生物样品中赤子酶活性的测定

奇青素是地球上仅次于纤维素的第二大多糖，是各种生物的主要结构成分，包括昆虫、真菌、酵母和藻类的外骨骼;一些脊椎动物也有奇丁1。奇西纳酶是一个酶家族，能够分解奇丁，并在从细菌到哺乳动物2、3等物种的进化过程中高度保存。除了奇他酶，哺乳动物也有丘蒂酸酶样的蛋白质，这些蛋白质在结合奇他素的能力上与奇它酶相似，但不同的是，它们缺乏酶能力来切切奇他4。

尽管奇他和奇它原体早已被研究——调查可追溯到20世纪初——但主要焦点一直是它们在昆虫和其他无脊椎动物中的作用。事实上，直到20世纪60年代，脊椎动物才被发现有丘台动物。使用基于甲苯的测定法，在包括蜥蜴和黑鸟在内的许多脊椎动物的消化道中发现了甲子酶，据推测，这种观察是由于食用了含甲氧基的有机体，如^昆虫5.

哺乳动物有两种酶活性形式的甲酸酶：酸性哺乳动物甲壳酶（AMCase;也称为CHIT2和CHIA）和甲基锡酶（CHIT1）4。这两种蛋白质都能够水解奇他蛋白。然而，CHIT1在人类中更具有酶活性，几乎所有齐齐辛酶活性都来自CHIT1。⁴在小鼠中，Chit1和AMCase几乎同样地对整个齐齐辛酶活性6作出贡献。另一方面，齐齐那酶样蛋白质缺乏齐齐那酶活性。

Chit1主要通过巨噬细胞分泌，通常被认为是对含甲苯的^病原体7的免疫反应。该酶也已被证明参与单核细胞成熟到M1和M2巨噬细胞亚型，即使没有基质甲^肽8的存在。此外，它也可能涉及其他免疫细胞的成熟，包括T帮助器2型（Th2）细胞和嗜酸性粒细胞-如在隐球菌肺^感染9中证明的情况。这些研究指出，奇塔因斯系统在免疫系统中有着复杂的作用。

近年来，Chit1水平被发现是40多种人类疾病的重要生物标志物，包括体球储存疾病、传染病、呼吸系统疾病、内分泌疾病、心血管疾病、神经系统疾病和其他疾病（^{第10页）。}在许多这些疾病中，Chit1水平是疾病严重程度和^{治疗效果的有力}预测。

由于奇质酶已经获得了作为包括高彻病等多种疾病的生物标志物的声誉，因此开发了工具和检测方法，以方便对奇他打酶的存在进行检测。较旧的方法包括沙勒斯的程序、根据血糖测试改编的方案以及 3，5 二硝基水杨酸 （DNS） 方法。然而，这些方法往往是时间敏感和技术上困难11。这两种测试的程序要求减少无机氧化剂，例如，在沙勒程序的情况下，铁氧体化物，产生一种颜色变化，只能分光光度测量。此外，这两个测试都涉及加热或沸腾步骤，既耗时又需要颜色开发12，13。

这里描述的是一种快速而简单的荧光测定，以确定哺乳动物样本14、15中的齐辛酶水平。此处使用的两个样本包括血清和支气管输液洗浴液 （BAL）;在母乳和尿液样本中也测量了齐辛酶活性，该技术可以在这些类型的样品以及任何其他生物^{液体16、17}中进行。