JoVE Journal > Biology
Summary
Abstract
Introduction
Protocol
Ergebnisse
Discussion
Offenlegungen
Acknowledgements
Materials
Referenzen
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.
Biologie

מידול מפרצת אבי העורקים הבטני מתקדם בעכברים על ידי שילוב של אלסטאז מקומי ו-ß-aminopropionitrile פומי

Published: July 26, 2024
doi:
10.3791/66812
, , ,
1Division of Vascular Surgery, Department of Surgery,University of Wisconsin-Madison School of Medicine and Public Health, 2Division of Vascular Surgery and Endovascular Therapy,University of Florida College of Medicine, 3Department of Cell and Regenerative Biology,University of Wisconsin-Madison School of Medicine and Public Health

Summary

פרוטוקול זה מתאר גישה כירורגית שיטתית למידול מפרצות מתקדמות באבי העורקים הבטני בעכברים על ידי שילוב של יישום אלסטאז ישירות על אבי העורקים האינפרא-כלייתי ומתן ß-aminopropionitrile דרך מי שתייה.

Abstract

מודל האלסטאז מורין המקומי של מפרצת אבי העורקים הבטני (AAA) משופר בשילוב עם מי שתייה בתוספת ß-aminopropionitrile (BAPN) כדי לייצר באופן אמין מפרצת אינפרא כלייתית אמיתית עם התנהגויות המחקות AAA אנושי. יישום מקומי של אלסטאז על האדוונטטיה של אבי העורקים האינפרא-כלייתי גורם נזק מבני לשכבות האלסטיות של דופן אבי העורקים ומתחיל התרחבות מפרצת. מתן משותף של BAPN, מעכב ליזיל אוקסידאז, מקדם ניוון מתמשך של דופן על ידי הפחתת קולגן ואלסטין קרוסלינקינג. שילוב זה גורם ל- AAAs גדולים המתרחבים בהדרגה, יוצרים פקקת תוך לומינלית ומסוגלים להיקרע. זיקוק טכניקות כירורגיות, כגון בידוד היקפי של כל קטע אבי העורקים האינפרא-כלייתי כולו, יכול לסייע בסטנדרטיזציה של ההליך ליישום עקבי ויסודי של אלסטאז לבלב חזירי למרות אופרטורים שונים ושינויים אנטומיים בין עכברים. לכן, מודל האלסטאז/BAPN הוא גישה מעודנת לגרימת AAA כירורגית בעכברים, אשר עשויה לשחזר טוב יותר מפרצות אנושיות ולספק הזדמנויות נוספות לחקר צמיחת מפרצת וסיכון לקרע.

Introduction

מפרצת מוגדרת כהתרחבות פתולוגית של כלי דם הגדול מ-50% מקוטר כלי הדם הבריא1. למרות שמפרצת אבי העורקים הבטני (AAA) היא מצב שכיח באוכלוסייה המזדקנת, עם שכיחות של כ ->5% מהגברים > גיל 65, אין אסטרטגיות טיפוליות מכוונות לטיפול ב- AAA1. הניהול הנוכחי של AAA מוגבל להפחתת גורמי סיכון ותיקון כירורגי עם ניתוח פתוח או אנדוסקולרי המבוסס על קוטר אבי העורקים או קצב גדילה2. הסכנה הגדולה ביותר של AAA היא קרע במפרצת, שהוא קטלני אם אינו מטופל, ותיקון במצב חירום זה יכול לשאת סיכוני תמותה של למעלה מ -90%1.

הפתופיזיולוגיה של AAA היא מסובכת, רב-גורמית, ולא מובנת במלואה3. תכונות של AAA אנושי כוללות התרחבות מפרצת אמיתית של דופן אבי העורקים עם חדירה של תאים דלקתיים, נוכחות של פקקת intraluminal, והתרחבות מתקדמת שמובילה בסופו של דבר קרע 3,4. בנוסף, AAAs קשורים לגיל מתקדם, יש דומיננטיות מין זכר:נקבה 9: 1, ומתרחשים לרוב באבי העורקים האינפרא כלייתי5. מידול כל התכונות וההתנהגויות של AAAs אנושיים בבעלי חיים נותר אתגר מתמשך6.

מידול AAA הנוכחי מתבצע בעיקר בעכברים, ומפרצות מושרות בדרך כלל באחת משלוש שיטות – על ידי עירוי אנגיוטנסין II (AngII) באמצעות משאבה אוסמוטית מושתלת תת עורית, ועל ידי יישום ישיר של סידן כלורי (CaCl2) או אלסטאז לאבי העורקים7. בשיטה השנייה, אלסטאז לבלב חזירי (PPE) מוחל על קטע של אבי העורקים האינפרא כלייתי וגורם לפירוק אנזימטי של סיבי אלסטין בתוך הלמלה האלסטית של מדיה טוניקה. נזק מבני זה גורם להיחלשות דופן אבי העורקים ולהרחבת המפרצת כלפי חוץ. השימוש באלסטאז מקומי בלבד, לעומת זאת, מייצר מפרצות אינפרא כלייתיות קטנות יחסית, שאינן מצליחות לגדול או להיקרע בהדרגה לאורך זמן. לאחרונה, Lu et al. שיפרו מודל זה על ידי מתן β-aminopropionitrile (BAPN), מעכב בלתי הפיך של ליזיל אוקסידאז, לעכברים שלהם שטופלו באלסטאז8. על ידי מניעת קישור צולב של סיבי אלסטין וקולגן, תוספת BAPN גורמת לאבי העורקים פגום אלסטאז להתרחב בהדרגה עד כדי קרע. למודל האלסטאז/BAPN יש גם שיעור היארעות גבוה יותר של AAA מאשר למודל האלסטאז המקומי, והמפרצות המיוצרות גם גדולות יותר ומכילות פקקת אינטרלומינלית8.

במודל אלסטאז/BAPN, מידת הדיסקציה הכירורגית והחשיפה של אבי העורקים לאלסטאז יכולה להשפיע על ההצלחה והשכפול של מודל זה. בכתב יד זה, אנו מתארים כי מתן משותף של מי שתייה BAPN ויישום אלסטאז מקומי על אבי העורקים לאחר בידוד היקפי של כל המקטע האינפרא-כלייתי של אבי העורקים משפר את יכולת השכפול, מסביר הבדלים אנטומיים בין בעלי חיים, ומביא לשיעור השראת AAA גבוה יותר, גודל מפרצת ושכיחות קרע. במאמר זה נתאר גישה סטנדרטית לגרימת מפרצת מתקדמת באבי העורקים הבטני בעכברים באמצעות שילוב של מים עם אלסטאז מקומי ומים בתוספת BAPN.

