무혈 식단으로 무혈 모기를 후두

아래에 설명된 결과는 초기 액체 식단(i-liq_diet) 또는 신선한 혈액 식사에 공급된 풍부한 인공 식사(r-liq_diet)와 모기를 공급한 여성 Anopheles 모기의 성과를 비교합니다. 이 식단은 도 7에도시된 회로도 프로토콜에 따라 테스트되었습니다. 본 명세서에 기재된 r-liq_diet 특허의 일부입니다(PCT/IB2019/052967). 완전히 응고 된 여성의 비율 r-liq_diet 공급된 암컷 모기의 수(89%) 혈액에 공급 된 여성의 수보다 상당히 높았다 (56%) (그림8). 여성스러움과 다산 첫 번째 gonotrophic 주기에 대 한 여성 fecundity 및 불 임 i-liq_diet 및 r-liq_diet 영양 품질을 평가 하는 데 사용 되었다. 평균 24 ±11 계란신선한 척추 동물 혈액에 공급 하는 여성에 의해 마련 되었다, 반면 r-liq_diet 먹이 암컷 25 ± 5 계란의 평균 을 마련(표 2). i-liq_diet 먹이를 준 암컷은 알을 낳는 것이 관찰되지 않았다. F1 사망률 F1 모기의 적합성은 척추동물 혈액에 공급된 식민지 사이 또는 r-liq_diet 평가되었습니다. 유충, 번데기 및 성인 사망률이 기록되었다. 가변성(평균 [SEM]의 표준 오차)는 r-liq_diet 공급한 모기에 비해 혈액공급모기(도 9 및 표 2)에서더 높았다. 혈액 또는 r-liq_diet 먹이 모기의 F1 세대는 비교 사망률 및 생존율을 했다. F1 기대 수명 그것은 야생 성인 여성 모기가 한 달까지 살고 있지만 아마 1-2 주 이상 생존하지 않고 수컷이 약 일주일 동안 살고 꿀과 다른 설탕 소스에 독점적으로 공급하는 질병 통제 및 예방 센터에 의해 추정된다. 부모 음식 섭취량의 차이는 모기자손17의생존에 영향을 미칠 수 있다는 점에 유의하십시오. 우리의 실험에서, 성인 여성과 혈액에서 남성 (여성 24.5 ± 6.8; 남성 18.5 ± 6.9) 및 r-liq_diet (여성: 22.5 ± 8.1; 남성: 11.9 ± 6.9) 그룹은 유사한 평균 평균 수명을 가지고 있었다(표 3)여성에 비해 수명 증가 기간을 보였다. F1 본체 사이즈 날개 길이는 성인의 신체 사이즈의 지표로 사용되었습니다. 다른 종에 비해, Anopheles 성인은 2.8 에 4.4 mm 날개 길이18사이 날개 길이를 가진 중소형 모기입니다. R-liq_diet 공급한 F1 Anopheles 모기의 성인 체크기는 예상 범위 내에 있었고, 혈액을 공급하는 곤충 모기와 유사하였다(그림10). 통계 분석 제시된 데이터는 적어도 3개의 독립적인 실험의 평균을 나타낸다(달리 명시되지 않는 한). 오류 막대는 SEM을 나타냅니다. 데이터가 가우시안 분포를 따랐을 때, 독립 그룹은 학생의 t 시험을 사용하여 비교되었고, 그렇지 않으면 Mann-Whitney 시험이 적용되었다. 인공 식이 공급 그룹 간의 차이는 피셔의 정확한 시험을 사용하여 분석되었고 P ≤ 0.05에서 유의한 것으로 간주되었다. 그림 1: 심장 내 천자에 의한 CD1 마우스 혈액 수집. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오. 그림 2: 표준 인공 공급 장치. 유리 피더에는 여성 아노페레스 모기에게 공급되는 r-liq_diet 포함되어 있습니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오. 그림 3: 인공 수유 후 모기를 아노헬레스. 왼쪽에서 오른쪽으로: r-liq_diet 제공 된 완전히 engorged 여성, r-liq_diet 제공 된 비-engorged 여성, 남성, 그리고 마우스 혈액을 제공 했다 완전히 engorged 여성. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오. 그림 4: Anopheles 계란 r-liq_diet 가진 암컷의 사후 공급 48 시간 낳은. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오. 그림 5: L2 유충 단계는 계란으로부터 개발되어 여과지에서 수집되고 증류수를 함유하는 트레이에 놓였다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오. 그림 6: Anopheles coluzzii 여성 모기의 F1 세대에서 오른쪽 날개. