Summary

Studien zur entzündungshemmenden Wirkung von Xiaoyao-Pillen bei der Behandlung von postmenopausaler Osteoporose bei Mäusen

Published: August 23, 2024
doi:

Summary

Postmenopausale Osteoporose hat sich zu einem globalen Problem der öffentlichen Gesundheit entwickelt. Das Ziel dieser Studie ist es, die therapeutischen Wirkungen und die damit verbundenen Mechanismen der Xiaoyao-Pillen der traditionellen chinesischen Medizin bei dieser Erkrankung zu untersuchen.

Abstract

Osteoporose ist eine häufige Stoffwechselerkrankung bei älteren und postmenopausalen Frauen, die im Frühstadium keine offensichtlichen Symptome aufweist. In den letzten Stadien dieser Erkrankung sind die Patienten anfällig für Frakturen, die ihre Gesundheit und Lebensqualität ernsthaft beeinträchtigen können. Der weltweite Anstieg der Lebenserwartung hat Osteoporose zu einem globalen Problem gemacht. Die Xiaoyao-Pillen wurden zuvor
Wird bei der Behandlung von Depressionen verwendet. Darüber hinaus schien das Medikament eine östrogenähnliche Aktivität zu haben, die die Expression von ALP, einem frühen Osteoblasten-spezifischen Marker, und COL-1, einem Hauptbestandteil der extrazellulären Knochenmatrix, beeinflusste. Xiaoyao-Pillen wurden auf ihre Auswirkungen auf die postmenopausale Osteoporose (PMOM) bei Mäusen untersucht. Die Zielinformationen jeder pflanzlichen Komponente der Xiaoyao-Pillen wurden über die Datenbank der Systempharmakologie der Traditionellen Chinesischen Medizin (TCMSP) abgerufen. Informationen von GeneCards, OMIM, PharmGkb, TTD, DrugBank und anderen Websites wurden verwendet, um das regulatorische Netzwerk des Kräuterkomplexes über Cytoscape und das String-Netzwerk zu konstruieren und die Proteininteraktionen zu bewerten. Die Mäuse wurden ovariektomiert und mit hohen und niedrigen Dosen von Xiaoyao-Pillen behandelt, und diese wurden mit Kontrollen verglichen. Ihre Symptome wurden durch Immunzytochemie des Knochengewebes beurteilt. Die Ergebnisse deuteten darauf hin, dass Xiaoyao-Pillen die Fähigkeit hatten, die Symptome von PMOM bei ovariektomierten Mäusen über den IL-17-Signalweg zu lindern. Dieses Medikament hat das Potenzial, ein neuartiges Therapeutikum zur Behandlung von Osteoporose zu werden.

Introduction

Die Weltgesundheitsorganisation (WHO) definiert Osteoporose (OP) als eine Krankheit, die durch eine Abnahme der Knochenmasse und eine Verschlechterung der Mikroarchitektur des Knochengewebes gekennzeichnet ist, was zu einer Zunahme der Knochenbrüchigkeit und damit zu einem erhöhten Frakturrisiko führt1. Die klinische Bedeutung der Osteoporose besteht darin, dass sie zu Frakturen führen kann, die mit hoher Mortalität, Morbidität und wirtschaftlichen Kosten verbunden sind2. Postmenopausale Osteoporose (PMOP) wird durch eine Abnahme des Östrogenspiegels bei Frauen nach der Menopause verursacht, was zu einer Erhöhung der Osteoklastenaktivität führt, was zu Knochenverlust und Zerstörung der Knochenmikrostruktur führt. Dies führt häufig zu Osteoporose mit schwerwiegenden Auswirkungen auf die Gesundheit3. Zu den derzeitigen Therapien für PMOP gehören Östrogenersatztherapien, Bisphosphonate und Parathormon, aber sie können unterschiedlich starke Nebenwirkungen, unzureichende langfristige Compliance und hohe Kosten haben4. Daher ist eine erschwingliche pflanzliche Medizin für einen großen Teil der Bevölkerung eine praktikable Alternative.

