원추 수질 절개에 의한 쥐의 배뇨근 과소 모델
Summary
우리는 쥐에서 원추 수질 절개에 의한 배뇨근 과소 활동 모델을 확립하는 방법을 제시합니다. 배뇨근 기능 저하는이 동물들에서 성공적으로 자극되었습니다. 이 모델은 요로 기능을 연구하는 데 사용할 수 있습니다.
Abstract
제시된 프로토콜의 목표는 원추 수질 절개를 통해 쥐에서 배뇨근 과소 활동 (DU) 모델을 확립하는 것이 었습니다. 후궁 절제술은 체중이 200-220g 인 총 40 마리의 암컷 Wistar 쥐 (대조군 : 10 마리, 시험군 : 30 마리)에서 수행되었으며, 원추 수질은 시험군의 L4-2012L5 수준에서 형이 절제되었습니다. 모든 래트를 6주 동안 동일한 환경 조건 하에서 사육하고 먹이를 주었다. 시험군에서는 6주 동안 매일 2회 소변 배뇨를 실시하고 평균 잔뇨량을 기록하였다. 두 그룹 모두에서 방광 측정이 수행되었습니다. 최대 방광 측정 용량 (MCC), 배뇨근 개방 압력 (DOP) 및 방광의 순응도를 기록하고 계산했습니다. 시험 그룹은 척추 쇼크 동안과 후에 수술 후 상당한 요정체를 보였다. 그러나 대조군에서는 이상이 관찰되지 않았습니다. 대조군과 비교했을 때, 시험군에서 MCC 및 방광의 순응도는 시험군보다 유의하게 높았으며 (3.24 ± 2.261 mL 대 1.04 ± 0.571 mL; 0.43 ± 0.578 mL / cmH 2 O 대 0.032 ± 0.016mL / cmH 2 O), 시험군의 DOP는 대조군보다 낮았다 (20.28 ± 14.022 cmH 2 O 대 35 ± 13.258 cmH2 O). 원추 수질 절개에 의한 DU의 동물 모델을 확립하는이 방법은 DU의 병태 생리학을보다 잘 이해할 수있는 훌륭한 기회를 제공합니다.
Introduction
배뇨근 기능 저하 (DU)는 연구 된 전형적인 하부 요로 기능 장애입니다. DU는 국제 요실금 학회(ICS)1에 의해 정의되었지만 이 질병을 지칭하기 위해 “배뇨근 부전”, “수축성 방광”, “배뇨근 areflexia”2와 같은 다양한 용어가 사용됩니다. 2002 년 국제 요실금 학회 (ICS)에서 정의한 DU는 강도와 지속 시간이 감소하여 방광 비우기 시간이 장기간 증가하여 정상적인 기간 내에 방광 비우기를 완료하지 못하는 수축입니다.
DU는 하부 요로 증상이 있는 남성 (>70세)의 48%와 여성(70세)의 12%에 영향을 미칠 수 있습니다. 그것은 다 인성 인 것처럼 보이며 효과적인 치료법이 없습니다. DU는 다발성 경화증4, 당뇨병5, 파킨슨 병6 또는 뇌졸증7과 같은 신경성 방광 기능 장애 환자에서 어디에나 있는 것으로 보고되었습니다. DU는 또한 복강경 자궁 적출술, 전립선 절제술 또는 작은 골반의 다른 외과 적 개입과 같은 의원 성 신경 손상에 의해 유발 될 수 있습니다8. DU의 병태생리학적 변화와 이용 가능한 치료법은 연구를 위한 적절한 동물 모델이 없기 때문에 여전히 혼란스럽습니다.
배설 반사는 폰틴 배혈 센터, 천골 부교감 신경 핵 및 더 많은 고위 피질 센터9를 결합하는 척수-구근 척추 경로에 의해 제어됩니다. 배변 반사의 활성화 및 유지는 주로 방광에서 더 높은 피질 센터로의 감각 신호의 규칙적인 수송에 달려 있습니다. 감각 기능 장애가 DU에 기여한다고 가정 할 수 있습니다.
하부 요로 기능 장애와 관련된 대부분의 실험 동물 연구는 과민성 방광(OAB) 모델10에 초점을 맞추었습니다. 이러한 모델은 OAB 병태생리학 및 예후에 대한 합리적인 이해를 제공합니다. 그러나 척수상 손상(국소 병변, 쇠퇴 및 중뇌 동맥 폐색), 척수 절개 또는 타박상 손상, 전신(예: 사이클로포스파미드) 또는 자극제 또는 염증제(예: 산, 아크롤레인 및 지질 다당류)의 방광내 투여와 같은 몇 가지 DU 모델만 보고되었습니다.11,12,13,14 . 이러한 방법 중에서, 척수 절개 또는 타박상 손상 방법만이 DU13의 동물 모델을 확립하는데 사용될 수 있다. 폰틴 배뇨 센터와 상급 피질 센터의 부상과 관련된 시도는 심각한 외상으로 인해 포기되었습니다. 따라서 최소한의 부작용으로 DU를 유도하기 위해 배합 반사 센터에서 정확한 위치를 찾는 데 더 많은 관심을 기울이고 있습니다.
