Dieses Protokoll enthält technische Informationen für die Gefäßrekonstruktion mit der Manschettentechnik bei der orthotopen Lebertransplantation der Maus.
Die orthotope Lebertransplantation der Maus ist eine effektive Methode zur Untersuchung der zugrundeliegenden Mechanismen von Leberischämie und Reperfusionsschäden. Die technischen Herausforderungen stellen jedoch ein Hindernis dar, um dieses wertvolle experimentelle Modell zu nutzen und diese Fähigkeiten an die nächste Generation weiterzugeben. Der schwierigste Aspekt dieses Eingriffs ist die Gefäßrekonstruktion, einschließlich der Pfortader (PV), der infrahepatischen unteren Hohlvene (IHIVC) und der suprahepatischen unteren Hohlvene. Die Verwendung von Kunststoffmanschetten anstelle von Nähten ermöglicht eine reibungslosere PV- und IHIVC-Rekonstruktion. Bei der Rekonstruktion der Gefäße wird eine Manschette aus einem intravenösen Katheter an der Spitze des Transplantatgefäßes befestigt und die Manschette in das Empfängergefäß eingesetzt. Die beiden wichtigsten Aspekte sind die richtige Visualisierung des inneren Lumens des Gefäßes und die Vermeidung übermäßiger Krafteinwirkung. Unser Ziel ist es, einen technischen Überblick über Gefäßrekonstruktionen mit der Manschettentechnik in der Empfängerchirurgie zu geben. Diese technischen Tipps für die Manschettentechnik sollen Mikrochirurgen dabei helfen, die Gefäßrekonstruktion zu erleichtern und ihre Forschung voranzutreiben.
Die orthotope Lebertransplantation (MOLT) der Maus ist eine wirksame experimentelle Methode, über die erstmals 1991 berichtetwurde 1. Dieses experimentelle Modell, das genetisch veränderte Mäuse und verschiedene Forschungsreagenzien verwendet, hat eine entscheidende Rolle bei der Untersuchung von warmer und kalter Ischämie und Reperfusionsverletzungen gespielt. Die hohe technische Komplexität des Modells hat jedoch die Entwicklung einer Basismedizin für die Lebertransplantation behindert2. Die MOLT umfasst drei Hauptschritte: (1) die Entnahme der Leber aus der Spendermaus, (2) die Operation am Rückentisch und (3) die Implantation der Leber in den Empfänger. Unter diesen Empfängerverfahren stellt die vaskuläre Anastomose die größte Herausforderung dar. Während die suprahepatische Anastomose der unteren Hohlvene typischerweise durch eine Handnahtvervollständigt wird 2, können die infrahepatische untere Hohlvene (IHIVC) und die Pfortader (PV) mit Kunststoffmanschetten anstelle von handgenähten Nähten effizienter rekonstruiert werden.
Die anhepatische Periode bezeichnet das Intervall zwischen der Entnahme der nativen Leber des Empfängers und der Implantation des Transplantats. Um konsistente Ergebnisse zu gewährleisten, ist es zwingend erforderlich, die anhepatische Zeit auf weniger als 20 Minuten zu begrenzen. Folglich wurden Studien, die dieses Modell anwendeten, aufbestimmte Institutionen beschränkt 3,4,5,6,7,8,9. Unter den verschiedenen Stadien der MOLT ist eine reibungslose PV- und IHIVC-Rekonstruktion entscheidend, um die anhepatische Zeit zu minimieren und eine erfolgreiche Transplantation zu gewährleisten.
Die PV- und IVC-Rekonstruktion wird in der Regel mit Hilfe von Gefäßmanschetten durchgeführt, da die Manschettentechnik die Gefäßanastomose im Vergleich zu handgenähten Nähten vereinfacht 2,5,8. Die Technik, die mit der Vorbereitung der Gefäßmanschette und der sicheren Befestigung der Manschette verbunden ist, hat einen erheblichen Einfluss auf die Komplexität der Gefäßrekonstruktion des Empfängers. Unser Ziel ist es, eine detaillierte visuelle Anleitung für zahlreiche technische Tipps im Zusammenhang mit der Manschettenmethode zu geben und so die Lernkurve zu verkürzen. Diese Videoclips vermitteln ein klares Verständnis dafür, wie die Manschette an den Gefäßen befestigt und die PV und IHIVC während der Empfängeroperation rekonstruiert werden.
Das Erlernen der Gefäßrekonstruktion ist der schwierigste Aspekt auf dem Weg zu einem erfolgreichen MOLT. Die Qualität der Manschette hat einen erheblichen Einfluss auf die Schwierigkeit der Rekonstruktion, da die Größe der Mäusegering ist 5. Dieser Artikel enthält ein detailliertes Protokoll für die Vorbereitung, Befestigung und Rekonstruktion der Manschette.
Obwohl es keine großen Unterschiede zu früheren Berichten bezüglich der Manschettenpräparation und …
The authors have nothing to disclose.
Diese Arbeit wurde durch die JST-Grundlagenforschung 2022 (The Japanese Society for Transplantation) unterstützt.
16 G intravenous catheter | TERUMO | SR-FF2032 | IHIVC cuff |
20 G intravenous catheter | TERUMO | SR-FF1651 | PV cuff |
8-0 braid silk | Natsume Seisakusho | CR9-80B2 | 8-0 silk |
Belzer UW Cold Storage Solution | Astellas | Organ preservation fluid | |
Bulldog clamp | B BRAUN | FB329R | Bulldog clamp |
C57BL/6 mice | Oriental Bio Service | ||
Isoflurane inhalation solution | Viatris | Anesthesic | |
Micro Blunted Tips 0.1 mm x 0.06 mm | F.S.T | 11253-20 | Straight microforceps |
Micro Serrefine Clamp Applicator with Lock | F.S.T | 18056-14 | Vessel clip applicator |
Micro Serrefines | F.S.T | 18055-4 | Vessel clip |
No.11 Spare Blades | FEATHER Safety Razor | 11 | Blades |
Ophthalmic scissor, round handle | B BRAUN | FD103R | Microscissor |
Plastic rectangular-shaped container | Daiso | 10 cm long, 15 cm wide and 6 cm high | |
SuperGrip Tips | F.S.T | 00649-11 | Curved microforceps |
SZX7 | Olympus | SZX7 | Microscope |