Xiaoyao-Pillen sind im Chinesischen Arzneibuch5 enthalten und enthalten acht pflanzliche Bestandteile, darunter Chai Hu, Angelica sinensis, Weiße Paeonia lactiflora, Atractylodes macrocephala, Poria cocos, Menthae Herba, Süßholz und frischer Ingwer. Alle diese Kräuter sind dafür bekannt, dass sie die Leber entgiften und die Milz stärken, das Blut nähren und den Menstruationszyklus regulieren, und die Mischung wurde auch zur Behandlung von Depressionen verwendet6. Die Rolle von Xiaoyao-Pillen bei Osteoporose ist jedoch unklar.

Frühe Studien deuten darauf hin, dass Entzündungen zu Knochenschwund führen können7 und dass der mit diesem Prozess verbundene Rückgang der Knochendichte durch die Menopause beschleunigt werden kann. Darüber hinaus besteht ein starker Zusammenhang zwischen der Entwicklung von Osteoporose und Entzündungen. Der Entzündungsfaktor Interleukin-17 (IL-17) ist ein entzündungsfördernder Faktor, der von Th17-Zellen, einer Untergruppe der CD4+ T-Lymphozyten, sezerniert wird. Diese Zellen werden mit mehreren chronischen Entzündungszuständen in Verbindung gebracht und spielen eine wichtige Rolle bei der Entwicklung der Knochenzerstörung bei rheumatoider Arthritis8. Darüber hinaus stimuliert IL-17 den nuklearen Faktor-κ B-Ligandenrezeptor-Aktivator (RANKL), der die Osteoklastogenese reguliert, was zu einer stärkeren Knochenresorption als zur Knochenbildung führt9. IL-17 stimuliert die Expression anderer osteoklastogener Zytokine wie TNFα, IL-1, IL-6 und IL-8. Es hat die Fähigkeit, mit anderen Entzündungsfaktoren zu synergistieren, was es zu einem wichtigen Entzündungseffektor macht10.

Studien haben auch einen Zusammenhang zwischen Xiaoyao-Pillen und Entzündungen gezeigt. Shi et al.11 und Fang et al.12 haben kürzlich bestätigt, dass Xiaoyao-Pillen die Spiegel von IL-6 bzw. TNF-α senken können. In einer anderen Studie zur stoffwechselassoziierten Steatohepatitis wurde berichtet, dass Xiaoyao-Pillen die Expression von Propionsäure hochregulieren können, was wiederum die Expression von TNF-α hemmt und eine entzündungshemmende Wirkung ausübt13. Derzeit ist jedoch nicht bekannt, ob Xiaoyao-Pillen die Entwicklung von PMOM regulieren können, indem sie eine Entzündungsreaktion über IL-17 vermitteln, was das Ziel dieser Studie war.

Diese Studie sagte die Überschneidung der Ziele von Xiaoyao-Pillen und Osteoporose-bezogenen Genen durch Netzwerkpharmakologie und Bioinformatik-Analyse voraus und analysierte die sich überschneidenden Gene für Proteininteraktionen, GO und KEGG. Basierend auf den vorhergesagten Ergebnissen kann die Expression von Act1 und IL-6, den Schlüsselproteinen im IL-17-Signalweg, beobachtet werden14,15 sowie die Knochenumsatzmarker alkalische Phosphatase (ALP) und Kollagen Typ I (COL-1), um die therapeutische Wirksamkeit der Xiaoyao-Pillen im PMOM-Mausmodell zu beobachten.

Protocol

Die Ethikkommission für Versuchstiere der Medizinischen Universität Youjiang für Nationalitäten hat das Studienprotokoll genehmigt (Zulassungsnummer: 2022101502). Weibliche C57BL/6-Mäuse im Alter von 10-12 Wochen, SPF-Klasse und Körpergewicht (22 ± 2) g, wurden im SPF Class Animal Experiment Center der Youjiang Medical University for Nationalities untergebracht. Die Versuchstiere wurden bei einer Temperatur von 24-26 °C und einer relativen Luftfeuchtigkeit von 55 % bis 60 % gehalten. <st…

Representative Results

Wirkstoffe und Wirkungsziele der Xiaoyao-PillenDurch die Suche in der TCMSP-Datenbank und das Screening nach den Kriterien der oralen Bioverfügbarkeit (OB) ≥ 30% und der arzneimittelähnlichen Eigenschaften (DL) ≥ 0,18 wurden 125 Wirkstoffe in Xiaoyao-Pillen gefunden. Die Zutaten 6, 4, 9, 13, 2, 6, 83 und 2 stammten von White Paeonia lactiflora, Atractylodes macrocephala, Menthae herba, Chaihu, Angelica sinensis, Poria cocos, Süßholz und Ingwer. Ein…

