Il termine “trasformazione” si riferisce all’ingestione cellulare di DNA estraneo. In natura, la trasformazione può avvenire in alcuni tipi di batteri. In biologia molecolare, tuttavia, la trasformazione è indotta artificialmente attraverso la creazione di pori nelle pareti cellulari batteriche. Le cellule batteriche che sono in grado di prendere il DNA dall’ambiente sono chiamate cellule competenti. Le celle elettrocompetenti possono essere prodotte in laboratorio e la trasformazione di queste cellule può essere ottenuta attraverso l’applicazione di un campo elettrico che crea pori nella parete cellulare attraverso i quali il DNA può passare.
Il video spiega le apparecchiature utilizzate nell’elettroporazione come un elettroporatore e una cuvetta di elettroporazione. Il video passa anche attraverso una procedura passo-passo su come creare celle elettrocompetenti e celle elettroporate di interesse.
Viene anche menzionata la previsione del successo di una trasformazione di un esperimento, osservando la costante di tempo, nonché l’importanza di rimuovere il sale dalle soluzioni durante l’elettroporazione.
Verfahren
La trasformazione batterica è un processo naturale, in cui i batteri ingeriscono DNA estraneo e poi lo amplificano o lo clonano. In laboratorio, questo processo può essere indotto artificialmente, utilizzando impulsi di campo elettrico ad alta tensione per creare pori nella membrana cellulare batterica, attraverso i quali può passare il DNA plasmidico. L’elettroporazione si riferisce a questo metodo e il seguente video ne dimostrerà i principi, la procedura passo-passo e le applicazioni. <div id="script_…