Protocol

פרוטוקולים של בעלי חיים מאושרים על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים של אוניברסיטת ויסקונסין-מדיסון (M005792). 1. תחזוקת בעלי חיים לגדל עכברים על צ’או תחזוקה סטנדרטית. השתמש עכברים בוגרים או עכברים בוגרים צעירים (8-12 שבועות).הערה: שימוש במבוגרים מבטיח שבעלי החיים הגיעו לבגרות מלאה ומגביל כל סיכוי ששינויים בקוטר אבי העורקים יכולים להיות קשורים לגדילת בעלי חיים. במחקר זה השתמשנו בעכברי C57BL/6J זכרים ונקבות בגילאי 22-24 שבועות בזמן הניתוח. לו ועמיתיו לא הבחינו בהבדלים משמעותיים בתגובת המפרצת בין עכברים צעירים ומבוגרים8. בנוסף, בעוד שרוב מידול המפרצת מבוצע בעכברים זכרים, מודל זה גורם בהצלחה ל-AAAs הן בעכברים זכרים והן בנקבות9. לקבוע את משך המחקר ולהקצות בעלי חיים לקבוצות טיפול או דמה (ביקורת). יש לתת 0.2% BAPN למי שתייה לעכברי קבוצת הטיפול ולהעביר אותם לניתוח עם מריחה מקומית של אלסטאז פעיל על אבי העורקים האינפרא-כלייתי. לנהל מים לא מטופלים כדי לשלוט בבעלי חיים ולהכפיף אותם לניתוח עם יישום של אלסטאז denatured על אבי העורקים אינפרא כלייתי. 2. התחלת שימוש במי שתייה עם תוספת B-aminopropionitrile (BAPN) יומיים לפני הניתוח יש להתחיל בטיפול בעכברים על 0.2% BAPN מי שתייה. הכינו מי BAPN בכמויות גדולות יותר ואחסנו אותם בחושך בטמפרטורה של 4°C למשך עד 28 ימים. ודאו שמי BAPN מגיעים לטמפרטורת החדר לפני שאתם נותנים אותם לעכברים.הערה: אנו ממליצים להחליף מי BAPN בכלובים כל 7 ימים לאורך כל תקופת המחקר. 3. יום הכנת חומר הניתוח חתכו את הכפפות הכירורגיות לרצועות בגודל 5 מ”מ x 10 מ”מ, אשר ישמשו מאוחר יותר כדי לסייע בבידוד אבי העורקים לפני הטיפול באלסטאז. הכינו וילון כירורגי על ידי חיתוך אליפסה בגודל ~ 1.5 ס”מ x 3 ס”מ במרכז שפשוף כירורגי. פרשו את ה-2 אינץ’ x 2 בגזה וחתכו לשניים כדי ליצור רצועות גזה בגודל של כ-2.5X10 ס”מ שישמשו מאוחר יותר לנסיגה של תוכן הבטן. בצעו אוטוקלאבים של כל כלי הניתוח (ראו טבלת חומרים) והקימו שדה כירורגי סטרילי כפי שניתן לראות בדוגמה באיור 1. איור 1: דוגמה למערך הניתוחים הסטריליים כהכנה למודל אלסטאז/BAPN מורין של AAA. קיצורים: BAPN = ß-aminopropionitrile; AAA = מפרצת אבי העורקים הבטני. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה. הכינו כלוב התאוששות לאחר הניתוח על ידי הצבת כלוב נקי מתחת למנורת חום והניחו מי מלח ליד המנורה לחימום לטמפרטורת הגוף (37 מעלות צלזיוס). ודא שמנורת החום ממוקמת בבטחה כך שכלוב ההתאוששות והמלח חמים אך אינם עולים על 37 מעלות צלזיוס. הפעל את משאבת המים כדי להתחיל להזרים מים חמים דרך כרית החימום. 4. הכנת בעלי חיים לניתוח הכניסו את העכברים לתא זירוז והרדימו אותם עם איזופלורן 5% במהירות של 200 מ”ל/דקה באמצעות וופורייזר אלקטרוני בזרימה נמוכה. בזמן הרדמה, לשקול כל עכבר ולספק 0.6 מ”ג / ק”ג של buprenorphine ER ו 20 מ”ג / ק”ג של carprofen תת עורית עבור שיכוך כאבים. השתמש גוזמי שיער חשמליים כדי לחתוך את הפרווה על הבטן, מן הבטן התחתונה כדי נחות של תהליך xyphoid. השתמשו בגזה או במגבון מעבדה כדי להבריש שיער עודף. החזירו עכברים לכלוב שלהם והמתינו לפחות 20 דקות עד ששיכוך כאבים ייכנס לתוקף לפני שימשיכו בניתוח. לאחר לפחות 20 דקות מאז מתן משככי הכאבים, הניחו את העכבר בתא השראת הרדמה ושוב ספקו 5% איזופלורן במהירות של 200 מ”ל/דקה באמצעות וופורייזר אלקטרוני בזרימה נמוכה עד להרגעת העכבר. הסר את העכבר המורדם מתא האינדוקציה והנח אותו בשכיבה על שדה הניתוח. החל ג’ל עיניים ולאבטח את חרוט האף עם סרט כירורגי. הפחיתו את האיזופלורן הנשאף לשיעור תחזוקה של 1-2% ב-50 מ”ל/דקה. אבטח את כפותיו הקדמיות והאחוריות של העכבר באמצעות סרט ניתוח. בדוק את הבטן התחתונה של העכבר עבור שלפוחית השתן. הפעילו בעדינות לחץ חיצוני על שלפוחית השתן בין האגודל, האצבע המורה והאצבע האמצעית כדי לגרום להתרוקנות; בינתיים, השתמש חתיכת גזה כדי לנדף את השתן.הערה: יש להיזהר שלא לזהם את שדה הניתוח. התחילו לחטא את הבטן על ידי מריחת פילינג על בסיס יוד או כלורהקסידין ו-70% אלכוהול עם מקלוני צמר גפן. התחילו במרכז הבטן ועבדו החוצה בתנועה מעגלית פי 3. הניחו לאזור להתייבש לזמן קצר בין השימושים. בדוק אם אין תגובה של צביטת בוהן כדי לוודא שההרדמה מספקת. ודא שחרוט האף והגפיים מאובטחים. הניחו וילון כירורגי מעל העכבר, כאשר הפתח ישירות מעל הבטן שהוכנה בניתוח.הערה: אין לגרור את הווילונות על פני העכבר כדי למנוע זיהום אפשרי. 