Discussion

Laut Statistik verursacht Osteoporose in den Vereinigten Staaten jedes Jahr 1,5 Millionen Frakturen, und die überwiegende Mehrheit davon tritt bei postmenopausalen Frauen auf27. Mit der Zunahme der alternden Bevölkerung wird prognostiziert, dass die Mehrheit der zukünftigen Hüftfrakturen weltweit in Asien auftreten wird und dass bis 2050 die Gesamtzahl dieser Frakturen weltweit 8,2 Millionen erreichen wird28. Die Kosten für die Vorbeugung von Frakturen sind fast gleich…

Offenlegungen

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Das Baise City Scientific Research and Technology Development Program (20224128) unterstützte diese Arbeit. Die Autoren danken Dr. Dev Sooranna vom Imperial College London und YMUN für die Bearbeitung des Manuskripts. YYX und ZYW trugen zu gleichen Teilen zu dieser Studie bei.

Materials

1ml Sampler Guangxi Beilunhe Medical Industrial Group Co. JYQ001 For anesthesia in mice
4%polyformaldehyde Beijing Solarbio Science & Technology Co.,Ltd. P1110 For tissue fixation
6-0 absorbable suture (angled needle) Shanghai Pudong Jinhuan Medical Supplies Co. HZX-06 For postoperative suturing
Absorbent cotton ball Winner MIANQIU-500g For sterilization and hemostasis
Adhesive slides Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co. 188105 For tissue sectioning
Amobarbital Sigma Aldrich (Shanghai) Trading Co. A-020-1ML For anesthesia in mice
Bluing Solution Beijing Solarbio Science & Technology Co.,Ltd. G1866 Blue coloration of the nuclei of cells after the action of hematoxylin differentiation solution
C57BL/6 mice Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd. (SCXK 2033-0063) For use in animal experiments
Carbon steel surgical blades Premier Medical Equipment Co. SP239 For mouse surgery
CIKS/TRAF3IP2 Rabbit pAb BIOSS ANTIBODIES bs-6202R Binds to Act1 in tissues
Cole's Hematoxylin Solution (For Conventional Stain) Beijing Solarbio Science & Technology Co.,Ltd. G1140 For staining paraffin sections
Collagen Type I Polyclonal antibody proteintech 14695-1-AP Binds to COL-1 in tissues
DAB Substrate kit,20x Beijing Solarbio Science & Technology Co.,Ltd. DA1010 For tissue color development
Disposable surgical sheet 50*60CM Nanchang Xuhui Medical Equipment Co. SP4529777 For mouse surgery
EDTA decalcification solution (pH 7.2) Beijing Solarbio Science & Technology Co.,Ltd. E1171-500ml For tissue decalcification
Enhanced Endogenous Peroxidase Bloching Buffer Beyotime Biotechnology P0100B Sequestration of tissue or cellular endogenous peroxidases
Environmentally friendly dewaxing clear liquid Servicebio G1128-1L For dewaxing paraffin sections
Ethyl Alcohol CHRON CHEMICALS 64-17-5 (CAS) For dehydration of paraffin sections
General Purpose Antibody Diluent Epizyme Biotech PS119L For antibody dilution
