与年龄相关的听力损失是世界上最常见的疾病之一，影响着世界上三分之一以上的65岁及以上人口¹。其根本原因仍在争论中，并正在积极研究，但可能包括连接内毛细胞（IHC）和传入听觉神经纤维的特殊突触^的丧失2。这些带状突触包括突触前结构，其囊泡充满与其相连的神经递质谷氨酸盐，以及突触后α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异噁唑丙酸（AMPA）谷氨酸受体^3，4，5。在沙鼠中，约20个传入听觉神经纤维接触一个IHC^6，7，8。IHC上面向莫迪奥卢斯的纤维与大突触带相对，而连接IHC柱侧的纤维则面向小突触带（即，在猫⁹，沙鼠⁷，豚鼠¹⁰和小鼠^{3，11，12，13，14}中）。此外，在沙鼠中，突触前带和突触后谷氨酸斑块的大小正相关^7，14。与IHC的双极侧的大带相对的纤维口径小，自发率低，阈值高¹⁵。有证据表明，低自发率纤维比位于IHC¹⁵柱侧的高自发性低阈值纤维更容易受到噪声暴露¹⁰和耳毒性药物¹⁶的影响。

带状突触的丧失是耳蜗神经年龄相关性听力损失中最早的退行性事件，而螺旋神经节细胞及其传入听觉神经纤维的丧失则落后于^17，18。电生理相关性包括听觉脑干反应¹⁷ 和复合动作电位⁸的记录;然而，这些并不反映突触丢失的微妙之处，因为低自发率纤维不有助于这些措施¹⁶。更有希望的电生理学指标是质量电位衍生的神经指数¹⁹ 和周震颤时间响应²⁰。然而，只有当动物除了听觉神经纤维丧失之外没有其他耳蜗病理影响剩余听觉神经纤维^的活动时，这些才是可靠的8。此外，沙鼠的行为评估阈值与突触数²¹无关。因此，只有通过直接检查耳蜗组织，才能可靠地定量存活的带状突触，从而确定功能性听觉神经纤维的数量。

蒙古沙鼠（Meriones unguiculatus）是研究与年龄相关的听力损失的合适动物模型。它的寿命短，具有与人类相似的低频听力，易于维护，并且与与年龄相关的听力损失相关的人类病理学表现出相似性^{2，22，23，24}。沙鼠在达到36个月大时被认为是衰老的，这接近其平均寿命的结束²²。重要的是，在安静环境中饲养和老化的沙鼠中已经证明了与年龄相关的带状突触丧失^8，21。

在这里，提出了一种免疫标记，解剖和分析不同年龄的沙鼠（从年轻人到老年人）的耳蜗的方案。使用针对前突触 （CtBP2）、突触后谷氨酸受体贴片 （GluA2） 和 IHC （myoVIIa） 成分的抗体。应用自发荧光淬灭剂，减少老化耳蜗的背景，使荧光信号完好无损。此外，还描述了如何解剖耳蜗以检查感觉上皮和纹状血管。测量耳蜗长度是为了能够选择与特定最佳频率相对应的不同耳蜗位置²⁵。突触数的定量是使用免费软件ImageJ²⁶进行的。使用Matlab中编写的软件自定义来执行单个HC中突触体积和位置的额外定量。该软件不公开，因为作者缺乏提供专业文档和支持的资源。