眶后静脉注射的新生儿啮齿动物模型

该方案为将物质注射到新生小鼠和大鼠的眶后窦中提供了一种明确而精确的方法。这很重要，因为它表明，在年龄大于 P2 的啮齿动物中，可以可靠且可重复地进行眶后注射，其中浅表颞静脉/面部静脉不再可辨别，而在比 P12 更年轻的动物中，眼睑尚未打开，眼球未暴露。此外，幼崽和水坝都对新生儿眶后注射有很好的耐受性，一旦掌握了该技术，副作用的风险就会降到最低。

与其他给药途径相比，静脉注射具有优势，因为它们允许注射高浓度以及低pH值和高pH值，前提是注射速率保持恒定和低，以避免血管破裂。此外，静脉注射允许化合物在直接进入体循环时更快地分布，从而绕过在其他给药途径中观察到的吸收不良的潜在延迟。这允许化合物的即时获取和接近 100% 的生物利用度。

临床上，静脉注射是新生儿（< 28 日龄）的首选给药途径。在新生儿重症监护环境中尤其如此，因为静脉插管可以很容易地提供药物/液体。通过皮下途径注射已在一定程度上用于新生儿，特别是用于促红细胞生成素¹⁵ 的给药。然而，已经提出了担忧，一项研究表明静脉输注是一种更好的替代方法¹⁶。当新生儿在医院重症监护病房时，口服给药通常不是一个实用的选择。此外，与成人相比，新生儿的胃肠道存在差异，包括胃排空延迟和肠蠕动下降，从而影响药物吸收。由于新生儿肌肉质量小，肌肉注射难以进行 ^3,4。

在啮齿动物研究中，最广泛使用的静脉注射方法之一是尾静脉注射。然而，这种方法在处理新生儿时是不可行的。其他静脉部位，如颞浅静脉/面部静脉⁶ 在 P3 处变得不可见。新生儿横窦已在一项研究中被描述，并在 P0-P1 下进行，并在显微镜的帮助下，打开皮肤并将毛细血管针穿过颅骨进入横窦，允许 2-4 μl 体积注射⁷。很少有研究记录在大鼠 P7 处使用颈外静脉¹⁷.然而，这是一种侵入性技术，需要手术打开皮肤并暴露颈外静脉¹⁸。在对成年啮齿动物的研究中，眶后给药已被证明与尾静脉注射⁵ 一样有效，从而加强了眶后途径的可行性和相关性。眶后注射引起的痛苦最小，一旦掌握，可以由一个人用最少的设备进行，并允许多次注射（确保眼睛交替）。先前的研究表明，眶后注射已被用于在 P0-P1 或 P14-P21¹¹ 或 P17¹⁹ 的小鼠中施用腺相关病毒 9，这表明这种方法越来越被接受。

新生儿眶后注射存在一些局限性。与所有静脉注射一样，注射量是有限的，我们推荐 5 μL/g 用于此过程。此外，眶后注射需要全身麻醉。为了尽量减少并发症，建议使用吸入麻醉剂，如异氟烷，因为这些药物在麻醉诱导中更快，代谢快，恢复率快。需要训练，最好在终末麻醉的动物中使用有色染料，以避免由于针头斜面放置不正确而导致注射部位周围的潜在肿胀或眼外伤。由于这些动物的体型小，需要更细的针头，针规小。细胞注射必须在单细胞悬浮液中进行，以避免血管阻塞，并确保细胞活力。令人鼓舞的是，Amer 及其同事的一项研究表明，即使在高细胞密度射出的情况下，使用 30 G 注射器注射哺乳动物细胞仍能提供可靠的细胞活力²⁰。

总之，在新生儿中建立可靠的静脉给药途径具有临床意义，因为这是人类首选的给药途径。眶后注射可以很容易地掌握，是可重复的，并为其他静脉注射部位提供了相关的替代方案，例如尾巴和颞/面部静脉，这些部位在整个啮齿动物新生儿期都无法可靠使用。因此，新生儿眶后注射允许在适当的新生儿年龄输送药物、细胞和其他化合物。