Hematoxylin Differentiation Solution Servicebio G1039-500ML For differentiation after hematoxylin staining and removal of excessively bound and non-specifically adsorbed dye from tissues
Hematoxylin Eosin (HE) Staining Kit Beijing Solarbio Science & Technology Co.,Ltd. G1120-3*100ml For tissue staining
High quality stainless steel surgical knife handle Premier Medical Equipment Co. SP0088 For mouse surgery
HRP-conjugated Affinipure Goat Anti-Rabbit IgG(H+L) proteintech SA00001-2 Binds to primary antibody and amplifies signal
IL-17A Polyclonal antibody proteintech 13082-1-AP Binds to IL-17 in tissues
IL-6 Polyclonal antibody proteintech 21865-1-AP Binds to IL-6 in tissues
Immunohistochemistry pen Beijing Zhongshan Jinqiao Biotechnology Co. ZLI-9305 (YA0310) For drawing circles in immunohistochemistry
Medical surgical suture Non-absorbent (ball) 5-0 3.5m Yangzhou Yuanlikang Medical Equipment Co. FHX-5-2 For postoperative suturing
Medical Suture Needles Angle Needles 4*10 3/8 Chaohu Binxiong Medical Equipment Co. FHZ612-4 For postoperative suturing
Neutral Balsam Beijing Solarbio Science & Technology Co.,Ltd. G8590 As a slice sealer
PBS(1X) Shenzhen Mohong Technology Co.,Ltd B0015 Buffer for slide washing and partial solution dilution
Protein Free Rapid Blocking Buffer (1X) Epizyme Biotech PS108P Avoiding non-specific binding of proteins
Rabbit Anti-Bone Alkaline Phosphatase antibody BIOSS ANTIBODIES bs-6292R Binds to alkaline phosphatase in tissues
Saline Affiliated Hospital Youjiang Medical University For Nationalities LHN500 For animals by gavage
Shaving/Electric clippers HANGZHOU HUAYUAN PET PRODUCTS CO., LTD. DTJ-002 For shaving mice
Stainless Steel Medical Needle Holder 14cm Coarse Needle Premier Medical Equipment Co. SP784 For mouse surgery
Stainless Steel Ophthalmic Forceps 10.5cm Curved (No Hook) Zhuoyouyue YKNWW-10.5 For mouse surgery
Stainless Steel Ophthalmic Scissors/Surgical Scissors 10CM Straight Tip Premier Medical Equipment Co. ZYJD-10-ZJ For mouse surgery
Stainless Steel Tip Gastric Needle 12 Gauge 55mm Elbow GWJ-12-55W For use in mice by gavage
Tris-EDTA Antigen Repair Fluid (50x) proteintech PR30002 For antigen repair of paraffin sections
Wooden dissecting board 25*16cm JP16*24 For mouse surgery
Xiaoyao pills Jiuzhitang Co.,Ltd. YPG-041 For animal drug delivery
Others
R 4.3.1 Data processing
Cytoscape3.9.1 National Resource for Network Biology Building a regulatory network for traditional Chinese medicine
ImageJ 1.54f National Institutes of Health Image processing for immunohistochemistry results
Adobe Photoshop 24.0.0 Adobe For image combination
GraphpadPrism 9.5 GraphPad Software Statistical analysis of data
cellsens Dimension OLYMPUS For slicing and photographing
OLYMPUS BX53 OLYMPUS For HE staining and immunohistochemical section photography