앞서 언급했듯이 DU를 유도하는 메커니즘 중 하나는 척수를 손상시켜 배합 반사의 신호 경로를 손상시키는 것입니다. Allen의 체중 감소 방법은 손상된 척수15를 가진 실험실 동물을 확립하기 위해 개발되었습니다. 그러나이 방법에 대한 추가 실험 데이터는 없습니다. 더욱이, 동물의 일부가 DU없이 뇌졸중 후 척추 기능을 회복했기 때문에, DU 동물 모델16을 생성하기 위한 완벽한 방법으로서 간주될 수 없다.
1987년, Bregman은 DU 동물 모델을 생성하기 위해 척수를 횡단하는 과정을 발굴하고 실험 데이터(17)를 획득하였다. 그럼에도 불구하고, 이 방법은 DU 동물 모델을 확립하는데 적용되지 않았다. 그 당시 연구자들은 여전히 DU의 발병 기전에 대해 혼란 스러웠습니다. OAB 또는 DU의 유도와 관련된 척수의 위치가 서로 인접하기 때문에 DU17을 유도하는 척수 손상의 정확한 부위를 찾을 수 없었습니다. OAB 및 DU는 이 방법에 의해 함께 또는 별도로 도입되었습니다. 따라서 이 방법은 DU를 도입했지만 부정확하여 DU의 발생 및 처리를 이해하는 데 사용할 수 없었습니다.
위에서 언급했듯이 DU의 적합한 동물 모델이 없다는 것은 DU의 연구의 주요 장애물 중 하나입니다. 연구원들은 DU의 병리를 시뮬레이션할 수 있는 정확하고 관리 가능한 모델을 지속적으로 찾고 있습니다. DU에 대한 치료 옵션조차도 지난 20 년 동안 크게 개선되지 않았습니다. 총체적으로, DU의 동물 모델을 확립하기 위한 표준 프로토콜을 기술할 필요가 크다.
따라서이 논문에서는 원추 수질 절개에 의한 DU의 쥐 모델을 성공적으로 확립하는 방법을 설명합니다. 원추 수질을 분리하기 위해 L4\u2012L5 수준에서 절개를 수행했습니다. 최대 방광 측정 용량 (MCC), 배뇨근 개방 압력 (DOP) 및 방광의 순응도를 기록하고 분석하여 프로토콜을 검증했습니다. 아래에 명시된 프로토콜은 타당성과 신뢰성을 표준화된 방식으로 결합하여 DU의 발생 및 처리를 시뮬레이션하는 DU 동물 모델을 설정합니다. 이 프로토콜은 DU의 추가 연구를 위한 기술로 사용될 수 있습니다.
Protocol
Representative Results
Discussion
DU는 남성과 여성 모두에서 하부 요로 증상의 일반적인 원인입니다. 영향을 받은 사람들의 삶의 질(Qol)을 크게 감소시킬 수 있는 치료 옵션이 거의 없는 복잡한 증상 집합체입니다18. DU는 다 인성이라고 믿어 지지만 병인에 대한 이해는 초보적입니다. 연구에 따르면 DU의 발병 기전은 근인성 및 신경성 요인과 관련이 있을 수 있습니다.
근원성 가설에서 DU를 가…
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
없음.
Materials
| 0.9% saline | Wuhan Prosai Company | EY-C1178 | pump for urodynamic measurement |
| 10% chloral hydrate | Shandong Yulong Co., Ltd | H37022673 | 3mL/kg，administered intraperitoneally |
| Buprenorphine Hydrochloride Injection | Tianjin Pharmaceutical Research Institute Pharmaceutical Co. LTD | H12020275 | 0.05mg/kg subcutaneously 24h and 48h postoperation |
| Epidural Catheter | Shandong Xinghua Co, Ltd | VABR3L | for urodynamic measurement |
| Penicillin G | Alta Technology Co., Ltd | 1ST5637 | 50,000 unit/ml per animal |
| pentobarbital | Beijing solabo Technology Co., Ltd | NK-WF0001 | 40 mg/kg, administered intraperitoneally |
| Suture line(4-0) | ETHICON | VCP422H | suture the injury |
| Three-limb tube | Shandong Xinghua Co, Ltd | VAB3T | for urodynamic measurement |
| Trace infusion pump | Zhejiang Smith Medical Instrument Co., Ltd | 20162540335 | Pump the saline at a speed of 0.2ml/min for urodynamic measurement |
| Urodynamic measurement equipment | Medical Measurement SystemsB.V. | 08-0467 | urodynamic measurement equipment can not only help the diagnosis of dysuria, but also provide objective materials for treatment and therapeutic effect. It is the most commonly used examination method in clinical diagnosis and treatment of lower urinary tract functional diseases |
| Wistar Rats | HFK Biotechnology Co.Ltd,Beijing ,China | SCXK2012-0023 | 200-220g |
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