Mutagenesis and Functional Selection Protocols for Directed Evolution of Proteins in <em>E. coli</em>

Chris Troll; David Alexander; Jennifer Allen; Jacob Marquette; Manel Camps

doi:10.3791/2505

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Biologie

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Mutagénesis y funcional protocolos de selección de la evolución dirigida de proteínas en E. coli</em

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Biologie

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Mutagenesis and Functional Selection Protocols for Directed Evolution of Proteins in E. coli

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Mutagénesis y funcional protocolos de selección de la evolución dirigida de proteínas en E. coli</em

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09:01 min

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March 16, 2011

DOI:

10.3791/2505-v

DOI:

10.3791/2505-v

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09:01 min

March 16, 2011

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Chris Troll¹, David Alexander¹, Jennifer Allen¹, Jacob Marquette¹, Manel Camps¹

¹Department of Microbiology & Environmental Toxicology,University of California Santa Cruz – UCSC

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Aquí se demuestra un protocolo sencillo para crear una biblioteca de mutantes al azar de una secuencia objetivo determinado. Se muestra cómo este método, que se realiza en vivo en Escherichia coli, se pueden acoplar con la selección funcional para desarrollar nuevas actividades enzimáticas.

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Mutagenesis Functional Selection Directed Evolution Proteins E. Coli Mutant Libraries ColE1 Plasmid DNA Polymerase I Mutator Strain Solid Media Mutation Frequency Labeling PCR Cloning Sequence Space Exploration Biochemical Activities

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Troll, C., Alexander, D., Allen, J., Marquette, J., Camps, M. Mutagenesis and Functional Selection Protocols for Directed Evolution of Proteins in E. coli. J. Vis. Exp. (49), e2505, doi:10.3791/2505 (2011).

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