该协议的目标是通过化学花园注射实验形成模拟热液烟囱,并利用可用于教育目的的 3D 可打印冷凝器在无机沉淀膜上引入热梯度。
深海热液喷口是地球化学不平衡产生的自组织沉淀物,被提议为生命出现的可能环境。利用不同的热液模拟剂(如硫化钠)成功地模拟了早期地球通风系统中热梯度环境中热液烟囱的生长,硫化钠被注入含有溶解铁的早期地球海洋模拟物中。此外,还开发了一种仪器,在浸入冷水浴的冷凝容器中将海洋模拟物充分冷却到接近 0 °C,同时在室温下将硫化物溶液注入,在几个小时的温度梯度环境中有效地形成人工烟囱结构。这种不同化学成分和可变温度梯度的实验导致烟囱结构中的各种形态。在室温下使用海洋和热液模拟剂导致垂直烟囱,而热热液和冷海洋模拟剂的结合抑制了坚固的烟囱结构的形成。为这项研究而制造的可定制的3D打印冷凝器作为一种带夹克的反应容器,可以很容易地被不同的研究人员修改和使用。它将允许仔细控制喷口和海洋模拟剂的喷射率和化学成分,这将有助于准确模拟烟囱系统中的益生菌反应,其热梯度与自然系统相似。
热液烟囱是自组织化学花园,在深海通风口环境中由地球化学不均衡产生的沉淀物,加热的、热液变化的液体渗入较冷的海洋。在早期的地球情景中,有人提出,在古代碱性通风口形成的烟囱,以及转瞬即逝的环境pH/redox/化学梯度,可能促使人们对于新陈代谢1、2、3、4、5、6的出现产生反应。热液喷口也被假设存在于其他行星上,包括海洋世界,欧罗巴和恩塞拉杜斯7,8,9,10。已进行多项实验,以模拟建议的益生菌热液烟囱化学方面,包括催化硫化铁矿物的沉淀,可减少CO211,12,梯度驱动有机合成13,14,15,并将有机物纳入烟囱结构16。在创建模拟热液喷口的实验设置时,无论是在地球上还是在其他世界,必须考虑地球化学梯度和系统的开放性、远非平衡性,以产生逼真的模拟。
除了pH值、氧化物和化学梯度外,热液喷口还由于加热通风液进入寒冷的海底环境,在烟囱膜/墙壁上施加热梯度。寒冷的海底海洋温度可能因深度、太阳渗透和盐度而变化:通风口的平均海底海洋深度(大多位于洋脊中部)在0-4°C17之间。根据通风口的类型,海洋和通风液之间的热梯度可能与碱性喷口的较温和梯度发生显著变化,例如失落之城18、19或喷口液为40-90°C20、21的斯特里坦热液场,以及深海海底的黑色吸烟者,其中通风液可以达到几百摄氏度。 23,24,25。从生命起源的角度来看,热液系统中热梯度的模拟意义重大,因为它们可能影响烟囱沉淀3、13和/或可能影响可居住性,因为热液烟囱承载着直接从矿物表面接收电子的微生物。在烟囱壁的梯度中,会在短时间内出现一系列温度条件,烟囱壁将代表矿物和所有这些热系统的反应特征的组合。
模拟了热梯度中实验室培育的热液烟囱,以探索冷海洋和热热液对潜在益生菌环境的影响。一般来说,由于通过内部加热和冷外部加热的喷射方法种植模拟热液烟囱会带来实际挑战,因此最容易获得的烟囱实验是在环境压力下进行的(因此不需要昂贵和复杂的反应堆)。以前在热梯度中试验实验室种植的烟囱不能同时产生热/暖热液和冷海。为了使整个烟囱长时间处于高温状态,形成能驱动有机反应的活性矿物,一些研究使用加热套或热水浴13、14将整个实验(海洋和热液)加热到+70°C。另一种类型的烟囱沉淀形成实验,在”燃料电池”装置中,在扁平膜模板上形成烟囱壁模拟:这些实验也通过将燃料电池梯度装置浸入热水浴池27、28中批量加热。先前的研究已经形成了模拟热液烟囱从热液(加热到+70°C使用各种方法)注入室温海洋3,12:然而,一个寒冷的海洋没有尝试。
