Summary

Mikrobiologische Vor-Ort-Schnellbewertung für pulmonale Infektionskrankheiten

Published: March 01, 2024
doi:

Summary

Das Protokoll demonstriert einen schnellen und standardisierten Arbeitsablauf für die mikrobiologische Vor-Ort-Bewertung (M-ROSE), der drei Schritte umfasst: Herstellung von Objektträgern, Färbung und Interpretation. Dieses Protokoll wird Ärzten helfen, schnelle klinische Entscheidungen zu treffen.

Abstract

Die unverzügliche Einleitung einer empirischen antiinfektiven Therapie ist bei Patienten mit ungeklärten Lungeninfektionen von entscheidender Bedeutung. Obwohl die Bildgebung in der klinischen Praxis relativ einfach ist, erfordert ihre mangelnde Spezifität oft zusätzliche zeitaufwändige Tests wie Sputumkultur, bronchoalveoläre Lavage-Flüssigkeitskultur oder genetische Sequenzierung, um die zugrunde liegende Ätiologie der Krankheit genau zu identifizieren. Darüber hinaus kann die begrenzte Wirksamkeit der empirischen antiinfektiven Behandlung zum Antibiotikamissbrauch beitragen. Jüngste Fortschritte bei der Interpretation des mikrobiellen Hintergrunds auf ROSE-Objektträgern (Rapid On-Site Evaluation) haben es Klinikern ermöglicht, Proben umgehend durch Bronchoskopie zu entnehmen (z. B. Alveolarspülung, Schleimhautbürsten, Gewebeklemmung), was die Färbung und Interpretation am Krankenbett erleichtert, die wichtige mikrobielle Hintergrundinformationen liefert. Damit wird die Grundlage für die Entwicklung gezielter antiinfektiöser Therapien und individualisierter medikamentöser Therapiepläne geschaffen. Mit einem besseren Verständnis dafür, welche Krankheitserreger in Echtzeit Infektionen verursachen, können Ärzte unnötige Breitbandantibiotika vermeiden, die zur Antibiotikaresistenz beitragen. Die Etablierung eines schnellen und standardisierten M-ROSE-Arbeitsablaufs in den Abteilungen der Beatmungsmedizin oder auf den Intensivstationen wird den Ärzten bei der Formulierung präziser Behandlungsstrategien für Patienten helfen, was erhebliche klinische Auswirkungen hat.

Introduction

Die Technik der schnellen Vor-Ort-Evaluierung (ROSE) ist eine hocheffiziente Methode, die im Bereich der Lungenerkrankung eingesetzt wird. Es ermöglicht Echtzeit-Probenahmen und diagnostische Eingriffe und ermöglicht so eine sofortige zytologische Analyse1. Bei diesem innovativen Ansatz wird ein Teil der Gewebeprobe auf einen Objektträger geprägt, während seine Integrität erhalten bleibt. Einer der Hauptvorteile von ROSE liegt in seiner Fähigkeit, eine schnelle Interpretation klinischer Informationen durch spezialisierte Mikroskopietechniken zu ermöglichen. Dies umfasst die Analyse der Zellmorphologie, die Klassifikation, Quantifizierung, Bestimmung der Verhältnisse der Bestandteile, die Beurteilung der Anordnung, die Korrelationsanalyse, die Bewertung des Hintergrunds und die Identifizierung von Fremdkörpern. Durch die Integration all dieser Daten mit den klinischen Informationen des Patienten spielt ROSE eine entscheidende Rolle bei der Bewertung der Angemessenheit der Probenahme und der Steuerung von Interventionsverfahren und -technikenin Echtzeit 2.

Als Tochterunternehmen der ROSE-Technologie konzentriert sich die M-ROSE-Technologie in erster Linie auf die Erfassung des mikrobiologischen Hintergrunds von Zielläsionen und nicht auf die Unterscheidung zwischen gutartigen und bösartigen Zellen 3,4. Einerseits ermöglicht M-ROSE die mikroskopische Identifizierung von Krankheitserregern wie Aspergillus, Cryptococcus, Pneumocystis und Candida5. Auf der anderen Seite hat sie erhebliche Auswirkungen auf die Bewertung der Qualität von Atemwegsproben, die Unterscheidung zwischen infektiösen und nicht-infektiösen Krankheiten, die Unterscheidung von Infektionen und Kontaminationen sowie die Bewertung des Schweregrads und der Prognose der Infektion 6,7. So deutet beispielsweise die Koexistenz von Bakterien, die eine identische Morphologie aufweisen, neben infiltrierenden Entzündungszellen in einer Atemwegsprobe auf eine Infektion hin; Umgekehrt deutet das Vorhandensein mehrerer morphologisch unterschiedlicher Bakterien, die von Epithelzellen begleitet werden, auf eine Kontamination hin. Die Fähigkeit, klinische Informationen umfassend zu analysieren und Ergebnisse vorherzusagen, macht M-ROSE zu einem unschätzbaren Werkzeug bei der Behandlung von Lungenerkrankungen.