Referenzen

  1. Kanis, J. A., Melton, L. J., Christiansen, C., Johnston, C. C., Khaltaev, N. The diagnosis of osteoporosis. J Bone Miner Res. 9 (8), 1137-1141 (1994).
  2. Amin, U., Mcpartland, A., O’sullivan, M., Silke, C. An overview of the management of osteoporosis in the aging female population. Womens Health (Lond). 19, 17455057231176655 (2023).
  3. Słupski, W., Jawień, P., Nowak, B. Botanicals in postmenopausal osteoporosis. Nutrients. 13 (5), 1609 (2021).
  4. Sharma, A., et al. Understanding the mechanistic potential of plant based phytochemicals in management of postmenopausal osteoporosis. Biomed Pharmacother. 163, 114850 (2023).
  5. . Pharmacopoeia of people’s republic of china. Chinese Pharmacopeia Commission. , (2020).
  6. Ji, Y., et al. Xiaoyao pills ameliorate depression-like behaviors and oxidative stress induced by olfactory bulbectomy in rats via the activation of the pik3ca-akt1-nfe2l2/bdnf signaling pathway. Front Pharmacol. 12, 643456 (2021).
  7. Lencel, P., Magne, D. Inflammaging: The driving force in osteoporosis. Med Hypotheses. 76 (3), 317-321 (2011).
  8. Daoussis, D., Andonopoulos, A. P., Liossis, S. N. Wnt pathway and il-17: Novel regulators of joint remodeling in rheumatic diseases. Looking beyond the rank-rankl-opg axis. Semin Arthritis Rheum. 39 (5), 369-383 (2010).
  9. Amarasekara, D. S., et al. Regulation of osteoclast differentiation by cytokine networks. Immune Netw. 18 (1), e8 (2018).
  10. Amatya, N., Garg, A. V., Gaffen, S. L. Il-17 signaling: The yin and the yang. Trends Immunol. 38 (5), 310-322 (2017).
  11. Shi, B., et al. Xiaoyao pills prevent lipopolysaccharide-induced depression by inhibiting inflammation and protecting nerves. Front Pharmacol. 10, 1324 (2019).
  12. Fang, Y., et al. Xiaoyao pills attenuate inflammation and nerve injury induced by lipopolysaccharide in hippocampal neurons in vitro. Neural Plast. 2020, 8841332 (2020).
  13. Zhang, X., et al. Effect of xiaoyao pills on fecal endogenous metabolites in rats with metabolism-associated steatohepatitis. J Shanxi Med University. 55, 36-43 (2024).
  14. Xiao, J., et al. Il-17 in osteoarthritis: A narrative review. Open Life Sci. 18 (1), 20220747 (2023).
  15. Mcgeachy, M. J., Cua, D. J., Gaffen, S. L. The il-17 family of cytokines in health and disease. Immunity. 50 (4), 892-906 (2019).
  16. Ru, J., et al. Tcmsp: A database of systems pharmacology for drug discovery from herbal medicines. J Cheminform. 6, 13 (2014).
  17. Wang, T., et al. Exploring the mechanism of luteolin by regulating microglia polarization based on network pharmacology and in vitro experiments. Sci Rep. 13 (1), 13767 (2023).
  18. UniProt Consortium. UniProt: The universal protein knowledgebase in 2023. Nucleic Acids Res. 51 (D1), D523-D531 (2023).
  19. Barshir, R., et al. Genecarna: A comprehensive gene-centric database of human non-coding rnas in the genecards suite. J Mol Biol. 433 (11), 166913 (2021).
  20. Wang, T., Jiang, X., Lu, Y., Ruan, Y., Wang, J. Identification and integration analysis of a novel prognostic signature associated with cuproptosis-related ferroptosis genes and relevant lncrna regulatory axis in lung adenocarcinoma. Aging (Albany NY). 15 (5), 1543-1563 (2023).
  21. Amberger, J. S., Bocchini, C. A., Scott, A. F., Hamosh, A. Omim.Org: Leveraging knowledge across phenotype-gene relationships. Nuc Acid Res. 47 (D1), D1038-D1043 (2019).
  22. Whirl-Carrillo, M., et al. An evidence-based framework for evaluating pharmacogenomics knowledge for personalized medicine. Clin Pharmacol Ther. 110 (3), 563-572 (2021).
  23. Zhou, Y., et al. Ttd: Therapeutic target database describing target druggability information. Nucleic Acids Res. 52 (D1), D1465-D1477 (2024).
  24. Knox, C., et al. Drugbank 6.0: The drugbank knowledgebase for 2024. Nuc Acid Res. 52 (D1), D1265-D1275 (2024).
  25. Rendi, M. H., Muehlenbachs, A., Garcia, R. L., Boyd, K. L. . Comparative anatomy and histology a mouse and human atlas. Chapter 17, 253-284 (2012).
  26. Chen, S. X. R. B. X. . Pharmacology experimental methodology. , (2002).
  27. Black, D. M., Rosen, C. J. Clinical practice. Postmenopausal osteoporosis. N Engl J Med. 374 (3), 254-262 (2016).
  28. Cummings, S. R., Melton, L. J. Epidemiology and outcomes of osteoporotic fractures. Lancet. 359 (9319), 1761-1767 (2002).