5. אינדוקציה כירורגית של AAA כניסה לחלל הבטן:יש לשטוף ידיים וללבוש ניטריל נקי או כפפות כירורגיות סטריליות. לפני המגע עם שדה הניתוח, יש לרסס תמיד את הכפפות עם 70% EtOH ולשפשף את כפות הידיים זו בזו עד לייבוש. השתמשו במלקחיים קהים כדי לקבע את העור בקו האמצע של הבטן. השתמש מספריים כירורגיים כדי לעשות ניק קטן בעור, ולאחר מכן להאריך את החתך אורך, בערך 2-3 ס”מ אורך. השתמש במלקחיים כדי להרים את שרירי פי הטבעת כדי לזהות את linea alba השקוף. השתמש מספריים כדי להיכנס לחלל הבטן דרך linea alba, ולאחר מכן להאריך לאורך linea alba קרוב ו distally. חשיפת אבי העורקים הבטני:מרטיבים רצועת גזה ושני מקלוני צמר גפן במי מלח מחוממים. צור גליל בטן על ידי גלגול חזק של קצה אחד של הגזה באמצע הדרך, משאיר זנב נדיב. השתמש במשחזר עור כדי לסגת את דופן הבטן הימנית. באמצעות מקלוני צמר גפן לחים, בצעו סיבוב ויסצרלי ימני-מדיאלי על ידי טאטוא עדין של המעי הדק והגס לרביע העליון השמאלי ודמיינו את אבי העורקים ואת הווריד הנבוב התחתון (IVC). השתמשו בגליל בטן כדי למשוך את המעי מחוץ לטווח הראייה – תחבו את הקצה המגולגל של הגזה מתחת למעי, ואז הביאו את קצה הזנב סביב הגוף ומחוצה לו כדי להחליק בעדינות את המעי. החל מתח עדין על זנב הגזה כדי להחזיק את המעי מחוץ לשדה הראייה. התאימו את גליל הבטן ואת מסיר העור כדי לקבל תצוגה אופטימלית של האיברים הרטרופריטוניאליים, כפי שמוצג באיור 2A.הערה: גליל הבטן מסייע לשמור על לחות המעי ולהגן עליו מפני נזק בשוגג על ידי כלי ניתוח. ודא כי הגזה נשארת לחה במהלך ההליך כדי למנוע את המעי להתייבש. היזהר לא למשוך בכוח את המעי כמו זה יכול לגרום קימוט של עורק mesenteric העליון ואת כלי הדם המעי, אשר עלול לגרום נזק איסכמי. יתר על כן, כאשר גורפים תחילה את המעי הדק, יש להיזהר מחיבור שקוף דק בין המעי הגס לבין הכבד הנחות (הרצועה הפטוקולית), שאם לא נזהרים, יכולים בקלות לקרוע את קפסולת הכבד ולגרום לדימום. אם יש מתח על רצועה זו במהלך הנסיגה, לחלק אותו בחדות עם מספריים. איור 2: ייצוג של נסיגה בטנית ותצוגה ניתוחית אופטימלית לחשיפת אבי העורקים האינפרא-כלייתי של עכבר. (A) מיקום גליל בטן גזה מסייע לסגת את האיברים התוך בטניים, בעוד שחוזר נגדי מסייע במתן הדמיה של הרטרופריטונאום. וילון כירורגי סטרילי (שקוף כדי להראות אוריינטציה של בעלי חיים) מונח מעל החיה המורדמת כדי לסייע בשמירה על סטריליות. (B) הפאשיה הרטרופריטוניאלית (קופסה ירוקה) מכסה את אבי העורקים הקדמי. (C) דוגמה לאבי העורקים האינפרא-כלייתי לאחר דיסקציה של הפאשיה הרטרופריטונאלית. בידוד אבי העורקים מה- IVC יכול להיות מושג על ידי התחלה ברווח פוטנציאלי בין אבי העורקים ל- IVC הממוקם רק דיסטלי לווריד הכליה השמאלי כשהוא חוצה קדמית (עיגול צהוב). קיצור: IVC = נבוב ורידי נחות. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה. דיסקציה היקפית ובידוד של אבי העורקים האינפרא כלייתי:ודא כי IVC ואבי העורקים האינפרא כלייתי נמצאים בתצוגה מלאה. התחילו לחשוף את אבי העורקים על-ידי הזנה וחלוקה ראשונית של הפאשיה הרטרופריטונאלית (RP) (איור 2B). זהו את עורקי הגונדל (האשכים או השחלות) שעוברים במקביל לאורך אבי העורקים האינפרא-כלייתי הקדמי (איור 2B ואיור 3). השתמשו במלקחיים כדי לחלק בבוטות את הפאשיה בין עורקי הגונדל והמשיכו לאורך כדי לחשוף את אבי העורקים הקדמי (איור 2C).הערה: RP fascia היא שכבה דקה ושקופה של רקמת חיבור המכילה לימפה ואת מקלעת splanchnic. יש צורך לנתח דרך RP fascia כדי לחשוף את אבי העורקים. עם זאת, אין לנתח דרך רקמת החיבור של adventitia אבי העורקים. קרע באדוונטטיה (רקמת חיבור לבנה) יחשוף את המדיה (נראה אדום בוהק), ואבי העורקים צפוי להיקרע באתר זה לאחר מריחת האלסטאז. לאחר מכן, להתחיל לבודד את אבי העורקים הבטני מחוץ IVC. התחילו את הדיסקציה הזו ברווח קטן בין IVC לאבי העורקים, הממוקם ממש מתחת לקצה התחתון של וריד הכליה השמאלי כשהוא חוצה את אבי העורקים (איור 2C). השתמש בקצות המלקחיים כדי לפזר בעדינות את סיבי רקמת החיבור בין אבי העורקים ל- IVC והמשך לעבוד סביב אבי העורקים ברמה זו.הערה: ה- IVC הוא בעל דופן דקה מאוד ונצמד לאבי העורקים על ידי שכבה עדינה של רקמת חיבור סיבית. יש להקפיד להימנע ככל האפשר מטיפול IVC או ניקוי IVC. ניתוח הצד הימני של אבי העורקים מחוץ ל- IVC תחילה (לפני ניתוח הצד השמאלי של אבי העורקים מהשרירים שמסביב) יעזור לאבי העורקים “ליפול” מה- IVC. המשיכו לנתח בבוטות את המישור בין אבי העורקים ל- IVC, תוך עבודה קאודלית לכיוון התפצלות אבי העורקים. יש להפסיק דיסקציה דיסטלית נוספת ברגע שמגיעים לביפורקציה של אבי העורקים.הערה: יש לנקוט משנה זהירות בעת ניתוח סביב העורק המזנטרי התחתון (IMA), הממוקם בדרך כלל בסמוך לחלק האמצעי של אבי העורקים האינפרא-כלייתי ונע לרוחב על פני ה- IVC. לאחר הפרדת הקצה הימני של אבי העורקים מה- IVC, חזור בסמיכות לרמה של וריד הכליה השמאלי. יש לנתח את RP fascia מהקצה השמאלי הלטרלי של אבי העורקים, ולעבוד סביב עד שאבי העורקים מבודד לחלוטין. ראו איור 3 לאנטומיה הרלוונטית של דיסקציה רטרופריטוניאלית.הערה: היזהר לנתח מאחורי אבי העורקים מכיוון שיש שונות גבוהה במיקום ובמספר הוורידים והעורקים המותניים. ראו איור 4 להתייחסות לאזורים בסיכון גבוה לדימום בדיסקציה זו. יש לבדוק היטב כי אבי העורקים מבודד ככל האפשר מה- IVC ומהשרירים הסובבים אותו, תוך דיסקציה זהירה סביב מקטעי אבי העורקים הקשורים על ידי IMA והעורקים המותניים. הניחו רצועה של כפפה לאורך הקצה הימני והשמאלי של אבי העורקים, כפי שמודגם באיור 5A. נסו לכסות כמה שיותר מה-IVC. השתמש בקליפרים ידניים כדי למדוד את קוטר אבי העורקים הרחב ביותר ולהקליט שלוש מדידות. רססו את קצות הקליפרים ב-70% EtOH לפני ואחרי מדידות. הימנע ממגע ישיר עם אבי העורקים עם קצות הקליפר כדי למנוע זיהום.