Zusammenfassend lässt sich sagen, dass ROSE als wichtiger zytologischer Träger dient, der die Effizienz und Präzision der Diagnose von Lungenerkrankungen erheblich verbessert. Seine vielseitigen Funktionen tragen zu verbesserten Patientenergebnissen bei, indem sie ein rechtzeitiges Eingreifen gewährleisten und eine genaue Diagnose durch Echtzeit-Probenahmen und diagnostische Interventionstechniken ermöglichen. Es ist jedoch wichtig zu beachten, dass diese Fortschritte auf der Gewinnung qualifizierter Proben beruhen. Darin stellen wir ein standardisiertes M-ROSE-Protokoll vor, das die Vorbereitung des Objektträgers, Färbetechniken und Interpretationsrichtlinien umfasst. Dieses Protokoll dient als unschätzbare Referenz für Kliniker, um genaue Bewertungs- und Behandlungspläne zu erstellen und gleichzeitig die Entscheidungsfindung hinsichtlich der anschließenden Handhabung von Zielproben zu erleichtern.

Protocol

Die klinische Studie wurde vom Zulassungsausschuss des Chongqing Hospital of Traditional Chinese Medicine genehmigt (Nr. 2022-ky-31). Der typische Fall betraf einen Patienten, bei dem eine Pneumocystis-Pneumonie diagnostiziert wurde, und es wurde eine Einverständniserklärung des Patienten eingeholt. 1. Ausrüstungs- und Materialanforderungen für ROSE Ausrüstung: In der Datei “Table of Materials ” finden Sie die in diesem Protokoll verwendeten Ger…

Representative Results

In einem typischen Fall kam ein 63-jähriger Mann mit Husten, Fieber und Schmerzen in der Brust ins Krankenhaus. Bei dem Patienten wurde zuvor ein nephrotisches Syndrom diagnostiziert, das durch Proteinurie und Ödeme gekennzeichnet ist, und er wurde lange Zeit mit Prednison und Tacrolimus behandelt. Die ersten Laborbefunde zeigten eine Anzahl weißer Blutkörperchen von 10,49 x 109/L, eine Neutrophilenzahl von 8,87 x 109/L, ein C-reaktives Vollblutprotein und (1-3)-β-D-Glucan-Konzentrationen von 1…

Discussion

Die interventionelle Pneumologie ist ein wertvoller Zweig der modernen Atemwegserkrankungen. Insbesondere wurde es häufig bei der Diagnose von Lungenerkrankungen eingesetzt 8,9. In den letzten Jahren hat die diagnostische interventionelle Pneumologie aufgrund der zunehmenden Prävalenz von pulmonalen bösartigen Tumoren, der zunehmenden arzneimittelresistenten Erregerinfektionen in den unteren Atemwegen und der Forderung nach Diagnosen von rätselhaften und krit…

Offenlegungen

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Wir danken dem Leistungsanreiz- und Beratungsprojekt der Chongqing Scientific Research Institution (jxyn-2021-1-15 und jxyn-2021-2-6) für die finanzielle Unterstützung.

