תחילה באופן משלים, או “היברידיות”, לתעתיקים של גני היעד. אימונוהיסטוכימיה או פלואורסצנטיות משמשת לאחר מכן לזיהוי היברידיות RNA אלה, וחושף דפוסים מרחביים וטמפורליים של ביטוי גנים. שלא כמו טכניקות היברידיות מקומיות מסורתיות, הדורשות מקטעי רקמות דקות שתמונותיהם יצטרכו להיות להרכיב מחדש חישובית, טכניקת ההר שלם מאפשרת להעריך דפוסי ביטוי גנים על כל העובר או המבנה.

וידאו זה יציג את המושגים הבסיסיים של כתמי הרכבה שלמה ויפרט את הצעדים הפרוצדורליים העיקריים, כולל עיצוב וייצור של בדיקה, קיבוע והכתמה של עוברים וזיהוי אותות לאחר הכלאה. לאחר מכן הצופים ילמדו על האופן שבו ביולוגים התפתחותיים מיישמים את WMISH במחקרים הנוכחיים.

Verfahren

הרכבה מלאה בהכלאה במקום היא טכניקה רבת עוצמה המאפשרת למדענים להבין את הבסיס המולקולרי של התפתחות עוברית. “הר שלם” מציין כי העובר כולו ישמש, לא רק פרוסת רקמה. ” במקום ” הוא ביטוי לטינישפירושו”בעמדה”. ולבסוף, “הכלאה” מתייחסת לכריכה המשלימה של מולקולת RNA המיוצרת באופן סינתטי לתעתיק mRNA ב…

Offenlegungen

No conflicts of interest declared.

Transkript

Tags

Cite This
JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Whole-Mount In Situ Hybridization. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

Verwandte Videos