הערה: ניתן להשתמש גם בתמונות המשתמשות במיקרוסקופ מכויל התומך במצלמה. איור 3: אנטומיה של אספקת הדם לבטן התחתונה, לאגן ולרטרופריטונאום של העכבר. קיצורים: R = ימין; L = שמאל. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה. איור 4: אתרים בסיכון גבוה לפציעה ודימום במהלך דיסקציה רטרופריטוניאלית ובידוד היקפי של אבי העורקים האינפרא-כלייתי. קיצורים: L = שמאל; IMA = עורק מזנטרי נחות. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה. איור 5: תגובות תוך ניתוחיות ליישום אלסטאז או דמה במהלך מודל אלסטאז/BAPN murine AAA. (A) מקטעים של כפפה ממוקמים לאורך אבי העורקים לפני יישום האלסטאז כדי לסייע בהגנה על IVC והמעי מפני חשיפה לאלסטאז תוך שמירה על אבי העורקים ספוג באלסטאז (B) יישום של אלסטאז מפורק אינו גורם להתרחבות של אבי העורקים (קופסה כחולה). הקוטר המרבי של אבי העורקים נמדד 0.627 מ”מ בנקודת ההתחלה, ולאחר מכן 0.607 מ”מ לאחר 5 דקות של אלסטאז מפורק מקומי. (C) מריחת אלסטאז גורמת להתרחבות אבי העורקים לאחר 5 דקות של טיפול. בדוגמה זו, אבי העורקים (ירוק) התרחב ל-0.953 מ”מ מ-0.607 מ”מ, עלייה של 57% בקוטר. קיצורים: BAPN = ß-aminopropionitrile; AAA = מפרצת אבי העורקים הבטני. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה. יישום אלסטאז:השתמשו במקלון צמר גפן כדי לטפוח דם או נוזל נוסף מאבי העורקים. לאחר מכן, מניחים 10 מ”מ x 2 מ”מ חתיכת גזה יבשה על גבי אבי העורקים. השתמש פיפטה כדי להוציא 5 μL של אלסטאז (או לשלוט אלסטאז defurated) כדי להרוות את הגזה ואת אבי העורקים. קפלו בעדינות את חתיכות הכפפה סביב אבי העורקים.הערה: להכנת אלסטאז מפורק לשימוש בקבוצות דמה או ביקורת, יש להרתיח אלסטאז בטמפרטורה של 100°C למשך 30 דקות. המתינו 5 דקות לאלסטאז לפעול על אבי העורקים. במהלך תקופת דגירה זו, במידת הצורך, שחררו חלק מהמתח המופעל על ידי גליל הבטן והעור הנסוג.הערה: בשל אפקט האצווה עם אלסטאז, אנו מעודדים חוקרים להשתמש באותו בקבוק אלסטאז עבור כל הניסויים במחקר נתון. עם כל בקבוק חדש של אלסטאז, אנו ממליצים לבצע תגובת מינון כדי להבטיח שאין מספר מכריע של קרעים מוקדמים (לפני 4 שבועות). ניתן גם לכוונן את משך השימוש באלסטאז בין 4 ל-6 דקות בהתאם לתגובה לאלסטאז. לאחר 5 דקות, אפסו את נסיגת המעי ופרשו את חתיכות הכפפה. להשקות את חלל הבטן עם 1 מ”ל של חם 0.9% סטרילי רגיל מלוחים, תוך הסרת בזהירות את הגזה ואת חתיכות הכפפה מן אבי העורקים. לספוג את מלוחים בבטן עם 10 ס”מ x 10 ס”מ גזה. חזור על השקיית הבטן בסך הכל 3 x 3 מ”ל. השתמש בקליפרים ידניים כדי למדוד מחדש את הקוטר הרחב ביותר של אבי העורקים לאחר יישום אלסטאז והקלט 3x. ראו איור 5B,C לדוגמאות של התרחבות אבי העורקים לטיפול בדמה ואלסטאז פעיל.הערה: ניתן להשתמש בממוצעים של שלוש המדידות לפני ואחרי האלסטאז כדי לחשב את אחוז השינוי בקוטר אבי העורקים עם הטיפול. בדרך כלל, יש התרחבות בולטת ~ 30-50% מיד לאחר הטיפול באלסטאז, מה שיכול לעזור להבטיח שהאלסטאז פונקציונלי ושאבי העורקים טופל כראוי. הקוטר של אבי העורקים לא צריך להשתנות עם היישום של אלסטאז denatured או עשוי להיות מעט קטן יותר (כנראה מ עווית). סגירת חלל הבטן:בזהירות להסיר את גליל הבטן מתחת למעי אל מחוץ לגוף. במידת הצורך, יש למרוח מי מלח נוספים על המעי כדי למנוע הידבקות לגליל הבטן במהלך ההסרה. בדקו שהמעי נראה ורוד ומחורר כראוי.הערה: אין צורך לנסות למקם מחדש את המעי בחזרה למיקומו המקורי; ניסיון כזה עלול להסתכן בפיתול המעי או בקע פנימי. יש לקרב מחדש את הפאשיה הבטנית באמצעות תפר מונופילמנט פועל 5-0 שאינו נספג. יש לסגור את העור עם 3-4 סיכות עור. 6. טיפול בבעלי חיים לאחר הניתוח הכנס את העכבר לכלוב ההתאוששות בעזרת מנורת חום. ודאו שטמפרטורת הכלוב חמה ולא חמה. מתן בולוס נוזל תת עורי 0.5-1 מ”ל של 0.9% מלוחים רגילים. אפשרו לעכבר להתאושש בעצמו בכלוב המחומם למשך ~20 דקות עד להפעלתו בהתאם לפרוטוקול המוסדי, ואז חזרו לכלוב דיור. על פי פרוטוקול מוסדי, לנהל carprofen 20 מ”ג / ק”ג ב 24 שעות לאחר הניתוח ביום 1 לאחר הניתוח, ולהמשיך מדי יום במשך 3 ימים. 7. מדידת אבי העורקים וקציר רקמות לאחר המתת חסד עם איזופלורן ונקע צוואר הרחם, לפתוח מחדש את חלל הבטן. הרחיבו את החתך דרך עצם החזה כדי לגשת לבית החזה. הבלו את האטריה הימנית ומחוררים את החדר השמאלי עם 10 מ”ל של תמיסת DPBS קרה 1% במשך 2 דקות. כריתת הריאות, הכבד והטחול.הערה: היזהר לא לפגוע במעי; שפיכה של תוכן אנטרי יכולה להשפיע על ניתוח רקמות. לחשוף את אבי העורקים הבטני, ולמדוד את קוטר אבי העורקים האינפרא כלייתי המקסימלי, כמתואר לעיל. ממשיכים לנתח את כל אבי העורקים והלב. לאחר בידוד הלב ואבי העורקים, חתכו את כל ענפי העורקים והעורקים האיליאק המשותפים והותירו מקטעים קצרים שלמים על אבי העורקים. מקם את הלב ואבי העורקים על רקע מנוגד לצד סרגל ותמונה. 8. ניתוח נתונים ודיווח כדי להסביר טעויות אנוש, מדדו את קוטר אבי העורקים לפחות פי 3 כל אחד בעת שימוש בקליפרים ידניים, ולאחר מכן דווחו על הקוטר כערך הממוצע. הגדירו AAA כעלייה של 50% בקוטר אבי העורקים הבריא. הקפד לכלול הן את קוטר אבי העורקים הגולמי והן את אחוז השינוי בקוטר בתוצאות המחקר.