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오. 그림 7: 인공 식단 테스트의 회로도 프로토콜. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오. 그림 8: 암컷 모기의 먹이 비율은 인공 식이요법이나 혈액을 먹였다. 별표는 r-액체와 i-액체 규정식 및 혈액 공급통제단을 공급한 모기 사이 중요한 다름을 표시합니다. 양면 피셔의 정확한 검사: ****P ≤ 0.0001 (상대 위험: 0.4828, 95% 자신감 수준 [CL]: 0.3776 받는 번째 0.6194) r-액체 다이어트 대 혈액에 대 한, *P = 0.0335 (상대 위험: 1.379, 95% CL: 1.044 에 대 한 혈액. 파란색: fed; 빨간색: 먹이. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오. 그림 9: F1 Anopheles coluzzii 모기의 사망률 및 남성/여성 비율에 제형화된 무혈 식사의 효과. 3개의 독립적인 실험이 각각 규정식 당 30개의 모기를 사용하여 수행되었습니다. 짝을 이루지 않은 t-검정은 혈액공급군과 r-liq_diet공급군(P값은 0.5047에서 0.8491로 다양함) 사이에 유의한 차이를 보이지 않았다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오. 그림 10: 날개 길이. 변두리 세타를 제외한 R4+5 정맥까지의 축 절개로부터의 거리를 날개 길이를 결정하는데 사용되었다. 크기는 각 식이 그룹(평균 ± SEM)에서 5명의 암컷 및 5명의 남성에 대해 평가되었다. 값은 평균 ± SEM. 연어: r-liq_diet; 빨간색: 척추혈액. 페어링되지 않은 t-검정; 여성 왼쪽 날개: t = 1.300, df = 8, P = 0.2298; 남성 왼쪽 날개: t = 2.400, df = 8, P = 0.0432; 여성 오른쪽 날개: t = 1.300, df = 8, P = 0.2298; 남성 오른쪽 날개: t = 2.277, df = 7, P = 0.0569. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오. 구성 요소 g /L *아데노신 트리포스페이트 0.55 *소 세럼 알부민 200 *콜레스테롤 1 무수 염화칼슘 0.2 콜린 염화물 0.004 D 칼슘 판토텐산 (비타민 B5) 0.004 D-포도당 무수 4.5 페릭 질산염 비나하이드레이트 0.0001 엽산 0.004 글리신 0.03 이이노시톨 0.007 L-아르기닌 모노하이드로클로라이드 0.084 L-시스틴 디하이드로클로라이드 0.063 L-글루타민 0.584 L-히스티딘 모노하이드로클로라이드 모노하이드레이트 0.042 L-이솔루신 0.105 L-류신 0.105 L-리신 모노하이드로클로라이드 0.146 L-메티오닌 0.03 L-페닐알라닌 0.066 L-세린 0.042 L-스레오닌 0.095 L-트립토판 0.016 L-티로신 디소듐 염 이수산염 0.104 L-발린 0.094 황산 마그네슘 무수 0.098 니아신아마이드 (니코틴아미드) 0.004 페놀 레드 0.015 염화칼륨 0.4 피리독신 모노하이드로클로라이드 0.004 피루브산 나트륨 염 0.011 리보플라빈 (비타민 B2) 0.0004 중탄산나트륨 3.7 염화나트륨 6.4 나트륨 인산나트륨 모노베이직 무수 0.109 티아민 아모노하이드로염화물 (비타민 B1) 0.004 *r-liq_diet 표 1: i-액체 식이및 r-액체 식이의 조성물. 총 계란 수 (± SEM) 계란/암 (± SEM) 혈액 733 ± 330 24 ± 11 r-liq_diet 763 ± 164 25 ± 5 아이 liq_diet 0 0 표 2: 아노필레스 콜루지 암컷이 생산한 달걀 배치. 각각 30마리의 암컷 모기를 사용하여 각 실험 식단에 대해 3개의 독립적인 실험을 수행하였다. 여성 (일 ± SEM) 남성 (일 ± SEM) 혈액 24.5 ± 6.8 18.5 ± 6.9 r-liq_diet 22.5 ± 8.1 11.9 ± 6.9 표 3: F1 아노헬레스 모기의 평균 수명. 인위적으로 공급된 F0에서 F1 모기의 장수는 동일한 식이 그룹 (15 명의 암컷과 15 명의 남성이 뒤따랐다)에서 오는 각 모기의 출생과 사망 날짜를 기록하여 평가되었다. 결과는 규정식 단 당 평균 모기 수명 으로 표현됩니다.