Drosophila IHC larvale

L’immunoistochimica (IHC) è una tecnica utilizzata per visualizzare la presenza e la posizione delle proteine all’interno dei tessuti. Le larve di Drosophila sono particolarmente suscettibili all’IHC a causa della facilità con cui possono essere lavorate per la colorazione. Inoltre, le larve sono trasparenti, il che significa che alcuni tessuti possono essere visualizzati senza la necessità di dissezione.

In IHC, le proteine vengono infine rilevate con anticorpi che si legano specificamente agli “epitopi” all’interno della proteina di interesse. Al fine di preservare questi epitopi, i tessuti devono essere fissati prima della colorazione. Inoltre, affinché gli anticorpi penetrino nelle membrane, le cellule devono essere permeabilizzate con detergenti. Questo articolo video offre una visione dettagliata dei reagenti, degli strumenti e delle procedure necessarie per la colorazione dei tessuti larvali sezionati, comprese le fasi di fissazione, blocco e colorazione. È stata inoltre presentata una dimostrazione delle tecniche di montaggio dei tessuti per la microscopia a fluorescenza. Infine, vengono forniti esempi dell’ampia gamma di applicazioni per queste tecniche (e alcune variazioni su di esse).