这项工作推进了益生菌烟囱生长实验室模拟4 的方法,以创建一个现实的热梯度从寒冷(0-5°C)海洋到加热热液,其中合成烟囱材料和测试感兴趣的属性。迄今为止,还没有一个益生菌烟囱实验成功地进行了与碱性通风口的现实温度梯度:与内部通风液保持在 +70 °C 和外部海洋溶液冷却到 €5 °C。 此外,在已经进行的少数加热烟囱实验中,实验设置很复杂,而且成本高昂。化学花园实验有很大的潜力,可以深入了解早期地球热液喷口中可能发生的过程。因此,能够快速设置烟囱实验的多种变异是有利的,因为能够有一个简单仪器,是便宜,不脆弱,易于修改,理想的学生工作。这里展示的是一种新仪器(图1),旨在促进模拟热液烟囱的生长,同时保持和监测冷海和加热热液模拟体之间的现实热梯度。这种实验装置在设计上与夹克反应堆相似,但是一种三维(3D)打印冷凝器,任何有兴趣进行类似实验的研究小组都可以轻松生产(见 补充可打印文件)。利用这种3D打印冷凝器,进行了热梯度烟囱实验,以测试该仪器对保持强健温度梯度的效用,并测试温度梯度对烟囱结构和形态的影响。
热梯度对模拟烟囱生长的影响:由于几个实验参数,这种实验装置在烟囱形态上产生了几个变化。硫化铁和氢氧化铁的烟囱在室温下形成了高大的直立结构,但在热梯度实验中形成了更脆弱、细腻的沉淀物或扁平的土堆。这与赫希等人的发现一致,即由加热至70-80°C的热液形成的轻盈、非直立的烟囱沉淀物,并注入室温海洋模拟物33。对此有多种可能的解释:对流热转移可导致更多的自然浮力(以及喷射的强制泵送),使沉淀物在形成时迅速流向海洋容器的顶部。或者,加热注射器液使热液模拟体密度降低,因此比在注射点顶部稳定更易垂直上升。通过将注射器注射率改为较慢的速率,使结构更加稳定,可以减轻这种影响。怀特等人检查了硫化铁烟囱的生长情况,以极慢的速度注射热液模拟剂(0.08 mL/h),虽然烟囱需要数天时间才能合并,但结构稳定。由于Herschy等人使用的渗透泵的喷射速率为10-120 mL/h,这比我们热梯度实验中使用的速率快几个数量级,因此它们也产生了串状烟囱结构33,这并不奇怪。
海洋中沉淀反应物和通风溶液的浓度较高,也会在热梯度中产生更坚固的烟囱。热液或海洋模拟物中沉淀离子(硫化物或氢氧化物)的化学浓度较高,可导致整体沉淀质量升高,从而形成更强的结构。由于赫希等人和怀特等人在热液(10mM)中使用的硫化物浓度较低,因此其结构比使用更高(20-50mM)硫化物浓度的硫化物结构要小。此外,一些硫化铁烟囱生长的研究还包括热液中的二氧化硅以及硫化钠,这有助于产生更坚固的烟囱3,13,33。硅化学花园结构也被用来模拟热液烟囱生长34的各个方面,这些往往产生非常坚固的结构,可以从管/瓶中去除物理分析。然而,温度梯度对二氧化硅注射结构的影响尚不清楚,并将成为进一步研究的一个领域。
考虑未来的烟囱模拟实验:本研究中为冷却海洋容器而制造的3D打印冷凝器就像一艘带夹克的反作用容器,但有一些实际改进:1)开放式顶部允许对烟囱进行取样,并保持氧化海洋头空间:2) 3D 打印部分具有易于重复性:3) 由于设计可以进行数字编辑,因此可以根据需要快速修改和重新打印设备:4) 使用廉价材料使每个冷凝器比实际玻璃护套反应容器更具成本效益。这些 3D 打印冷凝器是一种灵活且易于共享的实验设备,可成为标准化不同研究组模拟热液烟囱实验平台的有用方法,从而更好地比较样品和数据。冷凝器的文件可以发送给同事自己打印,用于教育或科学目的(参见此作品中使用的冷凝器的补充 3D 打印文件)。这种廉价的设置也可以用作化学花园或化学实验的本科实验室实验29,35。
最后,本文描述了一种利用3D打印促进模拟热液烟囱在温度梯度环境中生长的新型实验装置。3D 打印冷凝器能够将海洋模拟冷却到接近冻结的温度,类似于海底热液系统附近的海水。同时,使用加热注射器模拟注入这个寒冷海洋的高温热液。硫化铁和氢氧化铁烟囱的形态和结构受到热梯度的影响:当海洋和热液模拟体处于室温下时,烟囱形成垂直导向结构,但当热液被加热和海洋冷却时,强健的烟囱结构的形成受到抑制。要准确模拟这种烟囱系统中的益生菌反应,其热梯度类似于自然系统,因此有必要仔细控制诸如喷口和海洋模拟剂的喷射率和化学成分等参数。为本研究而制造的定制和廉价的3D打印冷凝器在功能上与带夹克反应容器相似,可轻松修改并以电子方式分发给各种研究和教育团体,用于多种类型的化疗实验。
The authors have nothing to disclose.