Representative Results

במחקר זה נעשה שימוש בעכברי C57BL/6J זכרים ונקבות בגילאי 22-24 שבועות. אבי העורקים האינפרא-כלייתי טופלו ב-5 מיקרוליטר אנזים אלסטאז (6.9 מ”ג חלבון/מ”ל, 6 יחידות למ”ג חלבון) או באלסטאז מפורק במשך 5 דקות. עכברים זכרים שטופלו באלסטאז הדגימו עלייה של 43.4% בקוטר אבי העורקים לאחר חשיפה של 5 דקות לאלסטאז בהשוואה לקוטר אבי העורקים הבסיסי שלא טופל, בעוד שאבי העורקים הנקבי שטופל עלה ב-33.6% (P = 0.0342). בקוטר אבי העורקים של שמס לא חל שינוי יחסי בחשיפה של 5 דקות לאלסטאז מפורק (זכרים 0.5%; נקבות 2.8%-). לא היו מקרי מוות הקשורים לניתוח בקרב 12 העכברים שטופלו ו-6 עכברי דמה. נתוני המחקר בן 28 הימים מוצגים בטבלה 1. מבין נקבות העכברים שטופלו, 3 מתוך 6 מתו מקרע AAA; אחד ביום ה-20 שלאחר הניתוח ושניים ביום ה-25 (איור 6). לא היו קרעים AAA בקרב גברים שטופלו. AAAs (המוגדרים כעלייה >50% מקוטר אבי העורקים הבסיסי או מוות מקרע AAA) הושרו בהצלחה בכל העכברים שטופלו (12 מתוך 12). לאחר 28 ימים, קוטר AAA הממוצע של זכרים שטופלו היה 2.86 ± 0.31 מ”מ, עם שינוי ממוצע באחוזים של 257 ± 54%, בעוד שקוטר AAA של נקבות העכברים ששרדו ששרדו היה 3.60 ± 1.87 מ”מ, עם שינוי ממוצע באחוזים של 417 ± 286% (תרשים 7). עכברי דאם לא הראו שינוי יחסי בקוטר אבי העורקים. איור 6: הישרדות של עכברי B6 זכרים ונקבות במהלך מודל אלסטאז/BAPN של AAA במשך 28 יום. (A) קרע AAA התרחש ב-3 מתוך 6 נקבות העכברים שטופלו (עכבר אחד לאחר 20 יום, ולאחר מכן שני עכברים לאחר 25 יום) בעוד שלא היו קרעים בקרב 6 העכברים הזכרים שטופלו לאחר 28 יום. (B) תמונות מייצגות בנקרופסי של נקבת עכבר שמתה מקרע AAA. קרע AAA מודגם על ידי שטף דם רטרופריטוניאלי גדול (משמאל) ונוכחות של AAA אינפרא כלייתי עם פגם בקיר (מימין). קיצורים: BAPN = ß-aminopropionitrile; AAA = מפרצת אבי העורקים הבטני. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה. איור 7: קטרים מרביים של אבי העורקים האלסטאז/BAPN ועכברי B6 זכרים ונקבות דמה לאחר 28 ימים. (A) עכברים שטופלו מציגים קטרים אינפרא-כלייתיים גדולים משמעותית לאחר 28 ימים בהשוואה לשמס. (B) השילוב של אלסטאז ו-BAPN מייצר בהצלחה AAAs אינפרא-כלייתיים גדולים הן בעכברי B6 זכרים והן בנקבות. קיצורים: BAPN = ß-aminopropionitrile; AAA = מפרצת אבי העורקים הבטני. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה. 86 זכר שאם 86 נקבה Sham 86 זכר Elastase/8APN 86 נקבה Elastase/8APN מספר עכברים 3 3 6 6 גיל (שבועות) 35.9 ± 0.0 36.5 ± 0.7 37.1 ± 0.2 37.3 ± 0.2 משקל (g; בניתוח) 58.4 ± 2.5 38.1 ± 1.2 52.8 ± 1.7* 38.1 ± 0.8 קוטר אבי העורקים לפני הטיפול (mm) 0.89 ± 0.02 0.75 ± 0.04 0.81 ± 0.07 0.73 ± 0.09 קוטר אבי העורקים לאחר הטיפול (mm) 0.90 ± 0.03 0.73 ± 0.01 1.15 ± 0.03** 0.98 ± 0.12** אחוז שינוי לאחר 5 דקות טיפול (%) 0.8 ± 4.4 -2.8 ± 5.3 43.4 ± 10.2*** 54.1 ± 4.5*** היארעות AAA (%) 0 / 3 0 / 3 6 / 6 6 / 6 AAA נקרע ב-28 ימים 0 / 3 0 / 3 0 / 6 3 / 6 הישרדות עד 28 ימים 3 / 3 3 / 3 6 / 6 3 / 6 קוטר אבי העורקים המקסימלי ב 28 ימים (מ”מ) 0.85 ± 0.01 0.64 ± 0.01 2.86 ± 0.31* 3.60 ± 1.87** אחוז שינוי קוטר אבי העורקים לאחר 28 ימים (%) -4 ± 2 -16 ± 2 257 ± 54* 417 ± 286** טבלה 1: תוצאות מודל 28 יום של מודל אלסטאז/BAPN מורין של AAA. הנתונים הם ממוצעים ± SD. *P<0.05, **P<0.005, ***P<0.0001 בהשוואה לביזוי של אותו המין באמצעות מבחן חד כיווני של ANOVA Fischer. קיצורים: BAPN = ß-aminopropionitrile; AAA = מפרצת אבי העורקים הבטני.

