Summary

Nagetier untere Vena Cava Venoplastik Ballonmodell

Published: May 24, 2024
doi:

Summary

Das Protokoll stellt ein Überlebensmodell für Nagetiere vor, um Venoplastik-Ballon-Eingriffe (VB) in nicht-thrombotischen, thrombotischen und postthrombotischen tiefen Venen zu testen.

Abstract

Die Ballonvenoplastik ist eine häufig verwendete klinische Technik zur Behandlung von tiefen Venenstenosen und -verschlüssen als Folge von Traumata, angeborenen anatomischen Anomalien, akuter tiefer Venenthrombose (TVT) oder Stents. Die chronische tiefe Venenobstruktion ist histopathologisch durch Thrombose, Fibrose oder beides gekennzeichnet. Derzeit gibt es keine direkte Behandlung, um diese pathologischen Prozesse zu bekämpfen. Daher ist ein zuverlässiges in vivo Tiermodell notwendig, um neuartige Interventionen zu testen. Das Venoplastik-Ballonmodell (VBM) für das Überleben der Vena cava inferior (IVC) von Nagetieren ermöglicht die Untersuchung der Ballonvenoplastik bei nicht-thrombotischen und postthrombotischen Zuständen über mehrere Zeitpunkte. Die lokale und systemische Wirkung von beschichteten und unbeschichteten Venoplastik-Ballons kann über Gewebe-, Thrombus- und Blutassays wie Echtzeit-Polymerase-Kettenreaktion (RT-PCR), Western Blot, Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA), Zymographie, Venenwand- und Thrombus-Zellanalyse, Vollblut- und Plasma-Assays und histologische Analyse quantifiziert werden. Das VBM ist reproduzierbar, repliziert chirurgische Eingriffe am Menschen, kann lokale Veränderungen des Venenwand-Thromben-Proteins identifizieren und ermöglicht mehrere Analysen aus derselben Probe, wodurch die Anzahl der benötigten Tiere pro Gruppe verringert wird.

Introduction

Tiefvenenobstruktionen durch ungelöste Thromben sind eine häufige Folge der tiefen Venenthrombose (TVT) und eine der Ursachen für das postthrombotische Syndrom (PTS), das Milliarden von Dollar im Gesundheitswesen kostet und die Lebensqualität erheblich beeinträchtigt 1,2,3. PTS ist eine einzigartige entzündliche Pathologie mit einer daraus resultierenden Venenwandfibrose4, die in den TVT-Modellen von Kleintieren nicht vollständig erfasst wurde 5,6,7, und was noch wichtiger ist, frühere Modelle können das Ansprechen auf therapeutische Interventionen nicht bewerten. Thrombotische Venenobstruktionen werden häufig durch Stents und Ballonvenoplastik behandelt 8,9; Solche Eingriffe werden durch eine hohe Reinterventionsrate aufgrund von Restenose und Okklusion erschwert 10,11,12.

Trotz der Verfügbarkeit von medikamentenbeschichteten Ballons zur Behandlung arterieller Stenosen/Verschlüsse gibt es keine für tiefe Venen. Der molekulare Mechanismus hinter der Restenose ist in den Venen nur unzureichend verstanden und es gibt keine direkte Therapie4. Daher ist es unser Ziel, ein Tiermodell vorzustellen, das lokal verabreichte Therapeutika über Venoplastikballons testen kann, die postthrombotische Obstruktionen der tiefen Vene simulieren. Dieses Modell reproduziert den postthrombotischen Zustand und bewertet, wie sich verschiedene Arten von Venoplastikballons in vivo auf die Venenwand auswirken.

Protocol

Das folgende Protokoll folgt den Richtlinien und Richtlinien des Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) der University of Michigan (UMICH), den Grundsätzen der US-Regierung für die Nutzung und Pflege von Wirbeltieren, die in Tests, Forschung und Ausbildung verwendet werden, und den ANARRIVE-Richtlinien 2.0. Das UMICH Animal Welfare Assurance-Abkommen ist konform mit OLAW und USDA und ist vollständig von AAALAC International akkreditiert. Dieses Protokoll wurde mit der ID-Nummer PRO00010841 genehmigt. Es w…