  29. Walker, M. D., Shane, E. Postmenopausal osteoporosis. N Engl J Med. 389 (21), 1979-1991 (2023).
  30. Hwang, Y. H., Jang, S. A., Lee, A., Kim, T., Ha, H. Poria cocos ameliorates bone loss in ovariectomized mice and inhibits osteoclastogenesis in vitro. Nutrients. 12 (5), 1383 (2020).
  31. Ling, X., et al. Shu-di-huang and gan-cao herb pair restored the differentiation potentials of mesenchymal stem progenitors in treating osteoporosis via downregulation of nf-κb signaling pathway. Evid Based Complement Alternat Med. 2021, 7795527 (2021).
  32. Zhou, L. P., et al. protective effects of danggui buxue tang alone and in combination with tamoxifen or raloxifene in vivo and in vitro. Front Pharmacol. 9, 779 (2018).
  33. Huangfu, L., Li, R., Huang, Y., Wang, S. The il-17 family in diseases: From bench to bedside. Signal Transduct Target Ther. 8 (1), 402 (2023).
  34. Majumder, S., Mcgeachy, M. J. Il-17 in the pathogenesis of disease: Good intentions gone awry. Annu Rev Immunol. 39, 537-556 (2021).
  35. Le Goff, B., et al. Implication of il-17 in bone loss and structural damage in inflammatory rheumatic diseases. Mediators Inflamm. 2019, 8659302 (2019).
  36. Zhang, J. R., et al. Different modulatory effects of il-17, il-22, and il-23 on osteoblast differentiation. Mediators Inflamm. 2017, 5950395 (2017).
  37. Peng, R., et al. Il-17 promotes osteoclast-induced bone loss by regulating glutamine-dependent energy metabolism. Cell Death Dis. 15 (2), 111 (2024).
  38. Sato, K., et al. Th17 functions as an osteoclastogenic helper t cell subset that links t cell activation and bone destruction. J Exp Med. 203 (12), 2673-2682 (2006).
  39. Shetty, S., Kapoor, N., Bondu, J. D., Thomas, N., Paul, T. V. Bone turnover markers: Emerging tool in the management of osteoporosis. Indian J Endocrinol Metab. 20 (6), 846-852 (2016).
  40. Selvaraj, V., Sekaran, S., Dhanasekaran, A., Warrier, S. Type 1 collagen: Synthesis, structure and key functions in bone mineralization. Differentiation. 136, 100757 (2024).
  41. Hu, T., et al. Xiaoyao san attenuates hepatic steatosis through estrogen receptor α pathway in ovariectomized apoe-/- mice. J Ethnopharmacol. 282, 114612 (2022).
  42. Ramchand, S. K., Leder, B. Z. Sequential therapy for the long-term treatment of postmenopausal osteoporosis. J Clin Endocrinol Metab. 109 (2), 303-311 (2024).
  43. Schroeder, R. J., et al. Oral therapeutics post menopausal osteoporosis. Cureus. 15 (8), e42870 (2023).
  44. Patel, D., Gorrell, C., Norris, J., Liu, J. A narrative review of the pharmaceutical management of osteoporosis. Ann Jt. 8, 25 (2023).
  45. Minisola, S. Denosumab discontinuation: Covid-19 pandemic and beyond. JBMR Plus. 8 (7), ziae046 (2024).
  46. ACOG Committee on Clinical Practice Guidelines-Gynecology. Management of postmenopausal osteoporosis: ACOG clinical practice guideline no. 2. Obstet Gynecol. 139 (4), 698-717 (2022).
  47. Peng, Z., Xu, R., You, Q. Role of traditional Chinese medicine in bone regeneration and osteoporosis. Front Bioeng Biotechnol. 10, 911326 (2022).
  48. Li, J., et al. Clinical practice of traditional Chinese medicine for the treatment of postmenopausal osteoporosis: A literature review. Climacteric. 25 (6), 562-569 (2022).
  49. Zhang, N. D., et al. Traditional Chinese medicine formulas for the treatment of osteoporosis: Implication for antiosteoporotic drug discovery. J Ethnopharmacol. 189, 61-80 (2016).
  50. Ping, R., et al. Identifying the effective combination of acupuncture and traditional Chinese medicinal herbs for postmenopausal osteoporosis therapy through studies of their molecular regulation of bone homeostasis. J Tradit Chin Med. 44 (1), 212-219 (2024).
  51. Li, B., Jiang, C., Zhan, X. Combined therapy of yishen zhuanggu decoction and caltrate d600 alleviates postmenopausal osteoporosis by targeting foxo3a and activating the wnt/β-catenin pathway. Evid Based Complement Alternat Med. 2022, 7732508 (2022).

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Diesen Artikel zitieren
Yang, Y., Zhang, Y., Kuang, S., Zhang, Y., Zhou, L., Mao, B., Xie, J. Studies on the Anti-Inflammatory Effect of Xiaoyao Pills in The Treatment of Postmenopausal Osteoporosis in Mice. J. Vis. Exp. (210), e67051, doi:10.3791/67051 (2024).

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