Discussion

הבנת הפתופיזיולוגיה המורכבת של AAA היא קריטית לשיפור הניהול של מחלת מפרצת אבי העורקים. בעוד אסטרטגיות חדשות יותר מפותחות באופן פעיל כדי לשפר את התוצאות הניתוחיות, AAAs עדיין נפוצים בחברה המזדקנת שלנו וקרע מפרצת נשאר גורם המוות המוביל בארצות הברית10. לכן, הצרכים הבלתי מסופקים באסטרטגיות זיהוי, מניעה וטיפול AAA מצדיקים מחקר מפרצת יסודי נוסף11.

מודלים של בעלי חיים המשחזרים באופן מדויק ויעיל את התכונות וההתנהגויות של AAAs אנושיים חיוניים למחקרים מכניסטיים של פתופיזיולוגיה של מפרצת ולזיהוי מטרות טיפוליות פוטנציאליות. בעוד שהמודלים הנוכחיים של בעלי חיים יכולים לחקות את ההיבטים העיקריים של השינויים המפרצתיים המתרחשים במחלות אנושיות, אין מודל יחיד המייצג באופן מלא את המורכבות האמיתית של AAA אנושיים. נכון לעכשיו, עכברים הם המין המקובל ביותר עבור מודלים AAA בעלי חיים. חוקרים צריכים לשקול את נקודות החוזק והחולשה השונות של כל מודל מורין עבור מחקר המפרצת הספציפי שלהם, כגון אלה שתוארו במומחיות בסקירות על ידי Daugherty et al. ו Busch et al.12,13.

השימוש באלסטאז להשראת AAA במכרסמים תואר לראשונה על ידי Anidjar et al. בשנת 199014. ערבוב אבי העורקים עם אלסטאז לבלב חזירי באמצעות משאבת מזרק יוצר התרחבות ראשונית בערך בין 50% ל -70%, והקטעים המורחבים מדגימים לטובה תכונות פתולוגיות דומות של AAA אנושי, כגון ניוון מדיאלי ודלקת אדוונטיאלית. מודל הזילוח הקלאסי, לעומת זאת, הוא ללא ספק מודל המפרצת המאתגר ביותר מבחינה טכנית, והמפרצות הנוצרות בדרך כלל בשבוע השני מתחילות להיפתר בהדרגה לאחר מכן. Bhamidipati et al. בשנת 2012 הוכיחו אז כי יישום אדוונטיטיאלי של אלסטאז יכול גם לגרום בהצלחה למפרצות דומות הניתנות לשחזור יותר בגודל15. מודל אלסטאז אקטואלי, מודל אלסטאז הרבה פחות מאתגר, אומץ באופן נרחב בחקר המפרצת. מתודולוגיה נוספת ויתרונות של מודל האלסטאז האקטואלי נדונים במאמר השיטות של שו ועמיתיו16.

מודל האלסטאז/BAPN של מורין AAA פותח על ידי לו ועמיתיו בשנת 20178. החדרת 0.2% BAPN למי שתייה שיפרה רבות מהביקורות של מודל האלסטאז המקומי הקלאסי, וכעת מייצרת מפרצות שמתרחבות ללא הרף עד כדי קרע AAA. במחקר שלהם משנת 2017, הם הדגימו כי עכברים בקבוצה שטופלה באלסטאז/BAPN היו בעלי שיעורי היווצרות AAA גבוהים משמעותית בהשוואה לקבוצת האלסטאז (93% לעומת 65%, P 800% ויצרו פקקת תוך לומינלית (53.8%), ו-46.2% נקרעו באופן ספונטני לפני סוף הניסוי. מודל זה אפשר לחוקרים לחקור גורמים שעשויים להשפיע על התקדמות המפרצת ויציבותה לאורך זמן.

ברמן ועמיתיו המשיכו לחקור את מודל האלסטאז/BAPN על ידי שינוי הריכוז של אלסטאז מקומי, משך המחקר, עיתוי מתן BAPN וההשפעה של מין בעלי חיים9. טיפול עם 5 מיקרוליטר של אלסטאז מרוכז יותר (5 מ”ג / מ”ל או 10 מ”ג / מ”ל) יצר מפרצות גדולות יותר מ 2.5 מ”ג / מ”ל במשך 56 ימים. השכיחות של היווצרות פקקת תוך לומינלית הייתה תלויה גם בריכוז האלסטאז, שהתרחש ב-28.6% מהעכברים שטופלו ב-5 מ”ג/מ”ל, וב-62.5% מהעכברים שטופלו ב-10 מ”ג/מ”ל. הם גם הדגימו שמודל האלסטאז/BAPN יכול לגרום למפרצת בנקבות עכברים. למרות שרק נקבות עכברים מעטות נחקרו (n=5), הם מצאו שהמפרצות בנקבות היו מועדות יותר לקרע (2 מתוך 5 עכברים) והיו גדולות משמעותית מנקבות AAA זכרים לאחר 56 ימים.

במאמר זה, אנו שואפים לספק שיטה להתמודד עם אחת המגבלות הגדולות ביותר של מודלים כירורגיים, והיא השונות בהליך הכירורגי. ללא הסכמה ברורה על מידת הדיסקציה ואזור אבי העורקים המטופל באלסטאז, התוצאות של מודל זה עשויות להשתנות באופן דרמטי בין בעלי חיים, חוקרים ומוסדות. ראינו שינויים אנטומיים רבים בין עכברים, כולל מספר וגודל העורקים והוורידים המותניים, ומיקום ה- IMA, המראה של וריד הגונדל השמאלי, בין היתר, אשר יכול להיות מגביל כאשר מנסים לטפל רק בחלק או קטע ספציפי של אבי העורקים האינפרא כלייתי. כאן, אנו מראים כי ניתוח מקיף של כל אורכו של אבי העורקים האינפרא כלייתי מעורק הכליה השמאלי בסמיכות לביפורקציה של אבי העורקים מסייע לספק דרגות ניתנות לשחזור של חשיפה לאבי העורקים למרות הבדלים אנטומיים תוך הגדלת ההצלחה של השראת מפרצת ומתן גבולות ברורים למפעיל. בנוסף, הגודל והמיקום הקדמי יותר של IVC נוטה לכסות את רוב אבי העורקים, אשר יכול להשפיע על כמות אבי העורקים מטופל אם לא מבודד IVC. אמנם יש צורך להסיר את החיתולית הרטרופריטונאלית כדי לחשוף את אבי העורקים, אך חשוב לא לנתח באופן מלא את רקמת החיבור של האדוונטיה מאבי העורקים ולחשוף אף אחת משכבות המדיה, מכיוון שבדרך כלל התוצאה היא קרע במהלך תקופת הדגירה האלסטאזית בת 5 הדקות. זה יכול לשמש כבקרה פנימית נוספת למידת הדיסקציה עם מודל זה, אך יכול להיות עקומת למידה מתסכלת בעת אימוץ מודל זה. בנוסף, המפעילים ילמדו אזורים בסיכון גבוה יותר (איור 4) שיכולים להיפצע בקלות במהלך הניתוח ולהוביל לדימום בלתי נשלט.