Representative Results

Das VBM ist ein Modell, das die Wirkung von Venoplastikballons bei der vollständigen Blutstillungskontrolle bewertet. Zunächst quantifizierten wir den IVC-Durchmesser (mittlerer infrarenaler Schnitt), wie in Abbildung 1 gezeigt, für die korrekte Ballongröße. Zweitens ist die entwickelte mikrochirurgische Schritt-für-Schritt-Technik in Abbildung 2 dargestellt, und wir zeigen auch Beispiele für die kritischen Schritte in Abbildung 3</st…

Discussion

Die VBM kann an Ratten ≥ 250 g mit Ballons im Bereich von 2,5 bis 3,5 mm durchgeführt werden. Bei Ratten mit einem Gewicht von mehr als 750 g ist die Technik durch eine höhere Menge an Fettgewebe in der Bauchhöhle und die Organgröße begrenzt und nicht durch Veränderungen des IVC-Durchmessers. Aus unserer Erfahrung haben wir festgestellt, dass 10 oder mehr Tiere pro Gruppe erforderlich sind, um eine statistische Signifikanz zwischen den Gruppen für die Analyse von Venenwandproteinen oder Aktivitätsassays und die…

Offenlegungen

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Diese Studie wird durch das American Venous Forum (AVF) 2023 Basic Science Research Grant und Surmodics, Inc. unterstützt.

Materials

3-0 DemeCRYL DemeTech G183019F4P 12 per box
5-0 DemeCRYL DemeTech G285017B0P 12 per box
7-0 DemeLENE DemeTech PM197011F13M 12 per box
8-0 DemeLON DemeTech NL868007C7P 12 per box
Angled Clip Applier SCANLAN 3795-01A 7-1/4″ (18.5 cm)
Baxter 0.9% Sodium Chloride Irrigation Bottle Baxter SKU: 195-7124 1000mL Bottle
Bovie Cautery Low Temperature Fine Tip Symmetry Surgical Inc AA00 10/bx
Buprenorphine Fidelis Animal Health SKU- 099114 1.3mg/mL, 3mL
CD (Sprague Dawley) Rats Charles River Strain Code 001 Male, 400 gm
Clip-It Traceable Timer TRACEABLE PRODUCTS Cat. No. 5046
Cotton-Tip Applicator 3" Dukal Corporation 922-00037BX100 1000/BOX
Enzymatic Surgical Instrument Detergent and Presoak Medline MDS88000B9 1 Gal
Eye Lube Optixcare SKU-065441 20gm 
Gaymar T/Pump Stryker Localized Warming/Cooling Therapy System Stryker TP700
Heifetz Microclips 12mmx2.25mm SCANLAN 3795-20 Straight
Heifetz Microclips 12mmx2.25mm SCANLAN 3795-28 Curved
Heifetz Microclips 8mmx1.75mm  SCANLAN 3795-14 Straight
Heifetz Microclips 8mmx1.75mm  SCANLAN 3795-18 Curved
Inflation device  Merit Medical IN4130 BasixCOMPAK with Analog Display
Isoflurane MFR VETONE SKU-501017 100mL, Liquid for Inhalation
Microsurgery kit containing tweezers and forceps Customized
Oxygen, E-tank Medline MDM1630
Sharpened Guidewire Customized
Sterile Glad Press-n-Seal Glad SKU # PSS-140 ETO Exposed
Sterile Nonwoven Gauze Sponges 2s 4ply 4×4  Medline SKU PRM21444H 100Ct
Surgical microscope  Zeiss S100 / OPMI pico
Surgical Scrub & Handwash Vetoquinol NDC: 17030-003-16 16 oz
Ultrasound Gel Medline CTR001305 8.5 oz, 12/CS
Ultrasound system Siemens ACUSON Antares 3-D, Color, Continuous wave (CW), Pulsed wave (PW), Power CW/CW Spectral
Venoplasty Balloon Customized

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Diesen Artikel zitieren
Moreno, O., Luke, C. E., Clay, A., Durham, L., Rocco, S., Kumar, K., Parchment, N., Babcock, D. E., Myers, D. D., Wakefield, T. W., Henke, P., Obi, A. T. Rodent Inferior Vena Cava Venoplasty Balloon Model. J. Vis. Exp. (207), e66820, doi:10.3791/66820 (2024).

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