Materials

Cytological microscope Olympus Corporation CX43
Diff Quik (DQ) staining solutions Besso Biotechnology Co. LTD G1541
Disposable 2.5-5 mL syringe needles Shandong Zhu Pharmaceutical Group 20183150304
Powder-free latex gloves Henan Yadu Industrial Co., LTD 20182140728
Sterile cell culture slides Jinan Preret industry and trade Co., LTD 7101

Referenzen

  1. Zhang, S., et al. Diagnostic value of endoscopic ultrasound-guided fine needle aspiration with rapid on-site evaluation performed by endoscopists in solid pancreatic lesions: A prospective, randomized controlled trial. J Gastroenterol Hepatol. 37 (10), 1975-1982 (2022).
  2. Bruno, P., et al. Efficacy and cost effectiveness of rapid on site examination (ROSE) in management of patients with mediastinal lymphadenopathies. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 17 (11), 1517-1522 (2013).
  3. Li, T., et al. Microbiology rapid on-site evaluation: a better method for Mucoid Pseudomonas Aeruginosa diagnosis in bronchiectasic patients. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 26 (5), 1738-1742 (2022).
  4. Tao, Y., et al. Application of microbiological rapid on-site evaluation in respiratory intensive care units: a retrospective study. Ann Transl Med. 10 (1), 7 (2022).
  5. Yan, P., et al. The value of microbiology rapid on-site evaluation of sepsis caused by pulmonary infection. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 27 (12), 5862-5868 (2023).
  6. Muri, R., Trippel, M., Borner, U., Weidner, S., Trepp, R. The impact of rapid on-site evaluation on the quality and diagnostic value of thyroid nodule fine-needle aspirations. Thyroid. 32 (6), 667-674 (2022).
  7. Wang, Z., Shi, Y. Application of rapid on-site evaluation in contemporary pediatric interventional respiratory diseases. Chinese Journal of Practical Pediatrics. 12, 470-475 (2019).
  8. Shah, P. L., Herth, F. J. F. Progress in interventional pulmonology. Respiration. 95 (5), 287-288 (2018).
  9. Hsia, D., Musani, A. I. Interventional pulmonology. Med Clin North Am. 95 (6), 1095-1114 (2011).
  10. Moore, A. J., Mercer, R. M., Musani, A. I. Advances in interventional pulmonology. Clin Chest Med. 39 (1), 271-280 (2018).
  11. Majid, A., Fernandez-Bussy, S., Folch, E. Interventional pulmonology and solitary pulmonary nodule. Arch Bronconeumol. 54 (10), 497-498 (2018).
  12. Ali, M. S., Sorathia, L. Palliative care and interventional pulmonology. Clin Chest Med. 39 (1), 57-64 (2018).
  13. Czarnecka, K., Yasufuku, K. Interventional pulmonology: focus on pulmonary diagnostics. Respirology. 18 (1), 47-60 (2013).
  14. Schacht, M. J., et al. Endobronchial ultrasound-guided transbronchial needle aspiration: performance of biomedical scientists on rapid on-site evaluation and preliminary diagnosis. Cytopathology. 27 (5), 344-350 (2016).
  15. Pearson, L., et al. Rapid on-site evaluation of fine-needle aspiration by non-cytopathologists: A systematic review and meta-analysis of diagnostic accuracy studies for adequacy assessment. Acta Cytol. 62 (4), 244-252 (2018).
  16. Arimura, K., et al. Cryobiopsy with endobronchial ultrasonography using a guide sheath for peripheral pulmonary lesions and DNA analysis by next generation sequencing and rapid on-site evaluation. Respir Investig. 57 (2), 150-156 (2019).
  17. Gianella, P., et al. Utility of rapid on-site cytologic evaluation during endobronchial ultrasound-guided transbronchial needle aspiration in malignant and nonmalignant disease. Acta Cytol. 62 (5-6), 380-385 (2018).
  18. Natella, V., Cozzolino, I., Sosa Fernandez, L. V., Vigliar, E. Lymph nodes fine needle cytology in the diagnosis of infectious diseases: clinical settings. Infez Med. 20, 12-15 (2012).
  19. Baughman, R. P., Spencer, R. E., Kleykamp, B. O., Rashkin, M. C., Douthit, M. M. Ventilator associated pneumonia: quality of nonbronchoscopic bronchoalveolar lavage sample affects diagnostic yield. Eur Respir J. 16 (6), 1152-1157 (2000).
  20. Petrone, M. C., et al. Does cytotechnician training influence the accuracy of EUS-guided fine-needle aspiration of pancreatic masses. Dig Liver Dis. 44 (4), 311-314 (2012).

Play Video

Diesen Artikel zitieren
Weng, X., Sun, W., Luo, Z., Zhou, Y., An, X. Microbiological Rapid On-Site Evaluation for Pulmonary Infectious Diseases. J. Vis. Exp. (205), e66059, doi:10.3791/66059 (2024).

View Video