אמנם חשוב כי השלבים הפרוצדורליים של מודל זה הם עקביים, משך המחקר ואת העיתוי של אולטרה סאונד מרווח יכול להשתנות בהתאם למטרה של המחקר. התרחבות אבי העורקים מתחילה מיד עם יישום אלסטאז, אך מחקרים המשתמשים במודל זה בדרך כלל עוקבים אחר עכברים במשך 28 ימים לאחר ניתוח7, כמו בניסוי לדוגמה זה. הארכת משך המחקר צריכה להיחשב כאשר לומדים AAA מתקדם, צמיחה לטווח ארוך, היווצרות פקקת intraluminal, או קרע.

אמצעים פריאופרטיביים נוספים, כגון שמירה על טמפרטורת הגוף של בעלי החיים ומצב ההידרציה, יכולים לסייע בשיפור הישרדות בעלי החיים בהליך פולשני זה. השימוש בכרית חימום במהלך הניתוח והנחתו בכלוב התאוששות חם יכול לסייע במניעת היפותרמיה. יש לחמם מלח לפני שהוא משמש להשקיית חלל הבטן. בולוס נוזל תת עורי מיד לאחר הניתוח יכול להסביר אובדן נוזלים בלתי מורגש במהלך הניתוח, ולעזור לבעל החיים לשמור על הידרציה מספקת בשלב ההחלמה המיידי. עם טיפול זהיר ברקמות וגישה שיטתית עקבית, מודל האלסטאז/BAPN יכול להתבצע על ידי מפעיל מנוסה בין 30 דקות ל -45 דקות לעכבר ולייצר AAA אמין עם סיבוכים פריאופרטיביים נמוכים מאוד.

התוצאות שלנו מראות כי השילוב של BAPN בנוסף לדיסקציה היקפית של אבי העורקים האינפרא-כלייתי לפני יישום האלסטאז מייצר AAA גדול המתרחב ללא הרף, עם קטרים גדולים יותר ושכיחות קרע בפרקי זמן קצרים יותר. בניסוי זה, AAAs הושרו בהצלחה בכל העכברים הזכרים (6 מתוך 6) והנקבות (6 מתוך 6) שטופלו באלסטאז פעיל. חשיפה לאלסטאז במשך 5 דקות הביאה לעלייה מיידית בקוטר אבי העורקים בכ-30-40%, מה שעוזר לאשר יישום אלסטאז מוצלח ועקבי בקרב קבוצות הטיפול. בדומה לברמן ועמיתיו, הראינו כי מודל זה יכול לגרום ל-AAAs בנקבות עכברים, שגם להן יש תגובת קרע גדולה יותר מאשר לזכרים. מחצית מנקבות העכברים (3 מתוך 6) נקרעו תוך 28 יום, בהשוואה ל-0 מתוך 6 מהזכרים, אולם נקבות העכברים שוקלות פחות מהזכרים. עכברים זכרים הראו עלייה בקוטר AAA ב -257% בהשוואה ל -4% מקבוצת הביקורת הזכרית, בעוד שהנקבות ששרדו הראו עלייה בקוטר 417%, בהשוואה ל -16% מהנקבות בביקורת. קוטר אבי העורקים לא היה שונה באופן משמעותי בין העכברים הזכרים והנקבות ששרדו לאחר 28 ימים בשל מספר הקרעים הגבוה יותר בקבוצת הנקבות. אנו משערים שעכברי הדמה מציגים קוטר קטן יותר של אבי העורקים בסוף המחקר מכיוון שאבי העורקים נוטה להתרחב מעט במהלך הדיסקציה הראשונית ולאחר מכן, יוצר רקמת צלקת תוך 28 יום.

למודל האלסטאז/BAPN יש מגבלות מסוימות. דיסקציה היקפית של אבי העורקים דורשת מיומנויות כירורגיות עדינות אך מסייעת לשפר את יכולת השכפול ואת מידת השראת המפרצת. בדומה למודל האלסטאז המקומי, קיים גם אפקט אצווה בפעילות אנזים האלסטאז, ולכן חשוב להשתמש באותו בקבוק אלסטאז לכל בעלי החיים בניסוי נתון. בעוד שהשכיחות של פקקת תוך לומינלית AAA וקרע עולה עם הזמן וחומרת המפרצת, אלה אינם מובטחים ואינם ניתנים לחיזוי מלא במודל זה.

לסיכום, מודל האלסטאז/BAPN מייצר AAAs אינפרא-כלייתיים גדולים ואמיתיים הן בעכברים זכרים והן בנקבות, אשר מתרחבים בהדרגה עם הזמן, יוצרים פקקת תוך לומינלית ומסוגלים להיקרע. נקודות חוזק אלה של מודל מורין זה מסייעות לשחזר טוב יותר חלק מההתנהגויות והמאפיינים של מפרצות בבני אדם. למרות שקשה מבחינה טכנית, דיסקציה זהירה ויסודית של אבי העורקים יכולה להגביר את תגובת המפרצת. כיום, שיטת אלסטאז/BAPN היא מודל מתקדם לחקר מפרצות באבי העורקים הבטני.

Offenlegungen

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

מחקר זה נתמך על ידי המכון הלאומי ללב, ריאות ודם (NHLBI) של המכונים הלאומיים לבריאות (NIH) תחת 1R01HL149404-01A1 (BL), ופרס שירות המחקר הלאומי על שם רות ל. קירששטיין T32 HL 007936 למרכז המחקר הקרדיווסקולרי של אוניברסיטת ויסקונסין-מדיסון (JB). האיורים נוצרו או נערכו באמצעות Biorender.com. הניתוח הסטטיסטי בוצע באמצעות תוכנת GraphPad Prism 10.