这项研究是根据与美国宇航局签订的合同,在美国宇航局天体生物学研究所冰世界的支持下,在加州理工学院的喷气推进实验室进行的。加布里埃尔·勒布朗博士通过俄克拉荷马州美国宇航局EPSCOR合作协议(NNX15AK42A)获得了部分研究启动赠款(2017-34年)的支持。我们要感谢希瑟·怀特黑德协助最初的3D打印冷凝器设计,卡林德·卡彭特协助3D打印,约翰-保罗·琼斯帮助讨论冷凝器容器,劳拉·罗德里格斯帮助温度数据分析,艾瑞卡·弗洛雷斯协助实验室。版权所有 2020 加州理工学院。
3/8-Inch Clear Vinyl Tubing | Watts | SVIG10 | Cut to desired length for experiment |
40-pin Male to Female Wire Jumper Multicolored Ribbon Cables | EDGELEC | ED-DP_L30_Mix_120pcs | These wires will require stripping of plastic ends and carefully removing one of the 2 plastic casings |
Aluminum seals | Fisher | 0337523C | Thermo Scientific National Headspace 20 mm Crimp Seals |
Ferric chloride hexahydrate | Fisher | I88-100 | Ferric Chloride Hexahydrate (Lumps/Certified ACS) |
Ferrous chloride tetrahydrate | Fisher | I90500 | Ferrous Chloride Tetrahydrate (Crystalline/Certified) |
Gear Hose Clamps | Glarks | 40Pcs | |
Gray butyl stoppers | Fisher | 0337522AA | Thermo Scientific National 20 mm Septa for Headspace Vials |
Pipette tips | VWR | 53511-682 | pipette tips 0.5-10 microliters |
Serum bottles | Sigma-Aldrich | 33110-U | Vials, crimp top, serum bottle, size 100 mL, clear glass, outer diameter x height 51.7 mm x 94.5 mm. For these experiments, the bottom of the serum bottle should be cut off. |
Sodium hydroxide | Sigma-Aldrich | S5881 | reagent grade, ≥98%, pellets (anhydrous) |
Sodium sulfide nonahydrate | Fisher | S425212 | Sodium Sulfide Nonahydrate (Crystalline/Certified ACS). Store at -20 °C. Only open in a glove box or fume hood. Releases toxic H2S gas; all sulfide-containing solutions must be kept in a glove box or fume hood. |
syringe heater | Syringepump.com | HEATER-KIT-5SP | Clamp gear hose clamps around heating blanket |
Syringe needles (16 gauge) | Fisher | 14-826-18B | BD General Use and PrecisionGlide Hypodermic Needles, 16 G x 1.5 in. (38 mm) |
Syringe Pump | Syringepump.com | NE-4000 | Dual or multiple channel, depending on desired number of simultaneous experiments |
Syringes (10 mL) | Fisher | 14-823-16E | BD Syringe with Luer-Lok Tips (Without Needle) |
Tubing | Cole Parmer | EW-06407-71 | Tygon Lab Tubing, Non-DEHP, 1/16" internal diameter X 1/8" outer diameter |
Water Circulation Pump | Bayite | BYT-7A015 | May need two people to help prime pump |