Le terme “transformation” fait référence à l’ingestion cellulaire d’ADN étranger. Dans la nature, une transformation peut avoir lieu dans certain types de bactéries. En biologie moléculaire, cependant, la transformation est artificiellement induite à travers la création de pores dans les murs de la cellule bactérienne. Les cellules bactériennes qui sont capables de prendre l’ADN depuis l’environnement sont appelées cellules compétentes. Les cellules électrocompétentes peuvent être produites en laboratoire et la transformation de ces cellules peut être réalisée via l’application d’un champ électrique qui crée des pores dans le mur de la cellule à travers lesquels l’ADN peut passer.
La vidéo explique l’équipement utilisé en électroporation tel qu’un électroporateur et une cuvette d’électroporation. La vidéo passe aussi en revue une procédure pas à pas à propos de comment créer des cellules électrocompétentes et des cellules électroporées d’intérêt. La prédiction du succès d’une transformation, par l’observation du temps constant, ainsi que l’importance de retrait du sel de la solution lors de l’électroporation, sont aussi mentionnés.
Verfahren
La transformation bactérienne est un processus apparaissant naturellement, dans lequel les bactéries ingèrent un ADN étranger et ensuite l’amplifient ou le clonent. Au labo, ce processus peut être artificiellement induit, en utilisant des impulsions de champ électrique haute tension pour créer des pores dans la membrane de la cellule bactérienne, à travers lesquelles l’ADN plasmidique peut passer. Le terme électroporation fait référence à cette méthode et cette vidéo montre ses principes, une procédure pas…