Materials

0.5 L induction chamber Kent Scientific Corporation SOMNO-0530XXS anesthesia induction chamber
0.9% sodicum chloride injection, USP, 20 mL Hospira NDC 0409-4888-03 normal saline
3 mL syringe Luer-Lok Tip with BD PrecisionGlide Needle 22 G x 3/4 BD REF 309569 syringe, 22 G needle
3-Aminopropionitrile Fumarate TCI A0796 BAPN
3-Aminopropionitrile Fumarate salt Sigma-Aldrich A3134-25G BAPN
Avant Delux gauze sponges, 2" x 2" 4-Ply Medline NON26224 gauze sponges
Balding clipper Whal Clipper Corporation 8110 hair clippers
betadine surgical scrub (povidone-iodine, 7.5%) Avrio NCD 67618-154-16 betadine surgical scrub
blunt forceps ROBOZ RS-5130 blunt forceps
Buprenorphine ER-lab ZooPharm BERLAB0.5 buprenorphine
carprofen Norbrook NDC 55529-131-11 carprofen
CASTROVIEJO 5.75" straight with lock ROBOZ RS-6412 Castroviejo needle driver
cotton tipped wood applicators, 6" Dynarex No. 4302 cotton tipped wood applicators
DESMARRES 5.5' rectractor  ROBOZ RS-6672 skin rectractor 
digital caliper, 0-150 mm World Precision Instruments 501601 digital caliper
DPBS (1x) Gibco 14190-144 DPBS
Elastase from porcine pancrease Type I Sigma-Aldrich E1250-10MG elastase >4.0 units/mg protein
Ethanol 200 proof Decon Labs, Inc 2701 ethanol diluted to 70%
eye lube Optixcare 14716 eye lube
Germinator 500 dry sterilizer CellPoint Scientific, Inc 5-1450 dry bead sterilizer
heat therapy mat Adroit Medical Systems V016 heat therapy mat
heat therapy pump Adroit Medical Systems HTP-1500 heat therapy pump
isoflurane, USP Akorn Animal Health NCD 59399-106-01 isoflurane
L-10 pipette Rainin LTS 0.5-10 uL pipette
Low profile anesthesia mask, small Kent Scientific Corporation SOMNO-0801 anesthesia nose cone
micro dissector scissors ROBOZ RS-5619 micro dissector scissors
microscope Leica S9i microscope
Nii-LED high intensity LED illuminatorLED exertnal light Nikon Instruments, Inc 83359 NII-LED external dissection light
nylon 5-0 monofilament, black non-absorbable suture Oasis MV-661-V 5-0 nylon suture
polyisoprene surgical gloves, GAMMEX Non-Latex PI Micro, size 7.5 Ansell 20685975 non-latex surgical gloves
Reflex 7 mm stainless steel wound clips CellPoint Scientific, Inc 203-1000 wound clips
scale Ohaus Compass CR2200 scale
SomnofFlo Accessory Kit Kent Scientific Corporation 10-8000-71 tubing for electronic vaporizer 
SomnoFlo electronic vaporizer Kent Scientific Corporation SF2992 low-flow electronic vaporizer
SomnoPath Flow Diverter Kent Scientific Corporation SP1016 flow diverter for electronic vaporizer
SS/45 sharp forceps ROBOZ RS-4941 sharp forceps
surgical scissors ROBOZ RS-6010SC surgical scissors
vessel forceps Dumont VES 0.35 vessel forceps
DOWNLOAD MATERIALS LIST

Referenzen

  1. Kent, K. C. Clinical practice. Abdominal aortic aneurysms. New Engl J Med. 371 (22), 2101-2208 (2014).
  2. Wanhainen, A., et al. European Society for Vascular Surgery Guidelines on the management of aorto-iliac abdominal aortic aneurysms. Eur J Vasc Endocasc Surg. 57 (1), 8-93 (2019).
  3. Shimizu, K., Mitchell, R. N., Libby, P. Inflammation and cellular immune responses in abdominal aortic aneurysms. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 26 (5), 987-994 (2006).
  4. Shen, Y. H., et al. Aortic aneurysms and dissections series. ArteriosclerThromb Vasc Biol. 40 (3), e37-e46 (2020).
  5. Stanley, J. C., Veith, F., Wakefield, T. W. . Current Therapy in Vascular and Endovascular Surgery E-Book. , (2014).
  6. Morgan, S., et al. Identifying novel mechanisms of abdominal aortic aneurysm via unbiased proteomics and systems biology. Front Cardiovasc Med. 9, 889994 (2022).
  7. Yin, L., Kent, E. W., Wang, B. Progress in murine models of ruptured abdominal aortic aneurysm. Front Cardiovasc Med. 9, 950018 (2022).
  8. Lu, G., et al. A novel chronic advanced stage abdominal aortic aneurysm murine model. J Vasc Surg. 66 (1), 232-242.e4 (2017).
  9. Berman, A. G., et al. Experimental aortic aneurysm severity and growth depend on topical elastase concentration and lysyl oxidase inhibition. Sci Rep. 12 (1), 99 (2022).
  10. . Disease Control and Prevention Deaths, percent of total deaths, and death rates for the 15 leading causes of death in 5-year age groups, by race, and sex Available from: https://www.cdc.gov/nchs/nvss/mortality/lcwk1.htm (2015)
  11. Dansey, K. D., et al. Epidemiology of endovascular and open repair for abdominal aortic aneurysms in the United States from 2004 to 2015 and implications for screening. J Vasc Surg. 74 (2), 414-424 (2021).
  12. Daugherty, A., Cassis, L. A. Mouse models of abdominal aortic aneurysms. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 24 (3), 429-434 (2004).
  13. Busch, A., et al. Translating mouse models of abdominal aortic aneurysm to the translational needs of vascular surgery. JVS Vasc Sci. 2, 219-234 (2021).
  14. Anidjar, S., et al. Elastase-induced experimental aneurysms in rats. Circulation. 82 (3), 973-981 (1990).
  15. Bhamidipati, C. M., et al. Development of a novel murine model of aortic aneurysms using peri-adventitial elastase. Surgery. 152 (2), 238-246 (2012).
  16. Xue, C., Zhao, G., Zhao, Y., Chen, Y. E., Zhang, J. Mouse abdominal aortic aneurysm model induced by perivascular application of elastase. J Vis Exp. (180), 63608 (2022).

Tags

Abdominal Aortic AneurysmAAA ModelingTopical ElastaseBAPNMurine ModelAneurysmal DilationCollagen CrosslinkingElastin DegradationIntraluminal ThrombusSurgical TechniquesAneurysm GrowthRupture Risk
This article has been published
Video Coming Soon
Keep me updated:

.

PDF
DOI
DOWNLOAD MATERIALS LIST
Diesen Artikel zitieren
Bontekoe, J., Upchurch, G., Morgan, C., Liu, B. Advanced Abdominal Aortic Aneurysm Modeling in Mice by Combination of Topical Elastase and Oral ß-aminopropionitrile. J. Vis. Exp. (209), e66812, doi:10.3791/66812 (2024).
Zitat herunterladen
Nachdrucke und Berechtigungen

View Video

✖

To prove you're not a robot, please enter the text in the image below

CAPTCHA Image
Play CAPTCHA Audio
Refresh Image